胰蛋白胨

一种利用黑水虻制备胰蛋白胨的方法，包括如下步骤：
1）将黑水虻幼虫在35℃～70℃温度下干燥并粉碎，得到黑水虻幼虫粉；
2）采用超临界CO2萃取法对黑水虻幼虫粉进行脱油处理，温度为40～60℃，压力15～25Mpa；
3）对2）中经过脱油处理的黑水虻幼虫粉进行酶解，提取上清液，干燥后得到胰蛋白胨，胰蛋白酶用量为2000～6000U/g，酶解温度为40～60℃，酶解 时间为3～5h，缓冲液pH为7～8，底物浓度为10～20w/v。 1. 培养大肠杆菌和枯草芽孢杆菌：黑水虻胰蛋白胨中氨基酸种类丰富，除脯氨酸外，其它17 种氨基酸均在黑水虻胰蛋白胨中检测到。其中，谷氨酸、亮氨酸、赖氨酸、精氨酸、丙氨酸、缬 氨酸含量在7％以上。在微生物培养中，大肠杆菌在市售牛肉膏蛋白胨液体培养基中培养12h后，OD600为 1.739；在市售牛肉膏蛋白胨中培养24h后，生长圈直径为2.092cm。大肠杆菌在改性牛肉膏 蛋白胨培养基中培养12h后，OD600为2.119；在改性牛肉膏蛋白胨中培养24h后，生长圈直径 为4.740cm。相比市售胰蛋白胨，黑水虻胰蛋白胨对大肠杆菌生长效果更好。枯草芽孢杆菌在市售液体LB培养基（黑水虻胰蛋白胨基础上）中培养24h后，OD600为2.137；在市售固体LB培 养基中培养24h后，生长圈直径为1.152cm。枯草芽孢杆菌在改性液体LB培养基中培养12h后，OD600为2.241；在改性固体LB培养基（黑水虻胰蛋白胨基础上）中培养24h后，生长圈直径为1.998cm。相比市售胰蛋白胨，黑水虻胰蛋白胨对 枯草芽孢杆菌生长效果更好。
2. 制备一种月桂基硫酸盐胰蛋白胨MUG培养基，组分包括三糖铁琼脂培养基、1.0g/L磷酸氢二钠、0.1g/L月桂基硫酸钠、10.0g/L磷酸氢二钾、0.5g/L 磷酸二氢钾、2.5g/L苯乙醇、0.3g/LMUG、15.0g/L琼脂，0.1g/L显色剂，pH值为6.6-7.0； 所述三糖铁琼脂培养基为每升三糖铁琼脂培养基中含有胰蛋白胨15.0g、牛 肉浸粉3.0g、酵母粉3.0g、氯化钠5.0g、月示胨5.0g、乳糖10.0g、葡萄糖1.0g、蔗糖10.0g、 硫酸亚铁0.2g、硫代硫酸钠0.3g、琼脂12.0g、溴甲酚紫0.04g，其余为蒸馏水。称取本品64.5g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，加热煮沸1分钟，分装于16mm×150mm试管，121℃高压灭菌15分钟制成斜面长4-5cm，底部长2-3cm。本发明培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；菌生长迅速，变异率低；便于观察，分析。 胰蛋白胨是一类由酪蛋白为原料，经胰蛋白酶水解后制成的蛋白胨，富含色氨酸。是许多异养微生物的优良氮源，用于细菌的培养、分离、增殖、鉴定，胰蛋白胨还能够检测罐头食品中的“平酸”或硫化物酸败细菌，所以也可用于无菌测试培养基，以及厌氧菌培养基等细菌生化特性试验用培养基的配置。胰蛋白胨还广泛应用于高品质的抗生素、胞外蛋白、干扰素、白喉类毒素、维生素等医药工业，氨基酸、有机酸、酶制剂、黄原胶等发酵工业，生化制品及微生物学科研等领域中。临床用于抗炎消肿，工业上用于皮革制造，生丝处理，食品加工。 生化研究。广泛应用于细菌培养基的制备，一种供给细菌氮源的营养剂。配制吲哚试验培养基和营养要求较高的培养基。有关胰蛋白胨的概述、用途是由Chemicalbook的侍艳编辑整理。（2015-10-23）