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弗氏柠檬酸杆菌的致病性

发布日期:2020/10/24 7:56:57

背景[1][2]

柠檬酸杆菌属属于肠杆科菌,是动物和人肠道内的正常菌群,普遍分布在自然环境中,如土壤、水、污水及食物等,也是水体污染的重要细菌学指标之一。根据DNA 杂交试验,柠檬酸杆菌属可被分为11个基因种。其中,弗氏柠檬酸杆菌(Citrobact—er freundii)和科氏柠檬酸杆菌(C.koseri)常与动物和人的感染有关。

弗氏柠檬酸杆菌为该属中的代表种,一般认为是一种条件性致病菌。弗氏柠檬酸杆菌周身鞭毛和菌毛,无荚膜,能在普通培养基上生长,生长能力强,是一种典型的人一畜一鱼共患病条件性致病菌,动物和人均可感染致病性弗氏柠檬酸杆菌而发生腹泻、食物中毒和继发感染。近年来,弗氏柠檬酸杆菌引起动物致病的报道较多且常引起动物败血症甚至急性死亡。

产头孢菌素酶(AmpC)、超广谱内酰胺酶(ESBLs)、金属一内酰胺酶(MBLs)耐药基因的弗氏柠檬酸杆菌分离株对人致病性的报道较多,而且出现复合产酶的泛耐药菌株,其耐药性日益严重。研究提示弗氏柠檬酸杆菌可能是一种尚未被人们充分认识的病原菌,且有危害加重的趋势。

致病性[2]

1. 弗氏柠檬酸杆菌对水产动物的致病性

Sato等首次从水族箱养殖发病的翻车纯分离到弗氏柠檬酸杆菌,发病鱼主要表现皮肤腐烂、出血、肠炎等症状。随后的多个研究均证实了弗氏柠檬酸杆菌能引起鱼发病,先后有弗氏柠檬酸杆菌导致大西洋鲑鱼、虹鳟、鲑鱼、乌鳢、锦鲤、斑马鱼、鲟鱼发病的报道。病鱼主要表现竖鳞、皮肤腐烂、腹腔积液和肛门红肿等症状。

2001年首次报道了弗氏柠檬酸杆菌对河蟹具有致病性,部分病蟹肝胰腺、鳃严重腐烂,河蟹的开放式循环系统为弗氏柠檬酸杆菌在体内扩散提供了条件,进而引起河蟹败血症甚至死亡。随后,分别有弗氏柠檬酸杆菌导致红螯螯虾、中华绒蟹、中华鳖、三疣梭子蟹、中华鳖和克氏原螯虾发病病例的报道。

其中,部分分离的弗氏柠檬酸杆菌携带定居因子抗原cfa基因。2011年报道了弗氏柠檬酸杆菌导致新生剑吻鲸死亡的病例,主要表现为败血症病理变化。2013年首次报道了弗氏柠檬酸杆菌导致花鳗鲡大量死亡,弗氏柠檬酸杆菌主要引起花鳗鲡鳃部化脓性炎症,肝脏出血,胆囊肿大等病理性变化。

2. 弗氏柠檬酸杆菌对两栖动物的致病性

2012年报道了弗氏柠檬酸杆菌对大鲵存在致病性,其主要眼观病理变化为腹水和皮下出血。其他器官没有明显病变。

3. 弗氏柠檬酸杆菌对哺乳动物的致病性

2004年,有弗氏柠檬酸杆菌引起猕猴腹泻的报道。弗氏柠檬酸杆菌还可引起仔猪和东北虎的腹泻,仔猪腹泻是因食用弗氏柠檬酸杆菌污染的低价奶粉所致。弗氏柠檬酸杆菌为肠道正常菌群,在一定条件下会成为条件性致病菌,引起动物腹泻。然而弗氏柠檬酸杆菌在肠道致病菌的培养中一般不被重视,常导致误诊。因此,在腹泻动物粪便细菌分离培养时,不可忽视弗氏柠檬酸杆菌。

