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ssDNA/RNA环化连接酶的相关研究

发布日期:2019/4/16 13:59:58

背景及概述[1]

连接酶是一种能催化两个不同或相同分子的两端相连接的酶,此反应与ATP分解反应相偶联。对于DNA损伤切除修复最后一步有连接功能的是DNA连接酶。该酶特异地催化两条DNA单链片段相联结,也就是将DNA聚合酶重新合成的DNA补片连接到切除了DNA损伤的缺口的两端。DNA连接酶还在复制和重组等过程中出现断裂时有连接作用。很可能该酶还能对诱变剂(化学断裂剂和电离辐射)所产生的DNA链断裂有直接的连接作用,只要断端是5′-PO4和3′-OH,而且两断端相近又易拉拢。所以DNA连接酶有时能一步完成DNA链断裂的修复。对于DNA双链断裂,则似乎不是由DNA连接酶直接修复,而是先由RecA蛋白质在DNA两断端之间形成细丝使两端对准。

在某种情况下,DNA断裂需要先由外切核酸酶形成一个空源,再由DNA聚合酶合成补片,然后才连接。ssDNA/RNA环化连接酶为热稳定的DNA/RNA连接酶,不依赖于ATP,可催化单链DNA或单链RNA的环化,也可催化其分子间连接,但其对单链DNA的连接效率更高。环化反应中,要求催化底物单链DNA/RNA具有5’-磷酸基团和3’-OH基团。对于大于15nt的单链底物,该酶都能高效的连接。该酶还可催化DNA或RNA分子与预腺苷化的DNA接头之间的连接,另外,在ATP过量的情况下,该酶可使DNA/RNA分子腺苷化。-20℃可保存3年。

主要参考资料

[1] 卫生学大辞典