微生物培养基
微生物非常细小,必须通过培养基才能生长出来。各种微生物都有它们不同的营养特性,也就是需要各种成分不同的培养基,因此,掌握培养基的原理、制法与应用是十分重要的,是进行微生物研究的基本技能。
【培养基成分】
1. 蛋白胨
蛋白胨是用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶 等蛋白质水解酶水解酪素、兽肉、大豆蛋白等制成的。主要成分是各种氨基酸、肽类、?等可溶性氮化合物。 因此依所用原料和酶的不同,其组成也有所不同。
由于蛋白胨的质量对微生物生长、代谢产物产生影响很大, 所以采用时应注意。但即使同一牌号的产品也会因不同批次而质量有所差异,所以尽可能使用同批产品。由于蛋白胨易潮解,使用后必须将瓶子密封。
2. 牛肉膏
牛肉膏是牛肉浸出液的浓缩物,肉中的可溶性氮 化合物、维生素等生长促进因子以及无机盐都很丰富,广泛用于细菌培养。但不同牌号的商品制法不同,所以应使用同一牌号为好。
3. 酵母膏
酵母膏系啤酒酵母或面包酵母在低温下的自溶浸出汁,经低温真空蒸发而成。富含氨基酸、维生素类、无机盐类,被广泛用于微生物的培养,近来有用来取代肉膏的趋向。
4. 麦芽汁
麦芽汁是酿造啤酒前,未加酒花,未经发酵的新鲜麦芽汁,可向啤酒厂购买,也可自制:取大麦芽粉1kg,加水3L, 保温60℃使其自行糖化,直到液体无淀粉反应为止。过滤,在滤液中加2~3个鸡蛋清(有助于麦汁的澄清); 搅均匀,煮沸,再过滤,则得麦芽汁。加水冲至10~15波林备用。麦芽汁适于培养霉菌和酵母等真菌。主要成分是麦芽糖等,但也有含氮源和生长素等。
5. 米曲汁
米曲汁被广泛用来代替麦芽汁。其制法:将米曲霉接种在大米饭上,制成大米曲。取干大米曲1kg,加水3L,保温60 ℃,使之糖化,至无淀粉反应为止。然后与制麦芽汁一样,澄清、过滤。
6. 琼脂
琼脂本由石花菜制成,近来差不多以青丝菜为原 料来制备。琼脂是一种硫酸化的聚半乳糖。琼脂含有两种主要成分:琼脂糖和琼脂胶。琼脂的特点是微生物无毒害,又不为大多数微生物利用。在加热到100℃时融化,凉至45℃时凝固,所以很适合于做培养基的固化剂。
商品琼脂规格因产地不同,常含一些不纯物质,对一些试验会产生影响。
【培养基的种类】
根据培养基的组成成分,可将培养基分为三类:
1. 合成培养基:由各种纯化学物质按一定比例配制而成。
2. 半合成培养基:由一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。
3. 天然培养基:利用天然来源的有机物配制而成的。
从培养基的物理状态来分:
1. 液体培养基:不加凝固剂的液态状培养基。
2. 固体培养基:在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的固体状培养基或固体状农副产品培养基。
3. 半固体培养基:在液体培养基中加入0.2%-0.5%凝固剂而成的半固体状培养基。
微生物最常用的凝固剂为琼脂(其次为明胶),又叫洋菜、冻粉。它不是一种营养物质,只能被极少数种类的细菌分解利用。琼脂是从海藻中(主要是石花菜)提取而制成的。是一种多糖类化合物,主要成分是复杂的多糖硫酸酯钙盐,琼脂是一种可逆性胶体,在常规浓度下加热到96C以上即成溶胶状态,融化的琼脂,当温度下降到42℃以下,又凝固为固体。
蛋白胨 牛肉膏 酪蛋白胨 脑心浸出液肉汤(BHI) 鱼蛋白胨 3%氯化钠碱性蛋白胨水 游离生物素测定培养基 改良马丁琼脂培养基 真菌培养基 全系列微生物条件培养基及添加物 营养肉汤培养基 明胶蛋白胨 李斯特氏菌显色培养基 EC肉汤 庆大霉素琼脂 麦芽汁培养基 生物缓冲剂 绿脓菌素测定用培养基(PDP) LB琼脂 蜡样芽胞杆菌显色培养基 蛋白胨 蛋白胨 辅酶 培养基 麥芽瓊脂培養基 胰蛋白胨 酵母膏 缓冲溶液 染色剂 蛋白胨