2011年,报道了弗氏柠檬酸杆菌对犬、猫和马存在致病性,犬临床症状为呼吸道感染、猫I临床症状为尿道炎,胸膜炎、马临床症状为创伤感染、呼吸道感染。其分离的弗氏柠檬酸杆菌携带超广谱B一内酰胺酶(ESBLs)中blaCTX-M_ 和blasH v_l2类型。

弗氏柠檬酸杆菌对动物的致病报道起源于鱼类,全球均有弗氏柠檬酸杆菌对动物致病的报道,过去弗氏柠檬酸杆菌常常被认为肠道致病菌。近年来发现,临床上毒力较强的菌株可能穿过肠道黏膜,进而在全身扩散传播,引起机体系统感染,而不仅仅局限于肠道感染。由强毒株引起动物的感染常常较为严重,常引起动物败血症或者急性死亡。

花鳗鲡、大鲵和剑吻鲸均为国家二级保护动物,然而其病害研究起步相对较晚,采用先进的仪器设备及分子鉴定的方法对病原进行系统研究比较缺乏。因此,在国家野生保护动物疾病防治中不能忽视弗氏柠檬酸杆菌的感染。弗氏柠檬酸杆菌对水生动物的致病报道较多,这可能与环境条件突变有关。

尤其在大雨过后,地面上的弗氏柠檬酸杆菌大量增长并可随水流入水中或者水中的弗氏柠檬酸杆菌大量滋生,水生动物可通过体表伤口或者经口摄人大量病原菌而发病,一旦发病就会引起迅速扩散,引起大量动物死亡,常常引起严重的后果。弗氏柠檬酸杆菌对哺乳动物的致病报道相对较少。哺乳动物可能因为食用大量污染的食物而感染弗氏柠檬酸杆菌,感染后引起腹泻。一般情况下,弗氏柠檬酸杆菌不会导致哺乳动物大量死亡。

4. 弗氏柠檬酸杆菌对人的致病性

目前,对人源弗氏柠檬酸杆菌临床分离株的了解少于动物和环境的分离株。近几年,有弗氏柠檬酸杆菌导致人食物中毒,引起腹泻的报道。腹泻是中毒症状之一,也可引起粪便中红细胞、白细胞的数目增加和脓血便等,与痢疾症状类似,可能导致误诊,引起严重后果,因此医护人员应提高对弗氏柠檬酸杆菌的认识。同时应将其纳入食物中毒诊断标准中。

弗氏柠檬酸杆菌还可引起很多其他的临床症状,如尿道炎、伤口感染、坏死性脓疮、腹膜炎、胰腺炎、坏死性筋膜炎、骨髓炎、肺炎、咽炎、肾炎、菌血症和婴儿脑膜炎、脑脓肿等。人类因致病性弗氏柠檬酸杆菌感染而发生腹泻、食物中毒、继发感染,并且弗氏柠檬酸杆菌可以引起人系统的感染,虽然尿道和肠道是最易感染的部位,但是弗氏柠檬酸杆菌也可感染其他部位,并不局限与尿道和肠道。

因此,在人临床病例中不能忽弗氏柠檬酸杆菌的感染。弗氏柠檬酸杆菌临床感染通常发生在年老病人体中,并伴随患有胆囊炎、糖尿病、高血压、前列腺炎或者脑血管疾病等疾病。

弗氏柠檬酸杆菌感染的预防、诊断和治疗措施[2]

1. 弗氏柠檬酸杆菌感染的预防措施

动物的机体免疫力在抵抗细菌感染中发挥着重要作用。弗氏柠檬酸杆菌为条件性致病菌,因此,在养殖生产中,要及时对养殖场地进行消毒,同时搞好日常管理,保持养殖环境的稳定是预防弗氏柠檬酸杆菌感染动物的关键措施。弗氏柠檬酸杆菌对多种消毒液均敏感,如用生石灰粉洒在养殖区,能很好的预防包括弗氏柠檬酸杆菌在内的多种病原菌的传播,应值得广泛应用。

