熊去氧胆酸

利胆药物一般可分为利胆剂和增液利胆剂两种。前者指可以促进胆汁分泌的药物，后者指仅增加胆汁容量但并不增加胆汁成分的药物。目前常用的利胆药物以胆酸类为主。有胆酸钠、去氢胆酸、鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸等。
熊去氧胆酸从熊胆汁中分离出来天然胆汁酸的一种化学制剂，是鹅去氧胆酸的差向立体异构体，其溶石作用、疗效与鹅去氧胆酸相似，但疗程短、剂量小。在体内与牛磺酸结合存在于胆汁中，是一种亲水性胆酸，为一种胆固醇结石溶解剂。能减少肝脏对胆固醇的分泌，降低胆汁中胆固醇的饱和度，促进胆汁酸的分泌，增加胆固醇在胆汁中的溶解度，使胆固醇结石溶解或防止结石的形成。可增加胆汁分泌量，松弛胆管口括约肌产生利胆作用，有利于结石的排出。本品不能溶解其他类型的胆结石。熊去氧胆酸适用于治疗胆固醇性结石、高脂血症、胆汁分泌障碍性疾病、原发性胆汁性肝硬化、慢性肝炎、胆汁反流性胃炎和预防肝移植急性排斥及反应。本品的溶石作用略弱于鹅去氧胆酸。
以上信息由Chemicalbook彤彤编辑整理。 熊去氧胆酸即3α，7β-二羟基胆烷酸，是鹅去氧胆酸的7β-羟基差向异构体，正是结构上的这一微小差异，使本品具亲水性。本品可降低肝内的胆固醇合成限速酶——β-羟-β-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶的活性，使胆固醇合成受抑；并与胆固醇形成稳定的液态结晶悬浮物，使胆汁中的胆固醇不饱和，进而促使结石中的胆固醇析出而溶解。本品还可抑制肠道吸收胆固醇。熊去氧胆酸还能拮抗内源性疏水性胆汁酸的细胞毒性作用，保护肝细胞膜。本品通过降低肝细胞膜的主要组织相容性抗原MHC-1的过度表达；抑制白细胞介素-2、4，肿瘤坏死因子及干扰素α的产生；提高体内白细胞介素-10、12的水平；以及直接与糖皮质激素受体结合，发挥免疫调节作用。此外，熊去氧胆酸还有抑制细胞凋亡、抑制炎症、清除自由基和抗氧化等作用。口服后主要在空肠上段以非离子被动扩散方式、在回肠以主动转运方式吸收，首过效应大，口服剂量的50%～75%被肝脏摄取；主要分布于肝、肠和血浆中，血浆蛋白结合率为96%～99%。熊去氧胆酸在胆汁中的浓度呈现剂量依赖性增加；当剂量为20～30mg/(kg·d)时，胆汁中的浓度逾60%，可达最佳治疗效果。在肝内与甘氨酸、牛黄酸等结合，在结肠被肠菌代谢，小部分代谢产物由尿中排出，大部分经粪便排泄。口服时的生物半衰期为3.5～5.8天。 鹅去氧胆酸为白色针状结晶，熔点119℃，几不溶于水，可溶于甲醇和乙醇。本品是一种胆结石溶解剂，在有功能的胆囊中对放射透明的胆固醇结石有溶解作用。它通过抑制肝脏β-羟基β-甲基戊二酰辅酶A还原酶，阻止胆固醇生物合成，减少胆汁中胆固醇与胆酸的比率，降低胆固醇的饱和度，使结石溶解，防止新结石的形成。在胆固醇结石患者的胆汁中，鹅去氧胆酸与其他胆酸的比率显著下降。鹅去氧胆酸的主要代谢产物为石胆酸，它生成的3-硫酸醋结合物从胆汁分泌到肠内不再重吸收，而排出体外。也可通过脱氢经7-酮石胆酸部分转化为熊去氧胆酸。
