末端加A酶新闻专题

高保真PCR酶利用自身的3’→5’外切酶活性（pfu DNA Polymerase，PrimeSTAR HS DNA Polymerase等）能保证PCR产物的保真度，但扩增的PCR产物为不带A尾的平末端DNA片段，不能直接TA克隆。因此，平末端DNA片段需要进行加A后方可TA克隆。平末端DNA加A的步骤一般是先纯化PCR产物，加入dATP Buffer利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能与T载体的T头互补连接TA克隆。步骤较为烦锁，要购买特定的dATP Buffer。经过优化后的A-Tailing Enzyme可以有效地将dAMP掺入平末端DNA片段的3′端。3′-dA DNA产物在随后的连接步骤中可防止相互形成多聚体。

经过优化后的末端加A酶(A-Tailing Enzyme)可以有效地将dAMP掺入平末端DNA片段的3′端。3′-dA DNA产物在随后的连接步骤中可防止相互形成多聚体。用末端加A酶(A-Tailing Enzyme)模块加A尾的DNA可以连接到具有互补dT突出端的连接子或克隆载体上。末端加A酶可以将加A尾的DNA连接到具有互补dT突出端的连接子或克隆载体上。