鸡血藤提取物

鸡血藤提取物为豆科密花豆属植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn的干燥藤茎提取物。具有补血养血，舒筋活络的作用。用于月经失调，血虚萎黄，麻木瘫痪，风湿痹痛等。 本信息是由Chemicalbook的侍艳编辑整理。 鸡血藤又名血风藤，过江龙，猪血藤，大血藤。为豆种植物密花豆Spatholobus Suberectus Dunn.的干燥茎藤。木质藤本。三出复叶，小叶宽椭圆形，长10～20厘米，宽7～15厘米，先端短尾状，基部圆形，上面有疏柔毛，下面脉腋间有黄色髯毛，侧生小叶基部偏斜;叶柄及小叶柄无毛;小托叶针状。圆锥花序腋生，大型，花多而密；序轴及总花梗被黄色短柔毛；花冠蝶形，白色，肉质;雄蕊10，二体；子房有白色硬毛。荚果舌形，长8～10厘米，有黄色茸毛。种子1枚，生于荚果顶端。花果期夏秋。生于林中、灌丛或山沟。产于广东、广西、云南等地。

图1为鸡血藤 藤茎含表无羁萜醇 (friedelan-3β-ol)、胡萝卜苷 (daucosterol)、β-谷甾醇 (β-sitosterol)、7-酮基-β-谷甾醇 (7-oxo-β-sitosterol)、刺芒柄花素 (formononetin)、芒柄花苷 (ononin)、樱黄素 (prunetin)、阿佛洛莫生 (afrormosin)、大豆素 (daidzein)、3，7-二羟基- 6-甲氧基二氢黄酮醇 (3，7-dihydroxy-6-methoxy-dihy-droflavonol)、表儿茶精 (epicatechin)、异甘草苷元 (isoliquiriti-genin)、3，4，2′，4′-四羟基查耳酮 (3，4，2′，4′-tetrahydroxy chalcone)、甘草查耳酮A (licochalcone A)、苜蓿酚 (medicagol)、原儿茶酸 (protocatechuic acid)、9-甲氧基香豆雌酚 (9-methoxy coumestrol)、卡亚宁 (cajinin)。据报道藤茎中还含有2-甲氧基-4- (2′-羟乙基) -苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 [2-methoxy-4- (2′-hydroxyethyl) -phenyl-1-O -β-D-glucopyranoside]、正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷 (n-butyl-O-β-D-fructo pyranoside)、二十五烷酸-α-单甘油酯 (glycerol-α-pentacosanoate)、白桦脂酸 (betulinic acid)、正二十六碳酸 (hexacosanoic acid) 五种成分[2]、以及密花豆素 (suberectin)、毛蕊异黄酮 (calycosin)、焦性粘液酸 (pyromucic acid)、间苯三酚 (1，3，5-benzenetriol)、琥珀酸 (succinic acid)，还有没食子儿茶素 (gallocatechin)、儿茶素 (catechin)、丁香酸 (syringicacid)、香草酸 (vanillicacid)[4]。脂溶性成分有白芷内酯 (angelicin)、大黄素甲醚 ( physcion)、羽扇豆醇 (lupeol)、羽扇豆酮 (lupeone)、大黄酚 (chrysophanol)、以及7-酮基-谷甾酮 (7-carbonyl-β-sitosterone)、大黄素 (emodin)、大黄酸 (emodic acid)、芦荟大黄素 (aloe-emodin)。