人乳腺癌组织源细胞提取物的应用

背景^[1-6]

人乳腺癌组织源细胞提取物是从人原代乳腺癌组织源细胞提取的，人原代乳腺癌组织源细胞从人乳腺癌组织制备。人乳腺癌组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。人乳腺癌组织源细胞提取物可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

乳腺癌是一种严重影响女性健康甚至危及生命的恶性肿瘤之一，其发生发展不仅是肿瘤细胞本身的作用，而且与肿瘤微环境密切相关。乳腺癌作为女性最常见的恶性肿瘤之一，是发生在乳腺上皮组织的恶性肿瘤。发病常与遗传相关。乳腺癌细胞具有高度的异型性，细胞形态及大小不等。

乳腺并不是维持人体生命活动的重要器官，原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性，细胞之间连接松散，容易脱落。

癌细胞一旦脱落，游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身，形成转移，危及生命。目前乳腺癌已成为威胁女性身心健康的常见肿瘤。乳腺癌的病因尚未完全清楚，研究发现乳腺癌的发病存在一定的规律性，具有乳腺癌高危因素的女性容易患乳腺癌。所谓高危因素是指与乳腺癌发病有关的各种危险因素，而大多数乳腺癌患者都具有的危险因素就称为乳腺癌的高危因素。

应用^[7][8]

人乳腺癌组织源细胞提取物可用于研究红花多糖抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖及对其转移能力的影响：

乳腺癌组织中nm23-H1、c-erbB2和MMP-9蛋白表达及其与相关指标和转移的关系；研究红花多糖(SPS)、表阿霉素(EPI)对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响,观察凋亡和转移相关基因BAX、Bcl-2、MMP-9、nm23-H1mRNA和蛋白表达变化,通过Transwell小室法证实红花多糖、表阿霉素对乳腺癌细胞转移能力的影响,并进行对比及统计学分析,明确中药红花多糖与化疗药物表阿霉素对乳腺癌细胞作用的区别,探讨红花多糖抗MCF-7细胞作用及规律。方法：

1.随机抽取乳腺癌组织标本120例,正常乳腺组织标本77例。采用免疫组化SP法检测乳腺癌组织及正常乳腺组织中nm23-H1、C-erbB2和MMP-9的表达情况,结合临床病理资料,分析三者表达与年龄、临床分期、淋巴结转移等临床病理特征的关系。

2.MTT比色法观察不同浓度的红花多糖、表阿霉素对人乳腺癌MCF-7细胞体外增殖的抑制作用,并通过流式细胞仪(FCM)分析细胞凋亡。

3.Real-time PCR检测不同浓度红花多糖、表阿霉素作用于乳腺癌MCF-7细胞后BAX、Bcl-2、MMP-9、nm23-H1mRNA表达水平；western blot检测不同浓度红花多糖、表阿霉素作用于乳腺癌MCF-7细胞后BAX、Bcl-2、MMP-9、nm23-H1蛋白表达水平。

4.Transwell小室法研究不同浓度红花多糖、表阿霉素对乳腺癌细胞MCF-7转移能力的影响。nm23-H1、c-erbB2和MMP-9在乳腺癌组织中均显著表达；三者中仅C-erbB2蛋白表达与患者年龄有关；nm23-H1蛋白在早期、无淋巴结转移及远处转移的乳腺癌中呈高表达,而c-erbB2和MMP-9则在晚期、有淋巴结转移及远处转移的乳腺癌中呈现高表达。

参考文献

[1]Bcl-2 Inhibitors:Emerging Drugs in Cancer Therapy[J].C.Bodur,H.Basaga.Current Medicinal Chemistry.2012(12)

[2]Drugs Interfering with Apoptosis in Breast Cancer[J].Daniela Grimm,Markus Wehland,Jessica Pietsch,Manfred Infanger,Johann Bauer.Current Pharmaceutical Design.2011(3)

[3]Glioblastoma cells deficient in DNA‐dependent protein kinase are resistant to cell death[J].George G.Chen,Fanny L.F.Sin,Billy C.S.Leung,Ho K.Ng,Wai S.Poon.J.Cell.Physiol..2005(1)

[4]Prognostic significance of p53,bcl-2,and Bax expression in early breast cancer[J].Ayman Linjawi,Maria Kontogiannea,Fawaz Halwani,Michael Edwardes,Sarkis Meterissian.Journal of the American College of Surgeons.2004(1)

[5]Apoptosis and expression of BCL-2 and BAX in cyclosporine-induced experimental renal fibrosis[J].S Rawat,C Gray,T.S Johnson,A.T Raftery,A.M El Nahas,J Haylor.Transplantation Proceedings.2003(1)

[6]Antisense Bcl-2 and HER-2 oligonucleotide treatment of breast cancercells enhances their sensitivity to anticancer drugs[J].Kazuaki Tanabe,Ryungsa Kim,Hideki Inoue,Manabu Emi,Yoko Uchida,Tetsuya Toge.International Journal of Oncology.2003(4)

[7]Apoptosis modulatory activities of transiently expressed Bcl-2:Roles in cytochrome c release and Bax regulation[J].Q.Hou,E.Cymbalyuk,S.-C.Hsu,M.Xu,Y.-T.Hsu.APOPTOSIS.2003(6)

[8]陶冀.红花多糖抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖及对其转移能力的影响[D].黑龙江中医药大学,2012.