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T7gp4B蛋白的介绍

发布日期:2019/4/17 17:10:24

背景及概述[1]

噬菌体是寄生在细菌或放线菌内的病毒的总称。体积微小,要借助电子显微镜才能看到。其形态为蝌蚪状、球状、纤维状等。按其形态、核酸类型及不同寄主,给予不同名称,例如T2、T4、T6、T7,沙门氏菌的P22等。在自然条件下,不能感染高等动物和植物。有的侵入细菌后,即可进行营养繁殖,形成子代噬菌体,导致细菌裂解,称为烈性噬菌体。有的侵入细菌后,不行营养繁殖,其内含核酸附着或整合在细菌基因组上,并不损害寄主细胞,而与其基因组同步复制,随着细胞分裂传给子代,称之为温和噬菌体。内含此噬菌体的菌称为溶源性细菌,此菌内的噬菌体核酸称为原噬菌体。在发酵工业中,时常发生噬菌体污染,例如链霉素产生菌的灰色链霉菌噬菌体,谷氨酸产生菌的谷氨酸棒杆菌噬菌体等,使产量下降,造成巨大经济损失。有些致病菌噬菌体可用于治疗相应疾病。噬菌体亦是分子生物学研究的好材料。

T7gp4蛋白来源于T7噬菌体,是其复制系统的一种核心蛋白,它既具有引发酶的作用也具有解旋酶的活性,主要应用于全基因组扩增(WGA),且在扩增环状全基因组上有非常大的优势,常用于病毒检测。噬菌体T7基因4编码产物T7gp4B蛋白(T7Gene4,gp4),分子量56kD,参与噬菌体的DNA复制。T7gp4B蛋白为T7gp4A蛋白的截短产物,其蛋白N端的缺失导致该蛋白Primase活性缺失,但保留了解旋酶活性。据文献报道该蛋白具有dTTP水解活性,其具有5'-3'解旋酶(helicase)活性。该蛋白为基因工程产物,通过重组表达纯化获得的可溶产物。T7gp4蛋白-20℃可保存3年。

主要参考资料

[1]中国小学教学百科全书·自然卷

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