百合提取物

百合提取物为百合科植物卷丹Lilium lancifolium Thunb.、百合Lilium brownii F. E. Brown var. viridulum Baker或细叶百合Lilium pumilum DC. 的干燥肉质鳞叶为原料提取的活性物质，主要含有甾体皂苷类、百合多糖等成分，具有降血糖、抗氧化、抗肿瘤、抗疲劳、增强机体免疫力、提高淋巴细胞转化率的特性；不仅临床上有着广泛的应用, 而且作为加工保健产品的原料也极具有开发前景。本信息是由Chemicalbook的侍艳编辑整理。 全世界百合有100多个品种, 我国产百合共有39种及26个变种, 有药百合、川百合、龙牙百合、毛百合和细叶百合等。临床上药用的多为药典收载的3个品种, 即卷丹、百合、细叶百合；作为鳞茎栽培食用的主要有宜兴百合、兰州百合和龙牙百合, 其中龙牙百合的食用价值最高。中国百合的主要产区在江苏宜兴、江西万载、山东莱阳、甘肃兰州、浙江湖州、湖南邵阳和隆回。
【基源】 为百合科植物卷丹Lilium lancifolium Thunb.、百合Lilium brownii F. E. Brown var. viridulum Baker或细叶百合Lilium pumilum DC. 的干燥肉质鳞叶。
【别名】 白百合、百合蒜、白花白合、蒜脑薯。
【植物形态】百合，多年生草本，高60～100厘米。鳞茎球状，白色，肉质，先端常开放如荷花状，长3.5～5厘米，直径3～4厘米，下面着生多数须根。茎直立，圆柱形，常有褐紫色斑点。叶4～5列互生；无柄；叶片线状披针形至长椭圆状披针形，长4.5～10厘米，宽8～20毫米，先端渐尖，基部渐狭，全缘或微波状，叶脉5条，平行。花大，单生于茎顶，少有1朵以上者;花梗长达3～10厘米；花被6片，乳白色或带淡棕色，倒卵形；雄蕊6，花药线形，丁字着生；雌蕊1，子房圆柱形，3室，每室有多数胚珠，柱头膨大，盾状。蒴果长卵圆形，室间开裂，绿色;种子多数。花期6～8月。果期9月。

图1为百合 目前百合中已提取分离出磷脂类、酚酸甘油酯、甾体糖苷、甾体生物碱、蛋白质、氨基酸等多种成分。湖北百合 (Lilium henryi) 鳞茎的热甲醇提取物经色谱分离出12种化合物，如1，2-O-二阿魏酰丙三醇、1-O-阿魏酰-2-O-P香豆醇丙三醇与1-O-P-香豆醇-2-O-阿魏酰的混合物、1、3-O-二阿魏酰丙三醇、1-O-阿魏酰-3-O-P-阿魏酰丙三醇、3，6’-O-二阿魏酰蔗糖、4-O-乙酰-3，6’-二阿魏酰蔗搪、4’-O-2-酰-3，6’-O-二阿魏酰蔗糖、3-O-阿魏酰-6’-O (4-O-β-D-葡萄吡喃酰阿魏酰) 蔗糖、(2s) -l-O-P-甲氧基桂反醇-3-O-β-D-葡萄吡喃丙三醇、(2s) -l-O-咖啡酰- 3-O-β-D-葡萄吡喃酰丙三醇和 (25R) -3β，26-二羟基-5α-胆烷-6，22-二酮3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
1.
26-O-β-D-吡喃葡萄糖3β，26-二羟基胆甾烷-16，22-二氧-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D- 吡喃葡萄糖苷：分子式C45H74O18，分子量902。白色粉末(MeOH)，mp.225℃～226℃。
Lieberman-Burchard和Molisch反应均呈阳性，10%硫酸显紫色，酸水解检出葡萄糖和鼠李糖。
2.
26-O-β-D-吡喃葡萄糖3β，26-二羟基-5-胆甾烯-16，22-二氧-3-O-α-L吡喃鼠李糖-(1→2)-β- D-吡喃葡萄糖苷：白色粉末(MeOH)，mp.208℃～209℃。
3.
正丁基-β-D吡喃果糖：白色针晶(MeOH)，mp.154℃～156℃。Molisch反应为阳性。
4.
大黄素(Emodin)：异名朱砂莲甲素，Frangula emodin，Rheum emodin等：分子式C15H10O5，分子量270.23。橙色针状结晶(乙醇或12毫米下减压升华)，mp.256℃～257℃。几乎不溶于水，溶于乙醇及碱溶液。
5.
胡萝卜苷(Daucoterol)：异名胡萝卜甾醇、β-谷甾醇苷。分子式C35H60O6，分子量576.83。 mp.305℃(分解)，[α]D20-40.1°至-49.6°(吡啶)。
6.
β-谷甾醇(β-Sitosterol)：分子式C29H50O，分子量414.69。片状结晶(乙醇)，mp.140℃。 [α]D25-37°(c=2，氯仿)。难溶于水，甲醇和乙醚，易溶于苯和氯仿。
7.
豆甾醇(Stigmasterol)：分子式C29H48O，分子量412.67。单水合物结晶(乙醇)，干燥后，无水物mp.170℃，[α]D22-51°(c=2，氯仿)。不溶于水，溶于有机溶剂。

