胰蛋白酶水解骆驼奶和牛奶乳清及其组分的抗菌活性
发布日期:2021/4/25 11:45:51
从骆驼奶和奶牛乳清蛋白中分离纯化抗菌肽，并对其抗菌活性进行了研究。用胰蛋白酶水解乳清蛋白，凝胶电泳鉴定水解程度，超滤纯化乳清水解物（WH），葡聚糖凝胶层析得到抗菌活性小肽。利用透射电镜研究了抗菌肽对细菌形态的影响。测定其氨基酸组成及抗菌活性。多肽CaWHⅢ（<3kda）和CoWHⅢ（<3kda）具有最强的抗菌活性。Fr.A2（CaWHⅢ组分2）和Fr.B1（CoWHⅢ组分1）对大肠杆菌和葡萄球菌均有抗菌作用，Fr.A2的最低抑菌质量浓度分别为65mg/mL和130mg/mL，Fr.B1的最低抑菌质量浓度分别为130mg/mL和130mg/mL。高效抗菌肽含有大量的碱性氨基酸（28.13%的骆驼乳Fr.A2和25.07%的牛乳B1）和疏水性氨基酸。结果表明，用胰蛋白酶水解CaW和奶牛产生了多种有效的抗菌肽，其抗菌活性略高于牛乳乳清。
从骆驼奶和奶牛乳清蛋白中分离纯化抗菌肽，并对其抗菌活性进行了研究。用胰蛋白酶水解乳清蛋白，凝胶电泳鉴定水解程度，超滤纯化乳清水解物（WH），葡聚糖凝胶层析得到抗菌活性小肽。利用透射电镜研究了抗菌肽对细菌形态的影响。测定其氨基酸组成及抗菌活性。多肽CaWHⅢ（<3kda）和CoWHⅢ（<3kda）具有最强的抗菌活性。Fr.A2（CaWHⅢ组分2）和Fr.B1（CoWHⅢ组分1）对大肠杆菌和葡萄球菌均有抗菌作用，Fr.A2的最低抑菌质量浓度分别为65mg/mL和130mg/mL，Fr.B1的最低抑菌质量浓度分别为130mg/mL和130mg/mL。高效抗菌肽含有大量的碱性氨基酸（28.13%的骆驼乳Fr.A2和25.07%的牛乳B1）和疏水性氨基酸。结果表明，用胰蛋白酶水解CaW和奶牛产生了多种有效的抗菌肽，其抗菌活性略高于牛乳乳清。
表1不同分子质量段乳清组分抗菌活性与抗菌活性的关系
图1骆驼乳清和牛乳乳清水解时间（分别为30、60、90、120、180240、300和360分钟）对DH（水解度）的影响
图2使用葡聚糖凝胶从Sephadex G-25色谱柱中洗脱骆驼乳清水解肽III（CaWH III）（A）和奶牛乳清水解肽III（CoWH III）（B）的剖面图
表2牛乳（奶牛）和骆驼乳（CaW）乳清蛋白抗菌肽提取物的最低抑菌浓度（MIC）
表3各组分氨基酸组成分析
