广谱核酸酶 新品

一、基本信息

• 正式名称：Benzonase Nuclease（全能 / 广谱核酸酶）

• 来源：粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens），重组大肠杆菌 / 酵母表达

• CAS 号：9025-65-4；EC 3.1.30.2

• 结构：同源二聚体，单体约 28–30 kDa，总分子量≈56 kDa

  二、核心特性（广谱 + 稳定 + 高效）

1. 无差别降解（最关键）

• 底物：DNA/RNA 通吃，不分单双链、线性 / 环状 / 超螺旋、天然 / 变性

• 产物：2–8 nt 5'- 单磷酸寡核苷酸，无碱基偏好

2. 极端条件稳定（适用性极强）

• pH：6–10（最适 8.0）

• 温度：4–42℃（最适 37℃）

• 耐变性剂：6M 尿素、0.1M 盐酸胍、0.4% Triton X-100、0.1% SDS、1mM EDTA/PMSF 仍保持高活性

3. 高效快速

• 1U 可降解 1μg 核酸；37℃下15–30 分钟彻底清除核酸污染

三、作用机制

• 切割磷酸二酯键，无序列特异性，在链内任意核苷酸间切割

• 无需辅助因子（如 Mg2?非必需），EDTA 不抑制活性

四、主要应用场景

1. 生物制药（核心用途）

• 疫苗 / 病毒载体：去除宿主残留 DNA（FDA 要求 < 10 pg / 剂量，国内 < 100 pg / 剂量），降低免疫原性与致癌风险

• 重组蛋白 / 抗体：降解裂解液核酸，降低粘度、提高纯化效率，减少核酸干扰

• 细胞治疗：防止 PBMC 结团，提升细胞存活率

2. 分子生物学研究

• 蛋白提取：去除核酸，避免电泳 / 质谱 / IP 干扰

• 病毒学：纯化病毒时去除游离核酸，提高滴度与纯度

• 样品预处理：降低裂解液粘度，替代超声 / 高压均质，减少设备负荷

五、典型反应条件（通用方案）

• 缓冲液：20 mM Tris-HCl，pH 8.0，1 mM MgCl?（可选，增强活性）

• 温度 / 时间：37℃，15–60 min；4℃可过夜

• 用量：1 U/μg 核酸；或 10–50 U/mL 样品（按浊度调整）

• 终止：加 EDTA 至 5 mM，或 75℃孵育 15 min 灭活

六、安全与储存

• 储存：-20℃（可稳定 1 年）；避免反复冻融；运输干冰 / 冰袋

• 安全：无动物源 / 人源组分，低毒性；避免皮肤 / 眼睛接触，操作后洗手