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重组小鼠BD-14

发布日期:2020/2/1 11:46:39

背景[1-6]

Recombinant Murine BD-14(重组小鼠β-防御素14)是利用生物技术构建BD-14的大肠杆菌表达体系,然后诱导重组大肠杆菌大量表达BD-14蛋白。BD-14防御素是小半胱氨酸富含阳离子蛋白中都发现脊椎动物和无脊椎动物。它们也在植物中被报道。它们是宿主防御肽,并且起到宿主防御肽的作用。它们对细菌,真菌和许多有包膜和无包膜的病毒具有活性。

它们由18-45个氨基酸组成,包括6个(在脊椎动物中)到8个保守的半胱氨酸残基。免疫系统的细胞含有这些肽,以帮助杀死吞噬细菌,例如在中性粒细胞和几乎所有上皮细胞。大多数防御素通过与微生物细胞膜结合起作用,并且一旦嵌入,就形成孔状膜缺陷,允许必需离子和营养物质流出。防御素是抗菌肽,主要通过破坏细菌细胞膜的结构起作用,并且存在于身体的许多区室中。

越来越多的证据表明,防御素在防御病原体方面发挥着重要作用,它们被认为是先天免疫反应的一部分。他们一般被认为有助于粘膜健康;然而,这些肽可能被认为是可被人母乳中存在的生物活性化合物上调的生物因子。在这个意义上,来自牛奶的三叶草作为hBD2和hBD4的抗菌肽的肠道产生可能在新生儿定植中起重要作用,从而增强新生儿对抗它们可能与之接触的病原体的免疫应答。

BD-14在人体中分布最广,由白细胞和多种上皮细胞分泌。例如,它们可以在舌头,皮肤,角膜,唾液腺,肾脏,食道和呼吸道上找到。有人提出(但也有挑战)囊性纤维化的一些病理学起因于由于较高的盐含量而抑制肺和气管的上皮表面上的β-防御素活性。

应用[7][8]

重组小鼠BD-14可用于研究非分型流感嗜血杆菌抗菌活性:

运用基因工程方法获得重组小鼠β-防御素14体外实验观察mBD2对非分型流感嗜血杆菌(Non-typeable Haemophilus influenzae,NTHi)的抑菌活性,初步探讨BD-14的杀菌机制。体外抗菌实验研究表明,纯化的重组mBD2体外具有明显的抗NTHi活性,培养120 min后,其最小抑菌浓度(MIC)值为40μg/ml,最小杀菌浓度(MBC)值为160μg/ml。外环境NaCl浓度的增高及重组蛋白二硫键的破坏会抑制其抗菌活性。

参考文献

[1] Pearce G,Yamaguchi Y,Munske G,Ryan CA(December 2008)."Structure-activity studies of AtPep1,a plant peptide signal involved in the innate immune response".Peptides.29(12):2083–9.

[2] Thomma BP,Cammue BP,Thevissen K(December 2002)."Plant defensins".Planta.216(2):193–202.

[3] Barrera GJ,Sanchez G,Gonzalez JE(November 2012)."Trefoil factor 3 isolated from human breast milk downregulates cytokines(IL8 and IL6)and promotes human beta defensin(hBD2 and hBD4)expression in intestinal epithelial cells HT-29".Bosnian Journal of Basic Medical Sciences.12(4):256–64.

[4] Barrera GJ,Tortolero GS(2016)."Trefoil factor 3(TFF3)from human breast milk activates PAR-2 receptors,of the intestinal epithelial cells HT-29,regulating cytokines and defensins".Bratislavske Lekarske Listy.117(6):332–9.

Lehrer RI(September 2004)."Primate defensins".Nature Reviews.Microbiology.2(9):727–38.

[5] Varkey J,Singh S,Nagaraj R(November 2006)."Antibacterial activity of linear peptides spanning the carboxy-terminal beta-sheet domain of arthropod defensins".Peptides.27(11):2614–23.

[6] Varkey J,Nagaraj R(November 2005)."Antibacterial activity of human neutrophil defensin HNP-1 analogs without cysteines".Antimicrobial Agents and Chemotherapy.49(11):4561–6.doi:10.1128/AAC.49.11.4561-4566.2005.PMC 1280114.PMID 16251296.

Zhu S,Li W,Jiang D,Zeng X(July 2000)."Evidence for the existence of insect defensin-like peptide in scorpion venom".IUBMB Life.50(1):57–61.

[7] Zhu S,Peigneur S,Gao B,Umetsu Y,Ohki S,Tytgat J(March 2014)."Experimental conversion of a defensin into a neurotoxin:implications for origin of toxic function".Molecular Biology and Evolution.31(3):546–59.

[8] Dhople V,Krukemeyer A,Ramamoorthy A(September 2006)."The human beta-defensin-3,an antibacterial peptide with multiple biological functions".Biochimica et Biophysica Acta.1758(9):1499–512.

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