小鼠小肠平滑肌细胞试剂盒的用途

背景^[1-6]

小鼠小肠平滑肌细胞试剂盒本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的成小肠细胞。小鼠小肠平滑肌细胞试剂盒提供了的组织分离条件，分离单个细胞的效率高。此外，小鼠小肠平滑肌细胞试剂盒还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用小鼠小肠平滑肌细胞试剂盒的成纤维抑制体系，可以程度地降低所培养的成小肠原代细胞中成纤维细胞的含量。

虽然小肠组织机械韧性很强，但利用小鼠小肠平滑肌细胞试剂盒中提供的小肠组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的小肠组织片能使得小肠组织中成小肠细胞的一些功能特性发生改变，从而将成小肠细胞分离开来。平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式。肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生，这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。利用肠平滑肌细胞的培养，可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。

小鼠小肠平滑肌细胞培养试剂盒适合于培养人的成小肠组织细胞。本试剂盒包含：（1）OptiTDS小鼠小肠平滑肌细胞组织解离液（2）小鼠小肠平滑肌细胞组织处理缓冲液（3）小鼠小肠平滑肌细胞成纤维抑制剂（4）小鼠小肠平滑肌细胞组织洗液（5）小鼠小肠平滑肌细胞生长因子及血清（6）小鼠小肠平滑肌细胞基础培养基（7）小鼠小肠平滑肌细胞组织预备液（8）小鼠小肠平滑肌细胞培养试剂盒使用说明书。

用途^[7][8]

用于干细胞因子对糖尿病小鼠十二指肠运动的影响：Cajal间质细胞、平滑肌细胞作用研究

糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)小鼠十二指肠动力障碍时平滑肌细胞慢波(Slow wave)的变化,并观察Cajal间质细胞(Interstitial cells of Cajal,ICC)的结构、数量及形态的变化。方法:将雄性balb/c小鼠分为正常对照组(Control group)、糖尿病组(DM group)。DM小鼠一次性腹腔注射(ip)链脲佐菌素(STZ,150 mg/kg)造模。所有小鼠饲养6周结束后,给予印度墨水灌胃测定小肠传输速率,最后处死所有小鼠,用微电极细胞内记录仪记录各组小鼠十二指肠平滑肌细胞内慢波的变化。用透射电镜观察ICC超微结构的变化。

结果:DM组小肠传输速率比正常组的明显降低(44.05±5.48vs 82.75±6.56,P<0.01);DM组与正常小鼠相比,十二指肠平滑肌细胞内慢波频率明显减慢(13.33±4.27vs 30.67±3.33,P<0.01),波幅明显减小(15.17±3.71 vs 35.17±3.71,P<0.01),且波形杂乱不规则。DM组小鼠近端十二指肠的ICC出现数量减少,基膜溶解,细胞器破坏,内质网扩张,线粒体肿胀,甚至空泡样变性;ICC与周围细胞之间的紧密连接也被破坏。结论:糖尿病小鼠确实存在十二指肠动力障碍,这与ICC的异常改变密切相关。目的:探讨外源性干细胞因子(stem cell factor,SCF)对糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)小鼠十二指肠的Cajal间质细胞的影响。

透射电镜观察十二指肠平滑肌细胞内的超微结构的变化。用细胞内电流记录仪记录十二指肠平滑肌细胞内慢波的变化。结果:DM组比对照组的小肠传输速率明显降低(44.05±5.48 vs 82.75±6.56,P<0.01);DM+SCF组比DM组的小肠传输速率显著增加(75.89±3.61 vs 44.05±5.48,P<0.01),但比正常组的降低(75.89±3.61 vs 82.75±6.56,P<0.05)。光镜下观察到DM组的平滑肌细胞胞浆明显水肿,DM+SCF组的平滑肌细胞胞浆水肿减轻。透射电镜下观察到DM组平滑肌细胞线粒体明显肿胀,内质网扩张,甚至空泡变性,DM+SCF组平滑肌细胞线粒体肿胀和内质网扩张都有不同程度的减轻。

DM组与正常组相比,十二指肠平滑肌细胞内慢波频率明显减慢(13.33±4.27vs 30.67±3.33,P<0.01),波幅明显减小(15.17±3.71 vs 35.17±3.71,P<0.01),且波形杂乱不规则。DM+SCF组的十二指肠平滑肌细胞内的慢波频率和波幅比DM组的均增加(26.50±1.87vs 13.33±4.27;27.50±2.26vs15.17±3.71,P<0.01),但比正常组减慢和降低(26.50±1.87 vs 30.67±3.33,P<0.05;27.50±2.26vs 35.17±3.71,P<0.01)。结论:外源性SCF可以逆转糖尿病小鼠十二指肠平滑肌细胞的异常改变,并对糖尿病小鼠的十二指肠动力障碍有一定的改善作用。

参考文献

[1]Gastrointestinal hormonal dysfunction in gastroparesis and functional dyspepsia[J].J.Khoo,C.K.Rayner,C.Feinle‐Bisset,K.L.Jones,M.Horowitz.Neurogastroenterology&Motility.2010(12)

[2]Diabetic Neuropathies:Update on Definitions,Diagnostic Criteria,Estimation of Severity,and Treatments[J].Tesfaye,Solomon,Boulton,Andrew J M,Dyck,Peter J,Freeman,Roy,Horowitz,Michael,Kempler,Peter,Lauria,Giuseppe,Malik,Rayaz A,Spallone,Vincenza,Vinik,Aaron,Bernardi,Luciano,Valensi,Paul.Diabetes Care.2010(10)

[3]W sh/W sh c-Kit mutant mice possess interstitial cells of Cajal in the deep muscular plexus layer of the small intestine[J].Satoshi Iino,Kazuhide Horiguchi,Yoshiaki Nojyo.Neuroscience Letters.2009(3)

[4]Origin and propagation of individual slow waves along the intact feline small intestine[J].Wim J.E.P.Lammers,BettyStephen.Experimental Physiology.2008(3)

[5]Interstitial cells of Cajal in diabetic gastroenteropathy[J].Neurogastroenterology&Motility.2007(1)

[6]Ultrastructural evidence for communication between intramuscular vagal mechanoreceptors and interstitial cells of Cajal in the rat fundus[J].T.L.Powley,X.‐y.Wang,E.A.Fox,R.J.Phillips,L.W.C.Liu,J.D.Huizinga.Neurogastroenterology&Motility.2007(1)

[7]Exogenous Serotonin Regulates Proliferation of Interstitial Cells of Cajal in Mouse Jejunum Through 5-HT 2B Receptors[J].Mira M.Wouters,Simon J.Gibbons,Jaime L.Roeder,Marne Distad,Yijun Ou,Peter R.Strege,Joseph H.Szurszewski,Gianrico Farrugia.Gastroenterology.2007(3)

[8]杨琰.干细胞因子对糖尿病小鼠十二指肠运动的影响：Cajal间质细胞、平滑肌细胞的作用[D].安徽医科大学,2011.