SRT 1720(SIRT1激活剂)

背景^[1-6]

SRT 1720(SIRT1激活剂)是一种选择性的SIRT1激活剂，无细胞试验中EC50为0.16μM，对SIRT2和SIRT3的作用弱230倍以上。SRT1720抗最近的乙酰化酶同系物SIRT2(EC1.5为37μM)和SIRT3(EC1.5>300μM)的激活率达781%。SRT1720在氨基末端催化区的变构位点结合到SIRT1酶-肽底物复合物上，降低乙酰化底物的米氏常数值。

用SRT1720处理一周后，饲喂的葡萄糖水平降低，处理三周后，饲喂的葡萄糖水平进一步降低，持续处理10周。Rosiglitazone激活PPARγ，已经用于治疗II型糖尿病；而与Rosiglitazone相比，在进行腹膜葡糖糖耐量试验时，用SRT1720处理导致葡萄糖明显降低。SRT1720对用无糖食物喂养的鼠没有作用效果，显示出药理学SIRT1的激活不会产生低血糖。

与Rosiglitazone相似，用SRT1720处理4周，明显降低高胰岛素血症，使升高的胰岛素水平恢部分复正常SRT1720处理腓肠肌，通过测定柠檬酸合酶活性发现线粒体各项能力上升15%。高浓度SRT1720(15μM)诱导正常细胞活力轻微下降，约10-20%。SRT1720明显抑制VEGF依赖的MM细胞迁移。在DIO鼠中实施摄热量限制包括改善胰岛素敏感性，使葡萄糖和胰岛素水平维持正常，及提高线粒体能力后，可观察到SRT1720模拟一些功能。

此外，在饮食导致的肥胖和遗传肥胖鼠中，SRT1720提高胰岛素敏感性，降低血浆葡萄糖，及提高线粒体能力。因此，SRT1720是有前途的新型治疗剂，可用于治疗像II型糖尿病之类的疾病。与提高的葡萄糖耐量相一致,在SRT1720处理的fa/fa鼠中，维持血糖正常所需的葡萄糖注入率(GIR)大约为35%,全部的葡萄糖处理效率提高大约为20%。SRT1720作用于动物肿瘤模型研究时，抑制多发性骨髓瘤生长。

SRT1720提高Bortezomib或Dexamethasone的毒性。SRT1720是一种小分子化合物，具有在体外激活sirtuin亚型SIRT1的能力。SRT1720作为SIRT1激活剂的活性强于白藜芦醇。它以Sirt1-和PGC-1α依赖性方式影响线粒体呼吸。已证明SRT1720可增强胰岛素敏感性并改善线粒体能力和氧化代谢的测量。用SRT1720处理多发性骨髓瘤（MM）细胞抑制了对常规和硼替佐米治疗有抗性的MM细胞的生长和诱导细胞凋亡，而不显着影响正常细胞的活力。SRT1720能够增强硼替佐米或地塞米松的细胞毒活性。

应用^[7][8]

SRT 1720(SIRT1激活剂)可用于细胞增殖、凋亡及细胞周期的研究：

沉默信息调节因子2-相关酶类-1(silent mating-type information regulation 2 homologue 1,SIRT1)的激动剂SRT1720在体外对THP-1细胞(急性单核细胞白血病细胞株)增殖、凋亡及细胞周期的影响,探讨SIRT1在急性单核细胞白血病的作用及可能的分子机制,从而为阐明SIRT1在急性单核细胞白血病的诊断、治疗中的潜在价值提供理论依据。

SIRT1激动剂SRT1720刺激THP-1细胞取对数生长期急性单核细胞白血病THP-1细胞,于实验第1天分别加入SRT1720使终浓度分别为1μM、2μM、3μM、4μM、5μM、6μM,阴性对照组加等体积的二甲基亚砜(DMSO),未用药物处理的细胞为空白对照组,摸索SRT1720的有效作用浓度。细胞凋亡检测SRT1720作用THP-1细胞48 h后收集细胞,加入凋亡检测试剂膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC,FITC)及碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)避光孵育后用流式细胞仪检测。

细胞周期检测SRT1720作用THP-1细胞48 h后收集细胞,并制备单细胞悬液,用70%冰乙醇固定,加核糖核酸酶A(RNase A)水浴后再加细胞周期检测试剂PI,避光孵育后用流式细胞仪检测。

结果1、2～6μMSRT1720组THP-1细胞皱缩、变形,大小不均,细胞核皱缩,有颗粒状物质及空泡,细胞数减少,碎片增多,SRT1720浓度越高,时间越长,THP-1细胞形态改变越明显。2、2～6μM SRT1720组THP-1细胞第4天增殖指数明显下降(p<0.05),SRT1720浓度越高,增殖指数下降越明显。3、2～6μM SRT1720组THP-1细胞48h的凋亡率明显升高(p<0.05),SRT1720浓度越高,凋亡率升高越明显。4、3～6μM SRT1720组S期及G2/M期的THP-1细胞48 h百分比明显增加(p<0.05),SRT1720浓度越高,S期及G2/M期细胞百分比增加越明显。

结论1、SRT1720能抑制THP-1细胞的生长,作用呈浓度及时间依赖性。2、SIRT1可能在急性单核细胞白血病中发挥抑癌作用,可能通过抑制增殖、促进凋亡及阻滞细胞于S期、G2/M期实现。

参考文献

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