另外在厚果鸡血藤的根中还发现有齐墩果酸 (oleanolic acid)、水黄皮素 (karanjin)、2-3′，4′-三甲氧基-7，8-呋喃骈黄酮 [2- (3′，4′-dimethoxyphenyl) 3-methoxy、 4H-furo (2，3-h) -1-benzopyran-4-one]，以及5-甲氧基-7，8-呋喃骈黄酮 (4H-furo [2，3-h] -1-benzopyran-4-one，5-methoxy-2-phenyl)、2′，3，6-三甲氧基-7，8-呋喃骄黄M[4Hfuro (2，3-h) -1-benzopyran-4-one，3-methoxy-2- (2′，6′dimethoxyphenyl)]。另外还含有多种挥发性成分：α-萜品烯 (α-terpinene)、对伞花烃 (p-cymene)、柠檬烯 (limonene)、1，8-桉叶醇 (1，8-cineol)、樟脑 (camphor)、芳樟醇 〔linalool〕、L-龙脑 (L-bomeol)、1-薄荷醇 (1- menthol)、α-萜品醇 (α-terpineol)、长叶薄荷酮 (pulegone)、E-茴香脑 (E-anethole)、δ-榄香烯 (δ-elemene)、α-枯杷烯 (α-copaene)、β-石竹烯 (β-caryophyllene)、香橙烯 (aromadendrene)、朱栾倍半萜 (valencene) β-蛇床烯 (β-selinene)、δ-蛇床烯 (δ-selinene)、α- 蛇床烯 (α-selinene)、去氢白菖烯 (calamenene)、顺式-α-红没药烯 (cis-α-bisabolene)、橙花叔醇 (nerolidol)、石竹烯氧化物 (caryophyllene oxide)、白菖油萜 (calarene)、α-红没药醇 (α-bisabolol)[9]、十四烷酸 (Tetradecanoic acid)、oxacyclohexadecan-2-one、十五烷酸 (pentadecanoic acid)、邻苯二甲酸二丁酯 (dibutyl phthalate)、十六烷酸 (hexadecanoic acid)、9- 十六烷酸 (9-hexadececacid)、1-tetradecene hexadecanoic acid、十七烷酸 (heptadecanoic acid)、9，12-十八二烯醛 (9，12-octadecadienal)、油酸 (oleic acid)、十八烷酸 (octadecanoic acid)等。
1.刺芒柄花素(Formononetin)：异名芒柄花黄素Biochanin B，Neochanin。分子式C16H12O4，分子量208.26。针状结晶(乙醇)，mp.258℃。
2.芒柄花苷(Ononin)： 无色结晶，mp.215℃～217℃。
3.樱黄素(Prunetin)：异名洋李亭，Prunusetin。分子式C16H12O5，分子量284。无色针状结晶，mp.240℃，208℃。
4.大豆黄素(Daidzein)：异名大豆苷元，大豆黄酮，Daizeol。分子式C15H10O4，分子量254. 23。苍黄色棱柱结晶(稀乙醇)，mp.315℃～316℃(d)。溶于乙醇及乙醚。
5.异甘草素(Isoliquiritigenin)：异名2，4，4′-三羟基查耳酮。分子式C15H12O4，分子量256。黄色针状结晶(甲醇-水)，mp.198℃～200℃。
