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枸杞多糖

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枸杞子是茄科植物枸杞的果实,是我国的一种传统中药。枸杞的药理和保健作用与其中含有的生物活性物质枸杞多糖(LBP,Lycium Barbarum Poly saccharides)有很大关系。现代科学研究表明, 枸杞多糖具有调节免疫、清除自由基、抑制肿瘤、延缓衰老、降血脂、降血糖和抗疲劳等作用, 具有广阔的开发应用前景。

【化学成分】[2,3]
枸杞总多糖以阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖与半乳糖醛酸组成的酸性杂多糖同多肽或蛋白质构成的复合多糖为主, 还含有中性杂多糖和葡聚糖同多肽或蛋白质构成的复合多糖。冷冻干燥得到的枸杞多糖为白色略带棕色纤维状疏松固体,按LBP-I、LBP-Ⅱ、LBP-Ⅲ 、LBP-Ⅳ的顺序,其水溶性依次递减,不溶于乙醇,丙酮等有机溶剂。硫酸-苯酚、硫酸-蒽酮、硫酸-咔唑反应、考马斯亮蓝染色反应呈阳性,斐林试验,碘-碘化钾反应呈阴性。

枸杞子  
图1为枸杞子。

【提取分离】[1,3,4,5]
枸杞多糖的提取过程可以分为:预处理、多糖浸提、多糖醇沉和脱蛋白等几个阶段。其中浸提主要有水提法、碱液提取法、酶解提取法、微波法、超声波萃取法等。例如,高洪霞等以枸杞为原料, 对其多糖成分提取工艺进行研究。采用单因素试验法对影响枸杞多糖提取率的主要因素进行分析研究, 然后利用正交试验法优化提取枸杞多糖的最佳工艺条件。枸杞多糖提取的最佳条件为提取温度90 ℃, 料水比1 ∶30(W∶V), 提取时间2 h。在最佳提取工艺条件下, 枸杞多糖的一次提取率为10.76%。
为进一步纯化枸杞多糖,经常会采用柱层析法.例如, 何进等把提取的枸杞粗多糖溶解后通过DEAE 柱, 再用去离子水、氯化钠溶液梯度洗脱.用硫酸苯酚法检测, 可以得到三个级分的枸杞多糖溶液.多糖溶液经浓缩、透析、冷冻干燥、水溶解后, 用Sephadex S 300 柱进行层析、水洗脱、浓缩、冷冻干燥后得到对应的枸杞多糖纯品LBP-Ⅱ , LBP-Ⅲ和LBP-Ⅳ 。

【分析方法】[6,7,8]
1、蔡宇和姚霞在研究中均采用采用苯酚-硫酸法测定枸杞多糖的含量。于490 nm 下测定吸光度值( A 值) 。以A 值为纵坐标,浓度( C) 为横坐标,绘制标准曲线。
2、首先,制备枸杞多糖标准品溶液。
标准曲线的制备:精密量取对照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml,分别置具塞试管中,分别加水补至2.0ml,各精密加入5%苯酚溶液1m1,摇匀,迅速精密加入硫酸5ml,摇匀,放置10分钟,置40℃水浴中保温15分钟,取出,迅速冷却至室温,以相应的试剂为空白,照紫外一可见分光光度法,在490nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
将粗品处理,精密量取1ml,置具塞试管中,加水1.0ml,照标准曲线的制备项下的方法,自“各精密加入5%苯酚溶液1m1”起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中含葡萄糖的重量(mg),计算,即得。(苯酚-硫酸法测定枸杞多糖)

【药理作用】[9,10,11,12,13,14]
实验研究表明枸杞多糖具有作用如下:
① 具有免疫调节,增强免疫力的作用;
② 抗肿瘤;
③ 具有保护遗传物质损伤的作用;
④ 抗辐射,升高白细胞的作用;
⑤ 较好的体外降血糖作用;
⑥ 消除羟自由基作用,消除率可达44.90%;
⑦ 抗细胞凋亡,延缓衰老的作用。

【主要参考资料】
1. 魏永祥等. 枸杞多糖的研究进展. 安徽农业科学,2010,38(11),5834-5836
2. 王琦等. 枸杞多糖研究进展. 食品研究与开发,2009,30(10),150-152
3. 刘锡建等.枸杞多糖的研究进展.上海工程技术大学学报,2008,22(4),299-302
4. 高洪霞等. 枸杞多糖提取工艺的研究. 食品与机械,2008,24(5):60-63
5. 陈忱等. 枸杞多糖提取工艺的研究进展. 粮食与食品工业,2013,20(4),54-57
6. 蔡宇. 超声法提取枸杞多糖工艺条件优选. 中成药,2010,32(10),1820-1822
7.姚霞等.不同枸杞子中枸杞多糖的含量分析. 医药导报,2011,10(4),426-428
8. 枸杞子 2010版中国药典质量标准.
http://www.yaojia.org/article-5608-1.html
9. 枸杞子. 对免疫功能的影响. 中国工具书网络出版总库.
10. 枸杞子. 抗肿瘤作用. 中国工具书网络出版总库.
11. 枸杞子. 对小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用. 中国工具书网络出版总库.
12. 枸杞子. 抗辐射、升高白细胞作用.  中国工具书网络出版总库.
13.李朝晖等. 枸杞多糖降血糖作用的细胞实验研究.中药材,2012,35(1),124-127
14. 胡仲秋等. 枸杞多糖提取及消除羟自由基活性研究. 食品科学,2009,30(24),93-98.