高效氯氟氰菊酯的检测方法及应用

背景及概述^[1][2]

高效氯氟氰菊酯是一种拟除虫菊酯类的广谱高效杀虫剂又称为爱克宁、λ-三氟氯氰菊酯，属拟除虫菊酯类，具有触杀作用的卫生杀虫剂，化学名称：α-氰基-3-苯氧苄基-3-(2-氯-3, 3,3-三氯氟-1-丙烯基)-2,2-二甲基环丙烷羧酸酯(Z)-(1R,3R),S-酯及(Z),(1S,3S),R-酯的1:1混合物，具有触杀作用，是对环境卫生害虫极为有效的一种广效杀虫剂，具有击倒速度快、击倒力强，用药量少等优点。其能消灭传播疾病的媒介害虫和防治各种卫生害虫。拟除虫菊酯类被称为是杀虫剂农药的一个新突破，是杀虫剂历史上的第三个里程碑。在农业生产上，用途广泛。

检测方法^[1]

对高效氯氟氰菊酯残留的检测，国家制定了严格的残留检测标准，如GB/T5009- 2008《植物性食品中有机氯和拟除虫菊酯类农药多种残留的鉴定》、GB/T19649-2006《粮谷中475种农药及相关化学平残留量的测定》、SN/T1117-2008《进出口食品中多种菊酯类 农药残留量测定方法气相色谱法》，现行的残留检测方法是气相色谱法和高效液相色谱法，检测方法依赖于大型仪器和专业技术检测人员，检测时间长，检测过程中需要使用有机溶 剂，会造成环境污染。寻求一种快速、有效、准确的检测方法和手段，势在必行。酶联免疫检测方法具有灵敏度好、精确度高、检测成本低、操作简单、检测时间短、可实现多样本同时检测的特点，在食品安全快速检测中发挥重要的作用。

本发明CN201610159561提供一种专门针对高效氯氟氰菊酯残留检测的试剂盒，采用间接竞争 ELISA方法，并提供一种高效、准确、简便、适于大批量样品筛选的定性、定量检测方法和试 剂盒制备方法，该方法对烟草的检测限为900μg/kg。本发明所述的试剂盒，它包括：高效氯氟氰菊酯偶联抗原的酶标板、高效氯氟氰菊 酯标准品、酶标二抗、特异性抗体、底物液、终止液、浓缩洗涤液和浓缩复溶液组成，所述酶标二抗为酶标记抗抗体。本发明所述的试剂盒，以高效氯氟氰菊酯半抗原制备的技术方法为基础，该方法以高效氯氟氰菊酯为原料，经过一步反应，即可获得半抗原，合成方法具有工艺简单，反应率高的特点，且限度保留了高效氯氟氰菊酯的化学结构。

高效氯氟氰菊酯半抗原化合物的制备方法，包括以下步骤：

1）以高效氯氟氰菊酯为原料，溶解于经干燥后的二氯甲烷中，通入氮气进行保护，得到溶液I；

2）在溶液I中加入琥珀酸酐，常温下搅拌溶解；

3）加入三氯化铝固体进行催化反应；

4）TLC薄层板监测反应进行，直至没有原料或原料点很浅，停止反应；

5）硅胶柱净化，浓缩得到产物，即为半抗原。

本发明的检测原理为：在酶标板上预包被高效氯氟氰菊酯偶联抗原，加入样本溶液或标准品溶液后，再加入高效氯氟氰菊酯特异性抗体溶液，样本中残留的高效氯氟氰菊酯药物与酶标板上包被的高 效氯氟氰菊酯偶联抗原竞争高效氯氟氰菊酯特异性抗体，加入酶标二抗进行放大作用，用显色液显色，样本吸光度值与高效氯氟氰菊酯药物的含量呈负相关，与标准曲线比较即可 得到样本中高效氯氟氰菊酯的残留量；同时根据酶标板上颜色的深浅，与系列浓度的高效氯氟氰菊酯标准品溶液颜色的比较可粗略判断样品中高效氯氟氰菊酯残留量的浓度范围。

本发明检测高效氯氟氰菊酯的酶联免疫试剂盒主要采用竞争ELISA方法定性或定量检测样品中高效氯氟氰菊酯的含量；对样品的前处理要求低，样品前处理过程简单，能同时快速检测大批量样品；主要试剂以工作液的形式提供，检验方法方便易行，具有特异性高、灵敏度高、精确度高、准确度高等特点。本发明的酶联免疫试剂盒，结构简单、使用方便、价格便宜、携带便利、检测方法高效、准确、简便、适于大批量样品筛选的定性、定量。

应用 ^[2]

农药的单一使用会带来抗性风险，农药复配是解决抗性问题的有效途径。开发新品杀菌剂价格昂贵、周期长，而相比之下，开发与研究高效、低毒、低残留的 复配与混配具有投资小、研制周期短而受到国内外的重视，纷纷加大研制力度。CN201711253996.7提供一种含延胡索提取物和高效氯氟氰菊酯的农药组合物，用于防治小麦二叉蚜、小麦长管蚜。技术方案：一种含延胡索提取物和高效氯氟氰菊酯的农药组合物，含有活性成分高效氯氟氰菊酯和延胡索提取物，高效氯氟氰菊酯和延胡索提取物的质量份数比例为20:1 ～1:20。

与现有技术相比，本发明的优点在于：

1、高效氯氟氰菊酯和延胡索提取物在一定比例范围内复配对小麦二叉蚜、小麦长管蚜的室内活性具有协同增效作用。

2、高效氯氟氰菊酯和延胡索提取物两种有效成分复配，减少了农药使用量，降低了使用成本、减轻了对环境的污染、延缓了病虫害抗药性的产生、增加了农药的使用寿命。

主要参考资料

[1] CN201610159561.5 检测高效氯氟氰菊酯残留的试剂盒

[2] CN201711253996.7 一种含延胡索提取物与高效氯氟氰菊酯的农药组合物