水仙环素的制备

背景及概述^[1][2]

水仙环素具有很强的抗肿瘤活性，美国癌症协会公布的数据显示，水仙环素对60种肿瘤细胞的IC50值在50-63nM之间，抗肿瘤活性显著Ceriotti等在小鼠肉瘤180细胞实验中发现，水仙环素具有抗有丝分裂的效应Carrasco等在兔网状细胞和酵母非细胞系统实验中发现，水仙环素能有效抑制真核核糖体蛋白的生物合成而发挥抗肿瘤作用，其作用机制是与60S核糖体组结合从而抑制肽键的形成。

Vasquez等研究小组发现水仙环素能有效抑制HeLa癌细胞的生长，并能选择性的作用于DNA而对RNA无影响。水仙环素对正常人成纤维细胞的作用要比癌细胞低250倍，在治疗剂量下不会引起正常成纤维细胞中凋亡作用，可能原因是正常成纤维细胞缺乏凋亡受体通路。由此推测，水仙环素对癌细胞的高选择性，至少部分与凋亡受体通路的激活有关。

在人MCF-7乳腺癌细胞和PC-3前列腺细胞中，发现水仙花素是通过激活受体通路半胱天冬酶-8，10从而诱导癌细胞的凋亡。水仙环素能够高选择性地作用于多形性成胶质细胞瘤，其通过显著减少有丝分裂速度而发挥作用，而不是诱导细胞凋亡来抑制多形性成胶质细胞瘤；同时水仙环素也能调节Rho/Rho激酶/LIM激酶/肌动蛋白素信号通路，增强GTP酶RhoA的活性，同时诱导肌动蛋白应力纤维的形成。

由于水仙环素显著的抗肿瘤活性以及深入的作用机制研究，美国癌症协会已将其列为癌症治疗候选药物。水仙环素，也被称为7-羟基异喹诺酮衍生物，是在1967年从水仙鳞茎中分离出的类生物碱。水

仙环素作为潜在的抗癌药物，其机理主要是通过损害癌细胞中的肌动蛋白骨架组织，达到抗癌作用，遗憾的是，水仙环素对正常内皮细胞的IC50值为87-97nM，与其对肿瘤细胞的IC50值很接近，说明水仙环素虽然具有良好的抗肿瘤活性，但选择性很差，治疗窗较窄，因此需要通过结构修饰来改善其治疗窗，使其在降低毒副作用的同时，获得选择性提高、抗肿瘤活性进一步优化的新型衍生物。

水仙环素

制备 ^[2]

(1)将石蒜进行烘干、粉碎、过筛处理，得到石蒜粗粉；采用乙醇水溶液加热回流提取石蒜粗粉，得到提取液；

(2)将提取液减压浓缩，得到浸膏；将浸膏采用水溶解，然后采用石油醚萃取，得到上层石油醚相和下层水相A；将下层水相A采用乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯相和下层水相B；将下层水相B采用正丁醇萃取，得到正丁醇相和下层水相C；

(3)将正丁醇相减压浓缩，烘干，得到干燥的正丁醇相；采用甲醇将干燥的正丁醇相溶解，然后与100～200目硅胶拌样混匀，烘干，得到经过拌样处理的正丁醇相；

(4)将200～300目硅胶装柱，然后将经过拌样处理的正丁醇相采用干法上样，再采用氯仿-甲醇混合溶剂等度洗脱，将洗脱的馏分蒸干，得到蒸干的馏分；氯仿与甲醇的体积比为9:1；

(5)将蒸干的馏分采用甲醇溶解，点硅胶板，在层析缸中展开，展开剂为体积比为9：1的氯仿-甲醇混合溶剂，合并比拟值相同的馏分；然后将比拟值相同的馏分过硅胶柱，选用体积比为4：1的氯仿-甲醇混合溶剂洗脱，收集馏分，点硅胶板，在层析缸中展开，展开剂为体积比为4：1的氯仿-甲醇混合溶剂，合并比拟值相等的馏分，得到体积比为4：1的氯仿-甲醇混合溶剂洗脱的比拟值相等的馏分；

(6)将比拟值相等的馏分过凝胶柱，用体积比为1:1的甲醇-水混合溶剂进行等度洗脱，收集馏分，点聚酰胺板，在层析缸中展开，展开剂为体积比为1：1的甲醇-水混合溶剂，将比拟值相等的馏分合并，得到体积比为1:1的甲醇-水混合溶剂洗脱的比拟值相等的馏分；

(7)将体积比为1:1的甲醇-水混合溶剂洗脱的比拟值相等的馏分过ODS柱，采用体积比为7：3的甲醇-水混合溶剂等度洗脱，收集馏分，点聚酰胺板，在层析缸中展开，展开剂为体积比为7：3的甲醇-水混合溶剂，将比拟值相等的馏分合并，烘干，得到异喹诺酮类生物碱化合物水仙环素。

主要参考资料

[1] 梁宇博, 陈宁, & 宋春慧. (2015). 水仙环素的药理作用及其研究进展. 科学技术创新(8).

[2] 马楠楠, 陈宁, & 季宇彬. (2013). 水鬼蕉生物碱抗肿瘤研究进展. 黑龙江医药, 26(2), 205-208.

[3] 季宇彬, 辛国松, 曲中原, 邹翔, & 于淼. (2016). 石蒜属植物生物碱类化学成分和药理作用研究进展. 中草药, 47(1), 157-164.