6.甘草查耳酮(Licochalcone A)：分子量338。橘黄色结晶，mp.103℃～105℃。
7.原儿茶酸(Protocatechuic acid)：异名喘炎宁。分子式C7H6O4，分子量154.12。无色结晶，mp.202℃～203℃。溶于水、乙醇、乙醚、丙酮，微溶于苯、氯仿，不溶于石油醚。
8.奥刀拉亭(Odoratin)：异名芳香膜菊素。分子式C15H22O4，分子量266。细针状结晶，mp. 166℃。
9.Iso-Sativan：异名2′-羟基-7，4′-二甲氧基异黄烷。分子式C17H18O4，分子量286。无色棱柱状结晶，mp.154℃(氯仿-正己烷)。
10.Iso-Mucromatol：分子式C17H18O5，分子量302。无色棱柱状结晶，mp.151℃～152℃(氯仿-正己烷)。
11.Pendulone：异名7-羟基-3′，4′-二甲氧基异黄烷醌。分子式C17H16O6，分子量316。桔红色棱柱状结晶，mp.154～156℃(氯仿-正己烷)。
12.Vestitol：异名7，2′-二羟基-4′-甲氧基异黄烷。分子式C16H16O4，分子式272。无色棱柱状结晶，mp.158℃～160℃(苯-正己烷)。
13.野靛黄素(Pseudobaptigenin)：异名7-羟基-3′，4′-亚甲基二氧异黄烷。分子式 C16H10O5，分子量282。无色针状结晶，mp.>260℃(二氯甲烷-甲醇)。
14.美皂异黄酮(Biochanin)：异名5，7-二羟基-4′-甲氧基异黄酮。分子式C16H12O5，分子量284。无色片状结晶，mp.216℃～218℃(丙酮-正己烷)。
15.染料木素(Genistein)：异名染料木因、金雀异黄素、Prunetol，Genisteol.分子式C15H10O5，分子量270。长方形或六边形棒状结晶(60%乙醇);树枝状结晶(乙醚)。mp.297℃～298℃(略微分解)。溶于常用有机溶剂，几乎不溶于水。溶于稀碱显黄色。

图2为结构式 1.对心血管系统的影响
鸡血藤具有抑制心脏和降低血压作用。给麻醉家兔0.43～0.5g (生药)/kg煎剂和犬0.3g (生药)/kg煎剂均可引起血压下降，但对离体兔耳及蟾蜍血管却呈收缩作用。用鸡血藤提取剂及部分精制组分 (主要含有鞣酸成分) 静脉内给药有明显的降压作用而且持续时间较长，这种作用对肾上腺素的升压有某种程度的抑制，溴化六烃季胺、阿托品则不能抑制这种作用。鸡血藤还有降低血脂、抗动脉粥样硬化作用。鸡血藤乙醇提取物对电压依赖性Ca2+通道和受体依赖性Ca2+通道有明显的抑制作用，此作用可能与其降压、抗心律失常以及抗血小板聚集有关，提示鸡血藤乙醇提取物扩血管的作用机理可能与细胞膜上的电压依赖性Ca2+ 通道或受体操纵性Ca2+通道的抑制有关。
2.对免疫系统的影响
鸡血藤水煎液两种浓度 (0.25g/ml和1g/ml) 均能明显提高小鼠淋巴因子活化杀伤细胞 (LAK细胞) 的活性，高剂量组对小鼠自然杀伤细胞 (NK细胞) 的活性也有明显的提高作用，而低剂量组无作用。鸡血藤对小鼠T淋巴细胞增殖功能和IL-22活性均有不同程度的抑制作用。鸡血藤水煎剂对正常鼠脾脏淋巴细胞产生IL-22有轻微的促进作用，对CY免疫抑制模型组的IL-22降低有提高作用，而对硫唑嘌呤 (AZP) 免疫超常模型组IL-22 增多则呈现抑制作用。鸡血藤对异常免疫功能显示了明显的双向调节作用。鸡血藤水煎醇提液提高正常小鼠和荷瘤小鼠 (S180) NK和LAK细胞活性，抑制腹腔巨噬细胞活性。
3.抗氧化作用
