桑黄多糖的药理活性

背景及概述^[1]

桑黄具有广泛的药理活性，现代药理学研究表明桑黄多糖是桑黄主要功效成分。桑黄多糖具有抗肿瘤、抗衰老、抗发炎、提高免疫力和降血糖等活性，尤其在抗肿瘤方面，已经被证实了比灵芝、巴西蘑菇等药用真菌还有效，且与传统抗肿瘤药物联用可起到协同效果，因此得到广泛关注。目前主要应用于肝炎及癌症的治疗，因其效果显著，已经开始人工栽培并批量生产。正因为桑黄的药用和保健功效，使得人们越来越重视，这也极大地推动了相关研究和产品的开发。

名称及地区分布^[2]

桑黄属担子菌亚门（Basidiomycotas）、层菌纲（Hymenomycetes）、非褶菌目（Aphyllophorales）、锈革孔菌科（Hymenochaetaceae）、针层孔菌属（PhellinusQuel），主要包括火木针层孔菌（Phellinusigniarius）、裂蹄针层孔菌（Phellinuslinteus）和鲍氏针层孔菌（Phellinusbaumii）。P.igniarius喜生于杨树、柳树、榉树、桑树等阔叶树的树干，东北各原始森林较常见。P.1inteus生于阔叶树腐木干上，产于东北地区。P.baumii主要寄生于丁香属植物，尤其是暴马丁香，偶尔也生长在白腊树属、李属等植物上。产于中国、韩国、日本、朝鲜、菲律宾、澳大利亚、北美、中南美等地。

化学组成^[2]

研究P.1inteus胞外多糖发现，单糖成分主要有甘露糖（3％～12％）、半乳糖（2％～10％）、葡萄糖（80％～95％）组成。Kim等研究P.1inteus子实体粗多糖，其中多糖部分主要由甘露糖、半乳糖、葡萄糖、树胶醛醣和木糖构成。红外光谱及1H和13C核磁共振显示，该多糖存在α-糖苷键和β?糖苷键，是以β-(1→6)-D-葡萄糖为主链，β-(1→6)-D-葡萄糖为侧链的蛋白杂多糖。从桑黄子实体分离出来一种新型的杂多糖，分子量为1.71×10⁴D，它由L-岩藻糖、D-葡萄糖、D-甘露糖，D-半乳糖、3-O-ME-D-半乳糖以1：1：1：2：1的比例组成。运用薄层色谱和气相色谱法，分析桑黄子实体多糖的单糖组成，得出韩国桑黄子实体多糖的单糖组成为葡萄糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖和半乳糖；日本桑黄子实体多糖的单糖组成为葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖、甘露糖和半乳糖。研究桑黄子实体活性多糖PIFI的单糖组成为甘露糖、葡萄糖和半乳糖，其摩尔比为0.64：1：1.94。另外还发现一种特殊的单糖3(4)-O-甲基-己糖。

药理活性的研究进展^[2]

1. 抗癌作用

1）桑黄多糖直接诱导癌细胞凋亡

关于桑黄多糖直接诱导癌细胞凋亡的报道不多。国内学者温克等人比较了口服桑黄（P.linteus）等4种药用真菌对S180肉瘤和胃癌的抑制作用。桑黄在剂量为0.5g/kg体重时，对小鼠S180肉瘤和胃癌的抑制率分别为46.07％和43.09％。这是国内篇对桑黄抗癌功能的报道。用不同溶剂从P.linteus液体培养菌丝体中提取多糖，获得了五种多糖蛋白复合物。进行S180肉瘤的抗癌实验表明，口服FⅢ-1的抗癌效果最强，抑瘤率达81.2％。

2）抑制癌细胞转移

研究表明CPL能够有效抑制B16BL6癌细胞的肺部转移。来源于P.linteus的蛋白多糖PL对不同癌细胞的抑制作用。发现PL和阿霉素均能够有效抑制B16F10黑色素瘤，提高荷瘤裸鼠的生命延长期，并且两者具有协同作用。但是阿霉素会造成小鼠体重的严重下降，而PL则没有此现象出现。

3）加强对体内药物代谢酶的控制

一些药物代谢酶（如CYP酶）能激活前致癌物转化为致癌物而引发癌症。有报道认为桑黄多糖类物质对CYP酶系具有下调作用。研究了P.linteus菌体多糖和胞外多糖对鼠肝线粒体中P450（CYP）1A1、1A2、2B1、2E1等酶类的抑制作用。由于CYP酶系属于一相药物代谢酶系，其具有将前致癌物转变为活性致癌物的功能，因此对肝脏中CYP酶系的抑制，可能是P.linteus菌丝体多糖和胞外多糖具有抗癌活性的原因之一。利用P.linteus发酵大豆多糖能有效抑制鼠肝线粒体中P4501A1、1A2、2B1活性。也能有效抑制TPA诱导的鸟氨酸脱羧酶活性，因此其可能将来作为癌症的化学预防药物应用。

