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血液总RNA大量提取试剂盒的特性
与DNA提取相似,RNA的分离是去除像蛋白质或者脂类一样的其他分子。使用有机溶剂将RNA与这些污染物分开。然而,在处理RNA时有几个方面与DNA不同。多数细胞类型在它们的细胞质中与mRNA并存含有大量的RNA酶,它通常是分析提取的关键。为了阻止无处不在的RNA酶对mRNA的降解,分离必须即刻进行并且细胞裂解物必须尽快置于RNA酶变性的环境中。强变性的异硫氰胍(GTC)可以被使用。新鲜的样品或收集的组织可以被均浆并且大量地溶解在4mol/L的GTC溶液中。随后RNA经CsCl密度梯度离心沉淀并且和不能沉淀的DNA分离。接下来可用不同的方法来进一步纯化RNA。另一种方法,RNA也可以在变性盐溶液(例如4mol/L的氯化锂)中从均浆的组织中抽提。随后,进行酚抽提去除均浆物中的蛋白质,然后用醇沉淀RNA。
2020-04-01
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