无动物源性胰蛋白酶/EDTA
发布日期:2021/4/20 13:54:48
产品描述
无动物源性胰蛋白酶/EDTA是一种重组酶，可以替代动物胰腺来源消化塑料培养瓶中培养的贴壁细胞。本产品比天然胰蛋白酶制剂具有更高的特异性，适用于无血清培养体系中贴壁细胞的消化。本产品溶剂为PBS/1mM EDTA，是即用型产品。本品不含酚红。
产品使用
1. 将无动物源性胰蛋白酶/EDTA和完全培养基于37℃复温。
2. 将待消化的培养瓶中培养基上清吸弃。
3. 用5 ml无钙镁离子的PBS清洗细胞层并弃去洗液。
4. 在培养瓶中加入适量的无动物源性胰蛋白酶/EDTA（例：75cm2培养瓶中加入5ml消化液），保证贴壁细胞层完全被消化液浸没。
5. 37℃孵育，直至细胞被消化下来（使用倒置显微镜观察，保证细胞完全被消化下来）可以轻拍瓶底，帮助细胞解离。
6. 在培养瓶中加入5-10ml的完全培养基，各个角度倾斜培养瓶冲洗，然后将液体转入15ml离心管。
7. 100g离心5-10min。
8. 去上清后用2-5ml复温的完全培养基重悬。
9. 确定细胞浓度及活率。
10.根据细胞特性以一定的浓度接种细胞，即可进行培养。
