脆弱拟杆菌的应用、其益生特性及安全性评价

概述^【1】

脆弱拟杆菌隶属于拟杆菌门，拟杆菌科，拟杆菌属。它的最初描述是从腹部溃疡导致阑尾炎的病灶部位所分离到的菌株，是革兰氏阴性非生孢的杆菌，不运动或以周生鞭毛运动，代谢类型为化能异养菌，能利用糖或蛋白胨，DNA 的G+C 摩尔含量为40%−55%。在长期的进化过程中，定殖在肠道的脆弱拟杆菌与宿主建立了互利共生的友好关系，是维持宿主健康必不可少的组分，尤其对于肥胖、糖尿病以及免疫性缺陷疾病有着良好的治疗前景。

生化反应^【2】

脆弱拟杆菌发酵葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，不发酵阿拉伯糖、鼠李糖、山梨醇和海藻糖；水解七叶苷，耐20％胆汁并生长旺盛；不液化明胶，不产H2S，不还原硝酸盐，不产吲哚，脂酶试验阴性，触酶试验阳性。

应用^【3】

对幼儿发育的影响：

服用脆弱拟杆菌菌液5 个月后, 两组儿童的体重有非常明显的差异; 11.5 个月后两组儿童的身长也有非常显著的差异, 说明BF8 39菌液对儿童的生长发育有明显的促进作用。

对肠道疾病的疗效：

脆弱拟杆菌菌液对急、慢性肠炎、细菌性痢对肠道疾病的疗效疾、肠功能紊乱、消化不良、婴儿腹泻和长期便秘等疾病, 除个别病例外, 均收到明显效疗, 所有患者无一例出现副作用, 共同反映食欲增加, 排便量少, 精神好转, 个别白发变黑, 睡眠好, 有的并发性鼻炎也被治愈,月经恢复正常。

耐药性^【4】

脆弱拟杆菌引起的临床感染可采用高敏感的抗生素进行治疗。然而随着耐药菌株的出现，且耐药情况复杂多变，从而给治疗带来了挑战。目前抗生素治疗常建立在已有的经验上，研究者们也一直致力于更新脆弱拟杆菌的耐药现状。研究了美国10 所医院1997−2004 年脆弱拟杆菌的耐药性情况，结果表明脆弱拟杆菌对克林霉素、莫西沙星的抑制作用显著增强，对碳青霉烯类抗生素敏感。值得注意的是，已有的脆弱拟杆菌耐药资料只是一个相对参考值，关键是要对临床常见感染菌株的药敏模式定期检测并制定一个公认的药敏试验标准。

而随着微生物研究方法的日益深入，不基于传统培养的新型分子生物学方法正在为临床上脆弱拟杆菌的检测提供更为快速准确的信息。采用传统培养方法以及Quantitativereal-time polymerase chain reaction (QRT-PCR)技术对临床感染样本中的拟杆菌进行分析鉴定，结果表明通过传统培养方法在8%的样本中发现了目标微生物，而通过QRT-PCR 方法在33%的样本中发现了目标微生物，这表明新型分子生物学方法检测临床感染标本不仅节省时间，同时可获得准确的临床资料。

益生特性^【4】

联合国粮食与农业组织和世界卫生组织(FAO/WHO)共同定义益生菌是通过摄入一定的量，对食用者的健康发挥有效作用的活性微生物。益生菌对宿主的积极作用已十分明确，如改善肠道菌群结构、抑制病原菌的定殖、提高机体免疫力。然而目前国内益生菌种类较少，最常见的益生菌是乳杆菌和双歧杆菌，因此筛选潜在益生菌具有重要意义。

益生作用：

脆弱拟杆菌是宿主体内正常定殖的共生菌，当脆弱拟杆菌数量下降时，机体表现异常。炎症性肠炎主要包括溃疡性结肠炎(Ulceraive colitis，UC)和克罗恩病(Crohn’s disease，CD)两种类型，它们的发生与肠道菌群失衡有关。沙素梅对确诊的炎症性肠炎患者肠道优势菌群定量检测发现：与健康对照者相比，脆弱拟杆菌在活动期UC 和CD 患者中均偏低。由此可见，脆弱拟杆菌在维持人体健康状况方面至关重要。

安全性评价现状^【4】

脆弱拟杆菌在糖代谢及免疫调节方面起着重要的作用，但同时不可忽视的是脆弱拟杆菌是条件致病菌，最常见的毒力因子是脆弱拟杆菌肠毒素(BFT)，共有bft-1、bft-2 和bft-3 三种基因型，鉴于此我们在筛选益生脆弱拟杆菌时，必须对其进行安全性评价。益生菌安全性评价试验包括与毒力相关的表型以及毒力因子的检测、是否携带抗生素抗性基因以及抗生素敏感性检测等体外试验、动物试验以及人体试验。到目前为止，关于益生脆弱拟杆菌株安全性评价的试验鲜有报道，已有的2 篇报道是关于分离自人体肠道中隶属于拟杆菌属的Bacteroides xylanisolvens 初步安全性评价以及人体试验的研究结果。

参考文献

[1]布坎南 RE, 吉本斯 NE. 伯杰氏细菌鉴定手册[M]. 第8版.北京: 科学出版社, 1984

[2] 赵虎编著,厌氧菌和微需氧菌感染与实验诊断,上海科学技术出版社,2005年01月第1版,第92页

[3] 张季阶，张洪梅，张奚，张洪桂，毕邻，张秀晨，张洪正，脆弱拟杆菌(B F 8 3 9) 菌液的临床应用研究，中国生物制品学杂志，1995.08，第64页

[4] 冯淑贞，张和平，脆弱拟杆菌的研究进展，微生物学通报，2015.07，第1368页