利用DPPH法研究鸡血藤的抗氧化活性，并以抑制率来表示。当鸡血藤浓度为5mg/ml时抑制率为94.9%，将提取液稀释5倍即浓度为1mg/ml时抑制率为94.8%，说明鸡血藤有强的抗氧化能力。鸡血藤醇提物可抑制Fe2++抗坏血酸诱导的大鼠心、肝、肾MDA生成，抑制酵母多糖A刺激中性白细胞生成超氧阴离子自由基 (O-2)，抑制H2O2诱发红细胞氧化溶血，结果说明鸡血藤醇提物是通过清除·OH、O-2、H2O2而发挥抗氧化作用。
4.抗病毒、抗炎作用
鸡血藤提取物对单纯疱疹病毒有强的作用，其50%细胞病变抑制浓度 (CPIE50)、50%细胞致死浓度 (CLE50) 和50%酶活性抑制浓度 (IC50) 分别为46.0、630、0.2g/ml，选择毒性指数 (ST) 为13.7。鸡血藤水提物的聚酰胺柱层析成分具有极强的抑制HIV-RT(HIV 逆转录酶) 活性作用，其活性强于阳性对照物3′-叠氮基-3′-脱氧胸腺嘧啶磷酸三酯 (AZTTP)。当浓度为2g/ml时，可完全抑制HIV-RT的活性。鸡血藤茎皮中分离出6个查耳酮衍生物 (1、2、4、6、7、10，其中1、4、7、10为新成分) 和5个已知黄酮 (3、5、8、9、11)。查耳酮成分1、10显示中度的抗NCI-H460细胞毒性作用，后者的活性为前者的2倍; 二氢查耳酮成分4、6显示中度的抗单纯疱疹病毒活性; 抗炎试验中检查了成分1、2、5、7、8、10、11对 COX-1和COX-2的抑制活性，仅黄酮成分8活性显著，其对COX-2的抑制作用强于对COX-1 的作用。
5.对血液系统的影响
鸡血藤传统用于补血，但放血致贫血家兔以20%鸡血藤煎剂2g/kg灌胃10天，取血检查外周红细胞数、血红蛋白量的恢复速度以及放血后贫血所达最低水平，与对照组比较均无明显差异。对环磷酰胺 (CY) 所造成的小鼠骨髓损伤模型，鸡血藤水提液能明显恢复小鼠骨髓的造血组织容量、血窦容量及巨核细胞数，并抑制脂肪组织容量的增加。小鼠全身用60Coγ射线照射加腹腔注射0.6%盐酸苯肼造成骨髓抑制、溶血性贫血动物模型，鸡血藤能促进模型组小鼠的骨髓有核细胞 (BMC) 回升或使抑制程度减轻，使骨髓粒细胞分裂指数增加，并对小鼠的粒单系祖细胞 (CFU-GM) 增殖也显示出明显的刺激作用。因此，推测鸡血藤可能通过多途径激活造血系统，调节CFU-GM增殖，刺激骨髓粒单系造血，使外周血白细胞升高。对于用腹腔注射盐酸苯肼和60Coγ射线照射的方法复制的小鼠骨髓抑制性贫血模型，鸡血藤可升高动物的红细胞、血红蛋白、红细胞容积和红细胞分裂指数，并对早期红系祖细胞和晚期造血红系祖细胞的增殖有明显的刺激作用。鸡血藤能显著促进乙酰苯肼、CY所致的溶血性贫血和失血性贫血小鼠的促红细胞生成素 (EPO) 的产生，拮抗CY和乙酰苯肼的细胞毒性，提示鸡血藤对红系细胞的作用机理可能和促进T淋巴细胞分泌EPO样生长因子或增强EPO样生长因子活性有关，通过促进机体红细胞生成素分泌、成熟和释放，补充破坏和死亡的红细胞，维持红细胞的相对稳定而发挥补血作用。鸡血藤不仅能直接促进正常或骨髓抑制溶血性贫血小鼠的骨髓有核细胞的增殖，而且经灌胃鸡血藤后诱导制备的脾细胞条件培养液、肺条件培养液、腹腔巨噬细胞培养液、骨骼肌条件培养液分泌的CSFs对正常贫血小鼠的骨髓有核细胞的增殖均有显著促进作用。鸡血藤单体成分SSB可显著刺激骨髓抑制小鼠CFU-GM、红系祖细胞 (CFU-E、BFU-E) 和巨核系祖细胞 (CFU-Meg) 的生长，并随时间延长、剂量增加，刺激作用逐渐加强。鸡血藤可刺激小鼠骨髓细胞增殖，并能提高IL-1，IL-2，IL-3的分泌能力，但对脾细胞增殖没有明显影响。鸡血藤水煎剂对CY引起的骨髓嗜多红细胞微核率的上升表现出极强的抑制作用，并显著抑制外周血白细胞、红细胞和血红蛋白的降低。