图2为结构式 1.抑菌作用
百合的不同溶剂提取物对细菌和真菌(金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、藤黄微球菌、绿脓杆菌、黄霉菌以及粪肠球菌)均有一定程度的抑制效果。
2.增强免疫功能
给小鼠灌胃百合水提液10g/kg，每日2次连续10d，均显著抑制 2，4-二硝基氯苯 (DNCB)所致迟发型过敏反应。百合多糖250μg/mL与小鼠淋巴细胞共同培养，可显著促进DNA和RNA的合成，同时淋巴细胞存活率也增多。小鼠腹腔注射环磷酰胺100mg/kg，造成实验性白细胞减少症，然后灌胃百合0.4mL(相当于80g/kg) 连续4d。结果发现，外周血液白细胞数比对照组高625个/ mm3，表明可能有防止环磷酰胺所致白细胞减少症的作用。
3.镇静催眠
分别给小鼠灌胃1g/mL的卷丹、百合与川百合水提液20g/kg，30min后腹腔注射戊巴比妥钠40mg/kg，以翻正反射消失到恢复的时间作为睡眠时间指标。结果表明，3 种百合均可使戊巴比妥钠睡眠时间延长12.8～35.9min，与对照组相比均有显著差异。给小鼠分别灌胃1g/mL的卷丹、百合、川百合水提液20g/kg，30min后腹腔注射戊巴比妥钠25mg/kg，观察注射后15min内小鼠的睡眠率，并与生理盐水及酸枣仁组 (20g/kg)进行比较。结果表明，生理盐水组睡眠率为40%，酸枣仁组80%，百合组 90%，卷丹组100%，川百合80%。
4.抗疲劳、抗应激
给小鼠分别灌服百合、卷丹、川百合水提液10g/kg，并和生理盐水组作对照，给黄芪10g/kg作阳性对照，每日摄取2次连续5d。从第3d起每组均用锯末烟熏20min 以建立“肺气虚”模型，第6d将所有小白鼠放入20℃冷水中，观察从放入至溺死为止的整个游泳耗竭时间。结果表明，生理盐水组游泳时间7.90±1.33min，黄芪组23.00 ±4.03min，3种百合分别为13.15±3.22min，16.85±2.87min及11.75±2.11min，可见3种百合均显著延长“肺气虚” 型小鼠的游泳时间，具有抗疲劳效能。此外，上述 3种百合尚能使肾上腺皮质所致“阴虚”模型小鼠的负荷游泳时间显著延长，卷丹及川百合使小白鼠负荷游泳时间显著延长。给小鼠分别灌胃百合水提液10g/kg，30min后进行常压缺氧，只有卷丹能显著地延长小白鼠耐常压缺氧时间，达20.15±2.67min。卷丹在小鼠缺氧试验中剂量为30～35g/kg，食用45min后效果最好。百合还可对抗异丙肾上腺素所致缺氧作用。小鼠分别灌胃给予百合、川百合及卷丹水提液10g/kg，第2d再次灌胃， 15min后分别腹腔注射异丙肾上腺素15mg/kg，25min后进行常压耐缺氧试验。结果表明，只有川百合在异丙肾上腺素所致心肌耗氧增加状态下，能显著延长缺氧时间，达18.30±2.04min与黄芪 (10g/kg) 组 (18.65±2.73min) 相似。
5.止咳、祛痰与平喘
将小鼠分为3组，试验组分别摄取口服1g/mL的卷丹、百合及川百合水提液20g/ kg，对照组给生理盐水，阳性对照组灌服10g/kg桔梗，各组在摄人受试物后30min用 SO2引咳，观察小鼠咳嗽的潜伏期和咳嗽开始2min内的咳嗽次数。结果表明，3种百合均可使咳嗽的潜伏期延长，延长率达57.69%～115.33%，咳嗽次数减少，镇咳率18.75%～57.10%。百合水抽提液对氨水所致小鼠咳嗽也有止咳作用，并能对抗组氨所致蟾蜍哮喘。用酚红比色法比较卷丹、百合和川百合的祛痰作用，分别给小白鼠灌胃3种百合水提液，30min后腹腔注射0.5%酚红溶液0.1mL/10g，30min后处死小鼠，测定其呼吸冲洗液于546nm波长处的吸收度，并从酚红标准曲线中求出酚红排出量。结果表明，3 种百合均使酚红排出量显著增加，卷丹止咳祛痰强于百合或相等，川百合稍差些。
6.其他作用
百合提取物所含的秋水仙碱有抗癌作用。
图3为甾类有效部位及成分提取分离
A：26-O-β-D-吡喃葡萄糖3β，26-二羟基-5-胆甾烯-16，22-二氧-3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷
B：26-O-β-D-吡喃葡萄糖3β，26-二羟胆甾烷-16，22-二氧-3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→ 2)-β-D-吡喃葡萄糖苷 HPLC/ESI MS筛选百合中的甾体皂苷
色谱条件
色谱柱：Waters C18柱(150mm×3.9mm，5μm);流动相：A (CH3CN)-B (H2O)，B相浓度梯度：开始，85%;40min，15%;stop。流速：0.5ml/min。高效液相色谱的柱后流出物以5μl/min的速率经一个不锈钢的分流头导入电喷雾离子源，质谱仪以正离子状态采样，质谱条件依据采集的[M+H]+信号强度的稳定性来进行优化。
供试品的制备
(1)利用半制备型HPLC制备少许甾体皂苷 色谱柱：Waters C18半制备柱(150mm×3.9mm，5μm);流动相：甲醇-水-甲酸(55：45：0.15);流速：1.5ml/min。真空浓缩HPLC柱后的流出物至其原体积的1/5时，用1.0mol/L的甲酸调pH至2.5，回流12h。用0.5mol/L氢氧化钠调pH至中性，用等体积的乙醚萃取3次，合并乙醚。经氮气吹干即得甾体皂苷元。水相用于糖链组成的测定。
(2)用乙醇抽提，石油醚、三氯甲烷和正丁醇等液 液萃取和柱色谱分离等一系列过程。正丁醇萃取液经真空浓缩至无醇味后，加适量的水并以0.5mol/L氢氧化钠调pH至8，经AB-8大孔吸附树脂，先用水洗去糖分与部分色素，然后用乙醇解吸甾体皂苷。柱后皂苷流出物经减压浓缩后，用乙醚-丙酮(1：1)作沉淀剂，采用分步沉淀法获得皂苷提取物。

