circRNA定量PCR检测服务

背景^[1-6]

circRNA定量PCR检测服务是用染料法或Taqman探针法对circRNA进行Real Time PCR定量测定，技术灵敏度高、线性范围宽、特异性好、重复性佳。同时，可根据客户需求及实验需要为客户提供一体化circRNA荧光定量技术服务，客户只需要提供保存完好的组织或细胞样本，完成circRNA荧光定量PCR实验操作和数据分析，提供完整的实验报告，可与节省大量的时间和精力。

环状RNA（circRNA）是目前生命科学领域新兴的研究热点分子之一。与传统的线型RNA不同，环状RNA分子呈封闭环状结构，不受RNA外切酶影响，表达更稳定，不易降解。环状RNA由特殊的选择性剪切产生，大量存在于真核细胞的细胞质中，具有一定的组织、时序和疾病特异性。环状RNA的这些特征都表明，这种分子有巨大潜力成为新的疾病诊断标志物。这使得环状RNA在作为新型临床诊断标记物的开发应用上具有明显优势。环状RNA（circular RNA，circRNA）是最近发现的一类特殊的非编码RNA，它大量存在于真核细胞胞质内，主要由pre-mRNA通过可变剪切加工产生。

近年研究发现，circRNA具有很多重要的调控功能，例如，环状RNA分子富含miRNA结合位点，可以作为竞争性内源RNA（competing endogenous RNA，ceRNA）结合胞内miRNA，在细胞中起到miRNA海绵的作用，能阻断或降低miRNA对靶基因的抑制作用，从而促进靶基因的表达；这一作用机制被称为竞争性内源RNA机制。2013年在同一期《自然》杂志上，科学家证明了环状RNA分子具有的miRNA海绵效应。

除此以外，circRNA也具有调控其他类型RNA、调节蛋白质活性等功能。circRNA在不同物种中具有保守性，而且存在组织表达差异，且circRNA的环状结构对RNase不敏感，导致它比线性RNA更为稳定，这些特性使得circRNA具有开发疾病新型诊断与治疗方法的巨大潜力，研究意义重大。

应用^[7][8]

circRNA定量PCR检测服务可作为类风湿关节炎合并冠心病生物标志物的筛选、验证及临床应用研究中：

circRNA是一类由mRNA 3’和5’末端首尾相连形成的无蛋白编码功能的RNA分子,主要由前体RNA(pre-mRNA)通过可变剪切加工产生,circRNA广泛存在于所有真核生物中,并且非常稳定,其主要有3个功能,包括:充当miRNA“海绵”(circRNA通过吸附miRNA来抑制其功能)、调节转录或剪接、与RNA结合蛋白相互作用。最新的研究表明circRNA在疾病的发生和发展过程中发挥着十分重要的作用,其具有独特的闭合环状结构,使得其对核酸酶不敏感,比线性RNA更为稳定,在人类疾病可作为新的潜在介质和临床诊断标志物。

circRNA通过直接或间接影响miRNA表达,导致mRNA和蛋白质表达失调,也可以直接影响蛋白质表达。一些研究显示:circRNA在肿瘤、糖尿病、神经系统疾病、自身免疫性疾病和动脉粥样硬化等疾病的发生过程中起到非常重要的作用。利用基因芯片技术,对来自不同细胞系和组织中的circ RNA表达谱数据进行聚类分析,能够鉴定出在一些特定组织和细胞中特异性表达的circRNA。

目前,科学家们己成功将circ RNA芯片应用于肺组织、大脑组织、胃癌、结肠癌、肝癌、胰腺癌、细胞等的研究,找到相应circRNA特异性表达,并且circRNA在监测癌症手术后的复发方面己取得一些成果。因此,circRNA的表达变化与许多疾病的发生、发展密切相关,可能成为多种疾病无创诊断的高特异性和高敏感性标志物。近年来的流行病学资料提示:与普通人群相比,心血管疾病,尤其冠心病(coronary heart disease,CHD)在RA患者中的发生率明显升高,增加近50%～60%。

对于病史超过10年的RA患者心肌梗死发病率增加3.1倍,提示CHD可能是RA的严重并发症之一。RA是心血管疾病的一种独立危险因素,然而长期以来,RA并发CHD尚未引起临床足够重视,RA患者的寿命明显缩短。有关RA和心血管疾病之间确切的发病机制仍不清楚,需要更多的医学研究来提高我们对这方面问题的认识。

增强对RA患者并发心血管疾病的警惕,及早对RA患者进行心血管疾病的筛查,降低其心血管疾病发生率,提高RA患者生存周期,已成为一项重要课题,需要进一步探索研究。寻求一种血浆标志物能够准确有效地预测和及早发现RA患者的CHD发生风险,在预防RA并发CHD的发生、发展方面,具有重要的临床价值和现实意义。

参考文献

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[7]A novel gene,AF1q,fused to MLL in t(1;11)(q21;q23),is specifically expressed in leukemic and immature hematopoietic cells.Tse W,Zhu W,Chen H S,Cohen A.Blood.1995

[8]潘丽.血浆circRNA作为类风湿关节炎合并冠心病生物标志物的筛选、验证及临床应用研究[D].南方医科大学,2018.