临床上鹅去氧胆酸用于治疗胆石症。每天15mg/kg，长期持续口服有溶解或减小胆石体积的作用。特别适用于胆囊结石中胆固醇含量高，直径1～2cm，表面光滑，X线照射透明的胆石症。停药后部分病人复发重新形成胆结石。此外，有报告本品尚有降低高血脂病人血清甘油三酯和胆固醇的作用。不良反应有腹泻和血清转氨酶升高。

图1为鹅去氧胆酸的化学结构式 （1）与鹅去氧胆酸合用，促进胆汁中胆固醇含量及饱和度降低的作用均大于单独用药，也大于两药的相加作用。
（2）本品不宜与消胆胺或含氢氧化铝的制酸剂合用，以免影响吸收。
（3）口服避孕药可影响本品疗效。 比鹅去氧胆酸小，一般不引起腹泻。偶见便秘、过敏、头痛、头晕、胰腺炎和心动过速等。 (1)老年患者慎用。
(2)长期使用可增加外周血小板的数量。
(3)如治疗胆固醇结石中出现胆绞痛反复发作，症状无改善甚至加重，或出现明显结石钙化时，则应中止治疗，并进行外科手术。
(4)本品不能溶解胆色素结石、混合结石及不透X线的结石。
(5)服用期间应定期检查肝功能。 (1)供试品：熊科动物棕熊Ursus arctos Linnaeus或黑熊Selenarctos thibetanus G.Cuvier的干燥胆。
(2)色谱条件：高效硅胶薄层板(烟台)；异辛烷-异丙醚-冰醋酸-正丁醇-水(6：3：3：1.8：0.6)为展开剂；饱和硫酸氢铵的5%硫酸乙醇溶液为显色剂，喷雾显色，于110℃加热10min，在自然光下和365nm紫外光灯下检视斑点的位置。
(3)对照品溶液的配制：精密称取熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、胆酸对照品，用甲醇溶解并制成每毫升各含1mg的溶液作为对照品溶液。
(4)样品溶液的制备：精密称取熊胆8mg，加30%氢氧化钠溶液1.5ml，于沸水浴中水解10h。用浓盐酸调pH1～2，乙酸乙酯提取(10ml×2次，5ml×2次)，合并提取液，浓缩，定容于2ml量瓶中，作为样品溶液。
(5)测定：吸取样品溶液1μl与对照品溶液1μl和2μl，分别交叉点于同一薄层板上，按上述薄层色谱条件，展开，取出，晾干，显色。照薄层扫描法进行反射锯齿法扫描；熊去氧胆酸的激发波长λex＝380nm，发射波长λem＝450nm；鹅去氧胆酸和胆酸的λem＝470nm，λex＝550nm。测量样品与对照品吸收度积分值，计算，即得。
(6)色谱图

图2为TLCS法熊胆的薄层色谱图 备注：1.天然熊胆；2.熊胆粉；3.熊胆结石；4.对照品 a.熊去氧胆酸；b.鹅去氧胆酸；
(7)测定结果

图3为熊胆中熊去氧胆酸及鹅去氧胆酸含量表 本品为白色粉末；无臭，味苦。Mp 200-204℃。在乙醇和冰醋酸中易溶，在氢氧化钠试液中溶解，在氯仿中不溶。UDCA为CDCA的同分异构体，其溶石作用强于CDCA，无腹泻及肝脏毒性。UDCA能降低胆固醇的吸收，并能降低胆固醇的合成及胆汁中的胆固醇含量。另外，UDCA亦能降低伴刀豆蛋白A结合片段，该物质能促进胆汁结晶的形成，从而抑制结石的形成。UDCA和CDCA联合使用，可增强各自单独使用的溶石作用，同时减轻副作用。两者联用主要用于治疗胆囊胆固醇结石，患者胆石与胆汁等密度或者胆石CT值低于75单位时， UDCA的溶石速度最快。