图4为百合中皂苷提取物的HPLC/ESI MS分析总离子流图
1化合物（1）；2化合物（2） 性状鉴别
鳞叶长椭圆形，顶端尖，基部较宽，长1.5～5cm，宽1～2cm，中部厚0.1～0.4cm，边缘薄，常向内卷曲。表面乳白色或淡棕黄色，光滑，半透明，有数条纵直平行的白色脉纹，有的不明显。质硬脆，断面较平坦，角质样。气无，味微苦。
紫外光谱鉴别
取样品粗粉0.2g，2份，分别置于50ml 碘量瓶中，各加石油醚(60～90℃)、乙醇 20ml，室温浸泡2h，振摇，滤过，石油醚滤液与稀释5倍后的乙醇溶液，于岛津UV- 265FW型紫外分光光度计上测定其紫外光谱。测试条件：波长范围200～400nm，吸收度量程0～3A，狭缝1nm，扫描速度 200nm/min，尺度扩张40nm/cm。结果百合 λmaxPet为269.2、205.4nm，λminPet为260.6nm; λmaxEtOH为309.6、285.0、205.4nm，λminEtOH为 305.8、259.0nm。

图5为百合的紫外光谱图
1.石油醚提取液 2.乙醇提取液 甘、苦，寒。归心、肺经。 润肺止咳，清心安神。主治肺痨咳嗽，咳痰，热病后余热未清，虚烦惊悸，神志恍惚等。