REC IL-7 (MURINE)的应用

背景^[1-3]

REC IL-7(MURINE)是一种通过基因重组技术生产的、与小鼠自然产生的IL-7具有相同氨基酸序列的蛋白质。IL-7是一种重要的细胞因子，对于淋巴细胞的生成、增殖、分化和存活都起着至关重要的作用。IL-7(Mouse)在免疫系统中起着重要的作用，特别是在T细胞的发育和成熟过程中。它可以促进T细胞的增殖和分化，并参与调节T细胞的功能。此外，IL-7(Mouse)还可以促进B细胞的增殖和分化，并参与调节B细胞的功能。

IL-7(Mouse)在肿瘤免疫治疗中也有一定的应用前景。研究表明，IL-7(Mouse)可以增强肿瘤特异性T细胞的活性，并促进其对肿瘤细胞的攻击。因此，IL-7(Mouse)可能成为一种有效的肿瘤免疫治疗靶点。

REC IL-7(MURINE)

小鼠重组IL-7的制备通常涉及以下几个步骤：

1.基因克隆：从小鼠细胞中提取IL-7的基因序列，并将其克隆到适当的表达载体中。

2.表达与纯化：将包含IL-7基因的表达载体导入到宿主细胞（如大肠杆菌、酵母或哺乳动物细胞）中，通过培养这些细胞使IL-7基因表达并产生重组蛋白。随后，通过一系列的纯化步骤，从细胞培养液中分离并纯化出重组IL-7。

3.活性测定：对纯化后的重组IL-7进行生物活性测定，以确保其能够正常发挥功能。

小鼠重组IL-7在生物医学研究中具有广泛的应用，例如：

研究免疫系统：用于研究IL-7在淋巴细胞发育、增殖和存活中的作用，以及与其他细胞因子的相互作用。

治疗免疫缺陷：在某些情况下，小鼠重组IL-7可用于治疗由免疫缺陷引起的疾病，如严重联合免疫缺陷（SCID）等。

疫苗研发：在疫苗研发过程中，小鼠重组IL-7可用于增强疫苗的免疫效果，提高疫苗的保护力。

应用^[4][5]

REC IL-7(MURINE)可以用于IL-7促进老龄小鼠T细胞免疫记忆及胸腺T细胞发育的机制研究

通过改善老年人的中央型记忆T细胞(Central memory T cell,TCM),进而提高老年人对亚单位疫苗的免疫效果。白细胞介素7(Interleukin 7,IL-7)具有促进胸腺细胞、初始T细胞和记忆T细胞增殖和维持记忆T细胞存活的作用,推测其可以促进结核亚单位疫苗在老年人体内产生长期免疫应答。因此,本研究利用老龄小鼠模型,探讨IL-7辅助结核亚单位疫苗促进老龄个体产生长期免疫记忆并探索其机制。细胞因子和转录因子在中央型记忆T细胞(Central memory T cell,TCM)的产生和维持中发挥重要作用。其中,转录因子Id3、Bcl6和Bach2促进记忆T细胞形成,Blimp1促进效应T细胞终末分化。为了进一步研究IL-7对免疫记忆的调控机制,我们利用6-8周龄小鼠模型,探讨REC IL-7(MURINE)对免疫记忆分化相关转录因子的调控机制。年龄增长导致的胸腺逐渐萎缩最终导致胸腺输出的初始T细胞减少,外周初始T细胞的减少使得接种疫苗后活化的T细胞减少,疫苗的效力下降。年龄增长也会引起DNA甲基化的显著变化,其中,DNA甲基化水平通常随着年龄的增长而显著上升,启动子区发生DNA甲基化修饰会促使基因的转录抑制或表达。为了进一步研究IL-7对老龄小鼠中枢免疫系统中胸腺细胞发育的影响,我们采用老龄小鼠模型,探讨IL-7对胸腺细胞不同发育阶段的影响,并从表观遗传修饰角度探索其机制。

IL-7促进老龄小鼠结核亚单位疫苗免疫产生长期免疫记忆目的:研究IL-7辅助结核亚单位疫苗促进老龄小鼠产生T细胞免疫记忆及其机制。

方法:(1)制备结核亚单位疫苗(MH+LT29)/DP。(2)应用腺相关病毒包装系统构建和包装r AAV-IL-7。(3)免疫方案。(1)6-8周龄小鼠和老龄小鼠(40-42周龄)接种(MH+LT29)/DP。(2)老龄小鼠接种(MH+LT29)/DP+r AAV-IL-7。接种时间为0、2和4周。实验小鼠均为C57BL/6品系小鼠。(4)免疫检测:末次免疫后25周进行免疫检测。此时,主要反映TCM介导的免疫应答。检测内容如下:(1)ELISA检测抗原刺激脾脏淋巴细胞后分泌IL-2、TNF-α和IFN-γ的水平。(2)两次抗原重复刺激后,流式细胞术检测CD4+和CD8+T细胞产生IFN-γ能力,反映最初形成TCM的功能。(3)特异性抗原刺激后,Ed U标记法检测CD4+记忆T细胞的增殖能力。(4)ELISA检测血清中抗原特异性抗体REC IL-7(MURINE)Ig G的水平。以上指标检测主要评价REC IL-7(MURINE)对老龄小鼠免疫记忆的促进作用。

参考文献

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