6.其他作
用 鸡血藤的乙醇提取物对酪氨酸酶有激活作用，而且其既能促进底物与酶的活性中心的结合，促进黑素产生，又能提高酶的活性，对酪氨酸酶具有混合性激活作用。鸡血藤醇提物对衰老小鼠一氧化氮合酶活力有显著升高作用。给小鼠注射P32后，测组织之总P32相对比放射性，表明鸡血藤对小鼠肾总磷代谢有促进作用。还可促进小鼠子宫24小时总磷代谢。
图3为密花豆藤中异黄酮类化学成分的提取分离 性状鉴别
藤茎呈圆柱形或扁圆柱形，长短不一，稍弯曲，直径2～7cm。表面灰棕色至暗棕色，有明显的纵沟及小点状皮孔，栓皮脱落处呈红棕色。质坚硬，难折断。药材多切成长圆形的片，切面木质部淡棕色或棕色，管孔多数，韧皮部有黑棕色或红棕色的树脂状分泌物，与木质部相间排列呈3～10个偏心性半圆形或圆形环。髓小，偏于一侧。气微，味涩。以树脂状分泌物多者为佳。
显微鉴别
茎的横切面 木栓细胞为数列细胞，内含棕红色物。皮层较窄，散有石细胞群，细胞内充满棕红色物。薄壁细胞含草酸钙方晶。维管束异型，由韧皮部与木质部相间排列成数轮。韧皮部最外侧为石细胞群与纤维束组成的厚壁细胞层; 射线多挤压，分泌细胞甚多，充满棕红色物，常数个至10多个切向排列成层; 纤维束较多，非木质化或微木质化，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，含晶细胞壁木质化增厚; 石细胞散在。木质部射线有时含棕红色物，导管多单个散在，类圆形，直径约至400μm; 木纤维束亦均形成晶纤维，木薄壁细胞少数含棕红色物。
粉末 棕红色。①石细胞多成群，淡黄色或黄棕色，呈长方形、类圆形、类三角形或类方形，直径14～75μm，壁厚3～23μm。壁厚者层纹明显，有的胞腔内含红棕色物，有的壁稍厚者含草酸钙结晶。②纤维多成束，红棕色或黄棕色，纤维细长，直径7～20μm，壁厚3～8μm，非木质化或木质化，有的纵向裂开，有的末端裂成数条，孔沟及胞腔多不明显。纤维束与含草酸钙方晶的薄壁细胞形成晶纤维，含晶细胞的壁甚厚，木质化。③草酸钙方晶多存在于石细胞或含晶厚壁细胞中。呈方晶、类双锥形或不规则形，直径5～11μm，长8～25μm。④分泌细胞常与韧皮射线垂直排列，细胞界限不明显。胞腔内含黄棕色或红棕色物。⑤色素块散在，红棕色或黄棕色。
理化鉴别
①取样品粉末适量，用石油醚(60～90 ℃)回流提取8小时，药渣挥去石油醚，继用乙酸乙酯回流提取，提取液回收溶剂至浸膏状，加适量95%乙醇溶解，点于硅胶板上，以刺芒柄花素为对照，以氯仿-甲醇(7：1)为展开剂，展开12cm，置紫外灯下观察，异黄酮类成分显绿色或蓝色荧光。②取样品粉末1g，加正己烷40ml，水浴回流提取4小时，提取液蒸干，加1ml氯仿使溶解，点于硅胶60F254薄层板上，以氯仿-乙酸乙酯(9：1)为展开剂，展开17cm，置紫外灯下观察，木脂素类成分显暗色斑点。
紫外光谱鉴别
取样品粉末0.2g，精密称定，置50ml容量瓶中，加50%乙醇20ml，充分振摇后浸渍 10min，加50%乙醇至刻度，再振摇充分混匀，浸渍20min后过滤，弃去初滤液，取续滤液 0.6ml，加50%乙醇稀释至10ml，测定其紫外光谱。结果鸡血藤在279±1nm波长处有最大吸收，吸收度不得低于0.45。

图4为鸡血藤及其混伪品的紫外光谱图
1.鸡血藤 2.山鸡血藤 3.常春油麻藤 静脉注射鸡血藤水提醇沉制剂2g/kg，实验两犬均迅速死亡，说明注射给药有一定毒性。丹参和鸡血藤配伍后制成的注射液注射则死亡率为20%，提示丹参配伍可降低鸡血藤的毒性。 味苦、微甘，性温。归肝、肾经。 活血舒筋，养血调经。主治手足麻木，肢体瘫痪，风湿痹痛，妇女月经不调，痛经，闭经。