胆石症病人使用本品后，可增加外周血小板数量。 胆石溶解药。主要用于不宜手术治疗的胆固醇型胆结石，尤其是胆囊功能基本正常、结石直径在15mm以下、透X线、非钙化型的浮动胆固醇结石的治愈率高。对中毒性肝炎、胆囊炎、原发性硬化性胆管炎、原发性胆汁淤积性肝硬化也有一定的治疗效果。提高α-干扰素治疗慢性丙型肝炎的疗效。有腹泻，罕见便秘、过敏反应、瘙痒、头痛、头晕、胃痛、胰腺炎及心动过缓等。胆道完全阻塞和严重肝功能减退者及孕妇忌用。 适用于预防及治疗胆固醇性胆结石，阴离子去垢剂 阴离子去垢剂，用于生化研究。 方法一、以鹅去氧胆酸为原料
3α, 7α-二乙酰胆酸甲酯的制备 取无水甲醇36ml，通入1g干燥氯化氢气体，加胆酸12g，搅拌，加热回流20-30min，室温放置数小时后析出晶体，冷冻，过滤，用乙醚洗涤，干燥，得胆酸甲酯。取胆酸甲酯2g，加苯9.6ml，加吡啶2.4ml，加乙酐2.4ml，振摇10-15min，室温放置20h，将反应液倒入100ml水中，除去苯层，反复用蒸馏水洗涤，回收溶剂，固体残渣用石油醚洗涤1次，用甲醇-水溶液重结晶，得3α，7α-二乙酰胆酸甲酯。
胆酸→胆酸甲酯→3α，7α-二乙酰胆酸甲酯
鹅去氧胆酸的制备 取二乙酰胆酸甲酯1.5g，加乙酸24 ml，加铬酸钾溶液(取铬酸钾0.76g溶于1.8ml水中)，加热至40℃，反应8h，加水120ml，振摇片刻，放置12h，过滤，用蒸馏水洗至中性，干燥，得3α，7α-二乙酰氧基- 12-酮基胆烷酸甲酯，简称12-酮。取12-酮15g，加二乙二醇醚150ml，加80%水合肼溶液15ml，加氢氧化钾15g，加热至30℃回流15h，升温至195-200℃，回流2.5h，升温至217℃反应片刻，冷却至190℃，加水合肼溶液0.7ml，在3h内由215℃升温至220℃，冷却，加蒸馏水600ml，加10%硫酸调pH 3，析出结晶，过滤，水洗至中性，加乙酸乙酯，弃去水层，有机层用水洗1-2次，减压蒸馏，得白色3α，7α-二羟基胆烷酸，即鹅去氧胆酸。
3α，7α-二乙酰胆酸甲酯→3α，7α-二乙酰氧基-12-酮基胆烷酸甲酯→3α，7α-二羟基胆烷酸（鹅去氧胆酸）
熊去氧胆酸精品的制备 取鹅去氧胆酸2g，加100ml乙酸，加乙酸钾20g，振摇溶解，加铬酸钾1.5g(溶于10ml水中)，室温放置过夜，加水200ml，析出结晶，过滤，水洗，干燥，得3α-羟基-7-酮基胆烷酸。取3α-羟基-7-酮基胆烷酸4g，加正丁醇100ml，加热至约115℃，分次加入金属钠8g，逐渐有白色浆状物析出，继续反应30min，加水120ml，搅拌升温溶解透明，减压蒸去有机层，残渣加水500ml，溶解，过滤，滤液加10%硫酸调pH3，有白色絮状物沉淀，过滤，水洗至中性，干燥，加乙酸乙酯洗涤，稀乙醇结晶，得3α，7β-二羟基胆烷酸，即熊去氧胆酸精品。
鹅去氧胆酸[铬酸钾]→3α-羟基-7-酮基胆酸[金属钠，115℃]→3α, 7β-二羟基胆烷酸（熊去氧胆酸）
方法二、以猪胆盐或猪胆汁为原料 利用薄层层析法从猪胆盐或猪胆汁中，分离出熊去氧胆酸。猪胆盐中含有游离型和结合型的UDCA，其含量约30%；猪胆汁中含有结合型UDCA，含量约0.6%。