2. 免疫调节

桑黄多糖可促进树突细胞成熟，提高巨噬细胞的NO产生及相关细胞因子的分泌，增强细胞毒性T细胞、NK细胞活性和体液免疫功能。

1）对T淋巴细胞的影响

用单向混合淋巴细胞和双向混合淋巴细胞培养2种方法，检测P.linteus菌丝体多糖对抗原引起的T淋巴细胞增殖的影响，结果此菌丝体多糖不仅使T细胞增殖，而且促进其分化。细胞检测其分化细胞自然杀伤细胞（NK）的毒力，体内单一注射此菌丝体多糖（100mg·kg-1），毒力提高165％；体外经此菌丝体多糖处理，浓度为0.1mg·mL-1时，毒力提高161％；浓度为1mg·mL-1时，毒力提高260％。

2）对B淋巴细胞的影响

检测发现，用P.linteus子实体蛋白多糖（200mg·kg-1）处理过的小鼠脾淋巴细胞（MSLs）增加了4倍，主要是CD19+细胞的数量变化，即目标是B细胞。

3）对细胞因子的影响

P.linteus子实体多糖（100ug·mL-1）能诱导MHCⅡ和CDⅡc+树突状细胞（DC）表面共刺激分子CD80和CD86的上调，IL-12p40/p70的表达量由2.4%上升为19.5％，且不受多粘菌素B（PB）的抑制；此子实体多糖能促进DC同分异构免疫能力，IL-2提高2倍多；此外，此子实体多糖诱导DC迁移到淋巴组织，激活蛋白激酶C（PKC）和磷酸化蛋白酪氨酸激酶（PTK），解除表面细胞和IF-12表达的抑制。

4）对抗体形成细胞的影响

试验中使用抗原体内外刺激B细胞产生IgM，来检测P.linteus菌丝体多糖在抗体产生中的作用，结果此菌丝体多糖（100mg·kg^-1）与SRBC一起注入体内，抗体形成细胞增加250%，体外此菌丝体多糖（1000ug·mL^-1）作用，抗体形成细胞增加187%。

3. 抗发炎作用

用从P.linteus子实体中分离出的酸性糖预处理小鼠（100mg·kg^-1），发现能有效抑制细胞因子的上升；另外此多糖能调和细胞因子的释放以及B细胞、巨噬细胞中MHC-II类分子的水平；此多糖的体内给药还能降低血清中IL-2、IFN-γ和TNF-α的含量，并加强由体外脂多糖激活的巨噬细胞和T细胞的自发凋亡，缓和败血症，起到抗发炎的作用。

4. 抗氧化作用

P.linteus子实体多糖10μg·mL^-1～300μg·mL^-1范围内，能直接清除稳定的α，α一二苯基苦基肼基游离基（DPPH），也抑制过氧化脂质（LPO）；300μg·mL^-1时能完全抑制尿酸的形成。

5. 降血糖作用

用桑黄多糖喂用链脲霉素导致的糖尿病大鼠，结果显示桑黄多糖能够降低血糖，同时减少总胆固醇、三酰甘油和天冬氨酸转氨酶。

制备^[3]

一种桑黄多糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)取1kg野生桑黄去除杂质后用万能粉碎机粉碎至粒度为90目；

(2)将上述步骤(1)中粉碎后的桑黄在-20℃冷冻后得到冻干粉；

(3)对步骤(2)得到的冻干粉在-12℃环境下机械破壁处理，破碎后粒子直径为25μm；

(4)向经上述步骤(3)处理后的桑黄粉中加入水进行浸提，桑黄粉和水的质量比为1：35，浸提过程为在55℃浸提35min，75℃浸提80min，95℃浸提65min，过滤后取滤液，减压浓缩得到水提物；

(5)向上述步骤(4)中水提物中加入4倍体积的乙醇、正丁醇和甲醇的混合物进行沉淀、沉淀24h后离心收集沉淀物，其中乙醇、正丁醇和甲醇的用量比例为4：3：2；

(6)将上述沉淀物用丙酮洗涤3次，65℃干燥至不含溶剂，即得桑黄多糖。

参考文献

[1] 桑黄多糖的药理作用及提取方法研究进展

[2] 桑黄多糖的研究进展

[3] CN201810693837.7一种桑黄多糖的制备方法