弗氏柠檬酸杆菌对水产动物致病性报道较多,且常常引起动物严重的大量死亡。水产养殖人员更应做好预防措施,尤其是在大雨过后,地面上的弗氏柠檬酸杆菌可能会大量增殖,随着水流进入养殖池内,可以引起动物感染发病。锻炼身体、增强体质和提高免疫力也可减少弗氏柠檬酸杆菌对人的感染几率。

同时相关部门应加强冷荤食品监管,提高餐饮业环境和工作人员卫生,可减少弗氏柠檬酸杆菌食物中毒的发生。医院内感染弗氏柠檬酸杆菌的报道较多,因此医院要做好医用器械和环境消毒,提高公共卫生。同时病人也要保持个人卫生,提高预防传染病的意识。

2. 弗氏柠檬酸杆菌感染的诊断措施

弗氏柠檬酸杆菌引起动物和人感染时没有特征性的病变,其菌落易与肠杆菌科细菌特别是大肠埃希菌混淆,且不易大肠埃希菌感染区分。因此,仅以临床症状很难确定是否为弗氏柠檬酸杆菌感染。目前对弗氏柠檬酸杆菌感染的诊断主要依靠弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定,其鉴定方法主要有16 S rRNA基因序列的扩增和全自动微生物鉴定仪的鉴定等。

3. 弗氏柠檬酸杆菌感染的治疗措施

药敏试验结果显示,弗氏柠檬酸杆菌对多种药物均高度敏感,如喹诺酮类和氨基糖苷类药物。但是临床上也有不同程度的耐药菌株,不同菌株对药物敏感性的差别可能较大。应根据药敏试验结有针对性的选择药物,才能取得良好的治疗效果。然而对于弗氏柠檬酸杆菌引起的动物疾病,仅仅依靠药物治疗,效果不能达到,应当药物治疗和预防措施相结合。

弗氏柠檬酸杆菌引起人疾病的治疗大多采用抗生素治疗。不携带耐药基因的弗氏柠檬酸杆菌对庆大霉素、环丙沙星、美罗培南和亚胺培南等多种抗生素均敏感。携带头孢菌素酶(AmpC)和超广谱B一内酰胺酶(ESBLs)的人源弗氏柠檬酸杆菌大部分对庆大霉素、环丙沙星、美罗培南和亚胺培南敏感。携带金属G一内酰胺酶(MBLs)的人源弗氏柠檬酸杆菌大部分对亚胺培南西司他丁、替加环素或者黏菌素敏感。

用这些抗生素及时治疗能取得很好的治疗效果 。携带多重耐药基因的菌株治疗较困难,有些菌株仍对替加环素或者黏菌素敏感。不同菌株对药物敏感性的差别可能很大,临床上应根据药敏实验结果合理选用药物治疗。

抗生素敏感性[3]

对庆大霉素、克拉霉素、克林霉素、呋喃妥因、哌拉西林、阿米卡星麦迪霉素等抗生素高度敏感;对大观霉素、青霉素、头孢哌酮、头孢曲松、头孢噻吩等抗生素中度敏感;而对复方新诺明、苯唑西林、头孢他啶、头孢呋辛等抗生素有耐药性。

分离[3]

发病羊急性死亡,死亡后腹胀,解剖观察到心、肺脏、肝脏及脾脏有少量出血点及坏死灶;肝脏脆软似豆腐样;脾脏和肠系膜淋巴结肿大、出血;肠管充气,发生脱肛现象。经实验室微生物学诊断从肝脏、脾脏上分离到一株弗氏柠檬酸杆菌。

主要参考资料

[1] 杨移斌, 夏永涛, 赵蕾, 等. 鲟源弗氏柠檬酸杆菌分离鉴定及药敏特性研究[J]. 水生生物学报, 2013, 37(4): 766-771..

[2] 薛巧, 赵战勤, 刘会胜, 等. 弗氏柠檬酸杆菌对动物和人致病性研究进展[J]. 动物医学进展, 2015, 36(7): 81-85.

[3] 刘梦佳, 任嘉瑞, 张耀相, 等. 弗氏柠檬酸杆菌的分离与鉴定[J]. 畜牧兽医杂志, 2017, 36(4): 3-6.

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