【培养基成分】
1. 蛋白胨
蛋白胨是用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶 等蛋白质水解酶水解酪素、兽肉、大豆蛋白等制成的。主要成分是各种氨基酸、肽类、?等可溶性氮化合物。 因此依所用原料和酶的不同,其组成也有所不同。
由于蛋白胨的质量对微生物生长、代谢产物产生影响很大, 所以采用时应注意。但即使同一牌号的产品也会因不同批次而质量有所差异,所以尽可能使用同批产品。由于蛋白胨易潮解,使用后必须将瓶子密封。
2. 牛肉膏
牛肉膏是牛肉浸出液的浓缩物,肉中的可溶性氮 化合物、维生素等生长促进因子以及无机盐都很丰富,广泛用于细菌培养。但不同牌号的商品制法不同,所以应使用同一牌号为好。
3. 酵母膏
酵母膏系啤酒酵母或面包酵母在低温下的自溶浸出汁,经低温真空蒸发而成。富含氨基酸、维生素类、无机盐类,被广泛用于微生物的培养,近来有用来取代肉膏的趋向。
4. 麦芽汁
麦芽汁是酿造啤酒前,未加酒花,未经发酵的新鲜麦芽汁,可向啤酒厂购买,也可自制:取大麦芽粉1kg,加水3L, 保温60℃使其自行糖化,直到液体无淀粉反应为止。过滤,在滤液中加2~3个鸡蛋清(有助于麦汁的澄清); 搅均匀,煮沸,再过滤,则得麦芽汁。加水冲至10~15波林备用。麦芽汁适于培养霉菌和酵母等真菌。主要成分是麦芽糖等,但也有含氮源和生长素等。
5. 米曲汁
米曲汁被广泛用来代替麦芽汁。其制法:将米曲霉接种在大米饭上,制成大米曲。取干大米曲1kg,加水3L,保温60 ℃,使之糖化,至无淀粉反应为止。然后与制麦芽汁一样,澄清、过滤。
6. 琼脂
琼脂本由石花菜制成,近来差不多以青丝菜为原 料来制备。琼脂是一种硫酸化的聚半乳糖。琼脂含有两种主要成分:琼脂糖和琼脂胶。琼脂的特点是微生物无毒害,又不为大多数微生物利用。在加热到100℃时融化,凉至45℃时凝固,所以很适合于做培养基的固化剂。
商品琼脂规格因产地不同,常含一些不纯物质,对一些试验会产生影响。
【培养基的种类】
根据培养基的组成成分,可将培养基分为三类:
1. 合成培养基:由各种纯化学物质按一定比例配制而成。
2. 半合成培养基:由一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。
3. 天然培养基:利用天然来源的有机物配制而成的。
从培养基的物理状态来分:
1. 液体培养基:不加凝固剂的液态状培养基。
2. 固体培养基:在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的固体状培养基或固体状农副产品培养基。
3. 半固体培养基:在液体培养基中加入0.2%-0.5%凝固剂而成的半固体状培养基。
微生物最常用的凝固剂为琼脂(其次为明胶),又叫洋菜、冻粉。它不是一种营养物质,只能被极少数种类的细菌分解利用。琼脂是从海藻中(主要是石花菜)提取而制成的。是一种多糖类化合物,主要成分是复杂的多糖硫酸酯钙盐,琼脂是一种可逆性胶体,在常规浓度下加热到96C以上即成溶胶状态,融化的琼脂,当温度下降到42℃以下,又凝固为固体。
微生物培养基
蛋白胨 牛肉膏 酪蛋白胨 脑心浸出液肉汤(BHI) 鱼蛋白胨 3%氯化钠碱性蛋白胨水 游离生物素测定培养基 改良马丁琼脂培养基 真菌培养基 全系列微生物条件培养基及添加物 营养肉汤培养基 明胶蛋白胨 李斯特氏菌显色培养基 EC肉汤 庆大霉素琼脂 麦芽汁培养基 生物缓冲剂 绿脓菌素测定用培养基(PDP) LB琼脂 蜡样芽胞杆菌显色培养基 蛋白胨 蛋白胨 辅酶 培养基 麥芽瓊脂培養基 胰蛋白胨 酵母膏 缓冲溶液 染色剂 蛋白胨
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