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新生牛血清

发布日期:2019/4/29 10:05:01

背景[1-7]

新生牛血清是通过对出生12-24小时新生牛进行静脉采血而得到的血清。新生牛血清中营养丰富,蛋白含量和各种生长因子都较高,价格较胎牛血清低得多,是目前动物细胞培养中最常用的血清。

新生牛血清有如下特点:

1.来自通过心脏穿刺新生牛无菌收集的凝结的血液,是高铁和高铁传递蛋白水平的新生牛血清。

2.每个批次都经过严格的控制和测试,新生牛血清批次间的差异小,质量均一。

3.新生牛血清是无菌过滤的,并且pH值是中性的,适合于细胞的生长。

4.厂家对新生牛血清进行内毒素检查,超过细胞培养试验标准。介质不大于0.625欧/毫升,不含病毒制剂。

5.新生牛血清是由各种大小的生物分子和不同激素浓度组成的复杂混合物,营养丰富。

胎牛血清是实验室里细胞培养中用量的天然培养基,因为胎牛从未接触过外界,而使得其血清中所含的抗体和补体几乎没有对细胞有害的成分。并且高质量的胎牛血清含有的丰富营养成分可以满足细胞生长需求,在应用于动物细胞的体外培养中发挥出重要作用。那么为什么人们一定要用胎牛血清而不用新生牛血清呢?想知道两者之间都有哪些区别不妨看看以下小编归纳的几点内容:

胎牛血清与新生牛血清的三大区别

1、来源不同

胎牛顾名思义就是指还在母牛身体里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先从怀孕中的母牛身体里取出胎牛。之后人们在未发育完全的胎牛的心脏进行穿刺取血,完成采血的工作以后便再通过一系列的工艺处理获得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集自已经出生一段时间的小牛,而且它们的发育相对于胎牛而言更加完全。

2、组份与比例不同

虽然胎牛血清与新生牛血清的成分并不存在很大的差别,可是诸如促细胞生长因子和促贴附因子等组份并不相同,而且两者之间的激素还有其他活性物质的比例也不同。另外,胎牛血清的免疫球蛋白含量要远远低于新生牛血清,胎牛的血清相对来说比较纯,所以培养细胞的效果会更佳。

3、用途与用法不同

由于胎牛血清与新生牛血清存在细微差异,因此它们的用途与用法也不尽相同。比如某些细胞只有使用胎牛血清才能顺利生长,但是有一部分的细胞并不是非胎牛的血清不可,新生牛血清可以完全满足这种细胞的生长需求。另外,由于新生牛血清价格更经济实惠,并且细胞培养效果接近胎牛的血清,因此被疫苗生产等大规模的生产型企业大量采购使用,而胎牛血清则更较常应用于对培养条件要求比较高的细胞研究领域中。

综上所述,胎牛血清主要与新生牛血清存在来源、组份与比例、用途与用法三个方面的区别。而且从上文也不难看出胎牛血清和新生牛血清都各有优势,虽然有区别可是在不同的领域里表现都非常亮眼。另外,在培养细胞方面表现突出的胎牛血清的美容作用也不容小觑。

应用[8][9]

新生牛血清可用于细胞培养及细胞生长情况的研究:

新生牛血清质量控制对SPF鸡胚细胞和人二倍体(2BS)细胞生长的影响。方法选择来源可追溯性、工艺质量稳定,且检定合格的新生牛血清样品配制细胞生长液,用于SPF鸡胚细胞和2BS细胞的培养。待细胞生长成致密成纤维单层细胞,记录细胞成单层的时间,用胰酶消化细胞,通过全自动细胞计数仪对细胞悬液进行测定,观察总细胞数、活细胞数,计算细胞存活率。根据活细胞数计算MOI,分别用腮腺炎及风疹病毒接种SPF鸡胚细胞和2BS细胞,检测收获病毒液的滴度。

结果SPF鸡胚细胞总细胞数不低于3.5×106个/mL,活细胞数不低于2.1×106个/mL,细胞存活率不低于60%;2BS细胞总细胞数不低于7.0×105个/mL,活细胞数不低于4.2×105个/mL,细胞存活率不低于60%。腮腺炎病毒原液滴度在6.1~6.6 lgCCID50/mL之间,平均值为6.28 lgCCID50/mL,SD为0.11,生产过程加工能力指数(process capability index,Cpk)为1.51,批间质量趋于一致;风疹病毒原液滴度均在5.5~6.2 lgCCID50/mL之间,平均值为5.8 lgCCID50/mL,SD为0.17,Cpk值为1.40,批间质量趋于一致。结论新生牛血清的质量良好,用其培养SPF鸡胚细胞和2BS细胞的活细胞比率可控,收获的病毒液滴度较均一,差异性较小。

参考文献

[1]Migration of cul-tured vascular smooth muscle cells through a basement membrane barrier requires typeⅣcollagenase activity andis inhibited by cellular differentiation.Pauly RR,Passaniti A.Bilato C,etal.Circulation Research.1994

[2]Nitric oxide reversibly inhibits the migration of cultured vascular smooth muscle cells.Sarkar R,Meinberg EG,Stanley JC,et al.Circulation Research.1996

[3]Calcitonin gene-re-lated peptide receptor in cultured vascular smooth muscle and endothelial cells.Hirata Y,Takagi Y,Takata S,et al.Biochemical and Biophysical Research Communications.1988

[4]Molecular interactions in cell adhesioncomplexes.Yamada K M,Geiger B.Experimental Cell Research.1997

[5]Rapid colorimetric assay for cellular growth and survial:application to proliferation and cytotoxicity assays.Mosmann T.Journal of Immunological Methods.1983

[6]A method for testing the growth-promoting property of tissue culture media using radionuclides.Dvorakova H,Starek M.Journal of Biological Standardization.1980

[7]Nutrient optimization for high density biological production applications[J].David W.Jayme.Cytotechnology.1991(1)

[8]Ferric cacodylate efficiently stimulates growth of rat renal glomerular epithelial cells in vitro[J].Masayasu Yamada,Chiharu Moritoh,Tohru Okigaki.Cytotechnology.1990(3)

[9]付永其,金珏艳,张颖欣,刘辉,陆晨,宋艳梅,杨琦,陆梦溪,王为.新生牛血清的质量控制对SPF鸡胚细胞和人二倍体(2BS)细胞生长的影响[J].中国生物制品学杂志,2018,31(11):1182-1187+1191.

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