去氧穿心莲内酯的作用

背景及概述^[1-2]

穿心莲[Andrographis paniculate(Burm.f.)Nees]为爵床科植物穿心莲的全草或叶。别名春莲秋柳(《岭南采药录》)、一见喜(《泉州本草》)、榄核莲、苦胆草、斩蛇剑、日行千里、印度草(广东)，苦草(福建)等。原产于印度，我国主产于华南、西南等长江以南温暖、湿润地区、其气味苦、性寒、归大肠、心、肺、膀胱经，具有清热解毒、凉血、消肿的功效。用于感冒发热，咽喉肿痛，口舌生疮，顿咳劳嗽，泄泻痢疾，热淋涩痛，痈肿疮疡，毒蛇咬伤。穿心莲内酯类化合物主要活性成分有穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、新穿心莲内酯等。

其中，去氧穿心莲内酯(dexyandrographolide)，别名穿心莲甲素，脱羟基穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯，为萜类化合物；可溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶和氯仿，微溶于苯和乙醚；这无色针状结晶(乙醚-轻石油醚)，无色片状结晶(丙酮、乙醇或氯仿)。鉴于去氧穿心莲内酯有上述专属功效，有必要进行分离纯化。而国内对穿心莲内酯类化合物提取分离研究比较早，也比较多。

早期主要以水浸提、乙醇提取、碱水提取为主，得到的产品为粗提物(穿心莲总内酯含量在30％左右)。目前也有采用新技术提取分离穿心莲内酯，取得了一定的成效，如南开大学采用大孔吸附树脂提取穿心莲总内酯的研究；也有采用超临界流体技术提取穿心莲总内酯，产品质量相对传统工艺有所提高，但在提高产品纯度上没有明显优势，只是以穿心莲内酯总内酯为考察指标的粗提物；也有采用超临界流体萃取技术提取分离穿心莲内酯专利报道。

结构

药理作用^[2]

去氧穿心莲内酯为常用中药穿心莲有效成分之一，是从穿心莲中分离得到的一种二萜内酯类化合物，现代药理学研究表明 去氧穿心莲内酯具有解热、抗炎、抗钩端螺旋体病、抗菌、抗癌、保肝作用和抗高血压等活性。

1)解热和抗炎活性

研究表明以1 g/kg  去氧穿心莲内酯灌胃对2,4-二硝基酚所致大鼠发热症状具有一定的抗热效果。以2 g/kg  去氧穿心莲内酯对内毒素（从耳缘静脉注射伤寒副伤寒菌0.5 ml/kg）所致的家兔发热，在其中期与末期有一定的解热效果。以1 g/kg 的去氧穿心莲内酯灌胃，对大鼠蛋清性足肿有明显抑制作用。研究表明去氧穿心莲内酯也可以作为一种抗炎治疗药物使用。

2)抗钩端螺旋体病

研究表明将穿心莲甲素（去氧穿心莲内酯）制成片剂，其中每片片重为 0.15 g，每片中含主药穿心莲甲素结晶为 0.1g。20 例钩端螺旋体病患者服用，其主要症状如突然发热、头痛、疲乏、眼结膜充血等减退或消失，其有效率达到 90%。

3)抗菌作用

研究表明去氧穿心莲内酯具有抗革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌（S.aureus  ）、藤黄微球菌（M.luteus）和化脓性链球菌（S. pyogenes）其最小抑菌浓度（MIC）分别为15.6 μg/m L、125 μg/m L、62.5 μg/m L，抗革兰氏阴性菌奇异变形杆菌（P. mirabilis）和绿脓杆菌（p.aeruginosa），其最小抑菌浓度（MIC）分别为125 μg/m L、250 μg/m L。

4)抗癌作用

通过 MTT 法体外抗肿瘤实验测定去氧穿心莲内酯抗人乳腺癌细胞（MCF-7）、人结肠癌细胞（HCT-116）和人早幼粒白血病细胞（HL-60），其半数抑制浓度（IC50）分别为（10.1±1.6）μmol/L、（8.6±1.1）μmol/L和（15.3±2.1）μmol/L（n=8）。

5)保肝作用

研究表明去氧穿心莲内酯对酒精性肝病具有一定的治疗作用，保护作用主要是通过提高氧化还原状态而减小氧化应激，去氧穿心莲内酯能够调节腺苷酸环化酶信号而导致一氧化氮合酶上调，可能是慢性酒精性肝病的一条新的预防途径。

6)抗高血压作用

研究表明去氧穿心莲内酯对大鼠主动脉具有一定的舒张作用，其是通过直接抑制钙离子内流来实现的。研究表明去氧穿心莲内酯能够舒张心血管平滑肌的作用。去氧穿心莲内酯是一种子宫平滑松弛剂。

制剂研究^[3]

由于去氧穿心莲内酯为脂溶性化合物，为增加其水溶性，采用微波辅助饱和水溶液法制备 去氧穿心莲内酯 β-环糊精包合物，利用红外分光光度法与核磁共振法确定包合物的形成，紫外分光光度法测定了包合物的包合常数，并确定 去氧穿心莲内酯与 β-环糊精包合比为 1:1。去氧穿心莲内酯包合物可以增加原料药的溶解度，进一步可以制备成其它剂型，如片剂、胶囊剂、透皮制剂和脂质体等，为 去氧穿心莲内酯制剂的研究提供一定的研究基础。

应用^[1-2]

去氧穿心莲内酯具有抗菌和钩端螺旋体作用。临床试用治疗钩端螺旋体、急性细菌性痢疾、上呼吸道感染、流行性感冒及原因不明的发热等病症均有一定疗效。毒性小，未见明显副作用。能减少二甲苯或H⁺刺激所致伊文思兰自毛血管壁的渗出，有抑制巴豆油所致大鼠炎性渗出作用，对大鼠蛋清性足肿显著抑制作用，对肾上腺皮质功能有不同程度的兴奋作用。

制备 ^[1]

以穿心莲浸膏(穿心莲总内酯含量≥30％)为起始原料，浸膏先经过氯仿进行萃取，脱溶后得到浅黄色的粗晶体，然后上色谱柱，接收含量70％以上的去氧穿心莲内酯单体组分，脱溶后再用有机溶剂重结晶，最后进行超临界流体抗溶剂结晶。具体操作步骤是：

(1)首先将穿心莲浸膏溶解到10-20倍体积的30～50℃的温水中，选择氯仿进行溶剂萃取至少2次；

(2)将萃取液合并、脱溶后，进行色谱柱层析分离，分离介质(固定相)选自硅胶等 流动相选自石油醚与乙酸乙酯的混合液，进行分段收集流份，主要收集含量70％以上的目标物质流份；

(3)将上述收集到的流分合并、真空浓缩干燥成粉末，再采用乙酸乙酯进行重结晶3 次，纯度达97％；

(4)将纯度97％产品配成乙酸乙酯饱和溶液，进行超临界CO₂抗溶剂结晶，控制在压力8～15MPa，温度在45～70℃，时间在45～90min；

(5)停机后收集抗溶剂结晶产物，可制得纯度99％以上去氧穿心莲内酯。

主要参考资料

[1] CN200910185163.0一种去氧穿心莲内酯分离纯化方法

[2] 去氧穿心莲内酯的大鼠肠吸收特征研究

[3] 去氧穿心莲内酯脂质体的研究