一种地加瑞克的纯化方法

背景技术

地加瑞克，英文名：Degarelix，其肽序为：Ac-D-2-Nal-D-Phe (4-C1)-D-3-Pal-Ser-4-Aph(L-Hor) -D-4-Aph(Cbm)-Leu-Lys(iPr)-Pro-D-A1a-NH₂。地加瑞克(Degarelix)是一种促性腺激素释放激素(GnRH)受体抑制剂类药物，可逆性抑制垂体GnRH受体来减少促性腺激素释放继而抑制睾酮的释放。通过抑制对前列腺癌持续生长至关重要的睾酮来延缓前列腺癌的生长和恶化。其由Ferring(辉凌)公司研制开发,经美国食品药品管理局(FDA) 批准，于2008年12月24日在美国上市,商品名为Firmagon。

目前关于地加瑞克的合成方法种类较多,但由于地加瑞克的肽序中含有7个非天然氨基酸,且所述氨基酸均为疏水性氨基酸,所得地加瑞克粗品中副产物和粗肽杂质均比较多,对分离纯化的工艺要求非常高。当前,公开的文献中对地加瑞克粗品的分离纯化工艺记载较少,且多以重结晶的形式进行分离纯化,对此,本发明希望提供一种新的地加瑞克提纯方法。

纯化方法

一、溶解：将通过固相合成得到的地加瑞克粗肽溶解于乙酸水溶液、乙腈水溶液或乙醇水溶液；

二、第一次纯化：取八烷基键合硅胶作为色谱柱填料，流动相分为A1相和B1相，对步骤一中所得溶液进行梯度洗脱，收集一纯合格馏分，取乙酸水溶液、乙腈水溶液或乙醇水溶液对一纯合格馏分稀释一倍体积以上，得到一纯稀释馏分；其中，A1相为乙酸水溶液，所述B1相为制备级乙腈；

三、第二次纯化：取十八烷基键合硅胶作为色谱柱填料，流动相分为A2相和B2相，对一纯稀释馏分进行梯度洗脱，收集二纯合格馏分，取乙酸水溶液、乙腈水溶液或乙醇水溶液对二纯合格馏分稀释一倍体积以上，得二纯稀释馏分；其中，所述A2相为三氟乙酸-三乙胺缓冲液，所述B2相为制备级乙腈；

四、第三次纯化：取十八烷基键合硅胶作为色谱柱填料，流动相分为A3相和B3相，对二纯稀释馏分进行梯度洗脱，收集三纯合格馏分，取乙酸水溶液、乙腈水溶液或乙醇水溶液对三纯合格馏分稀释一倍体积以上，得三纯稀释馏分；其中，所述A3相为醋酸铵缓冲液，B3相为制备级乙腈；

五、对三纯稀释馏分进行柱浓缩与减压旋蒸浓缩；

六、将减压浓缩后的肽溶液加入适量叔丁醇水溶液，经过滤后得滤液进行冷冻干燥得到粉末状地加瑞克成品。

参考文献

[1]浙江苏泊尔制药有限公司. 一种地加瑞克的纯化方法:CN202110347073.8[P]. 2022-10-04.