林可霉素的精制

背景及概述

林可霉素(lincomycin，1)，又称林肯霉素，为林肯链霉菌林肯变种(Streptomyces lincolnensis)产生的一种林可胺类碱性抗菌药，目前各国药典收录的均为盐酸林可霉素，是临床应用多年、疗效明显的一种高效广谱类抗菌药，其作用机制与红霉素相似，不必做皮试，对大多数革兰阳性菌和部分革兰阴性菌有效，临床常用于治疗金黄色葡萄球菌、绿色链球菌、肺炎双球菌等引起的感染。

图1 林可霉素的结构式

林可霉素的生物合成

林可霉素A是由丙基脯氨酸和林可酰胺通过酰胺键连接，并以S-腺苷甲硫氨酸为甲基供体对丙基脯氨酸N端和林可酰胺末端巯基甲基化修饰而成。迄今为止，林可霉素生物合成途径已被研究得非常清楚。

林可霉素精制

林可霉素在生物合成过程中会产生结构类似物，提纯难度较大。研究采用盐析重结晶法降低杂质含量，利用大孔吸附树脂除去盐析重结晶法引入的无机盐，筛选出树脂为LX22型大孔吸附树脂。通过9批次试验，精制的盐酸林可霉素杂质含量均低于林可霉素盐酸盐对照品，林可霉素B(精制前含量2．80％～3．50％)未检出。精制收率为75．90％～90．10％，工艺简单可靠，重现性好，适于工业化生产[1]。

实验操作：

取林可霉素盐酸盐，溶于磷酸盐缓冲液1000 ml中，添加氯化钠310g，使水溶液达到饱和状态，林可霉素盐酸盐从水溶液中析出，然后溶解林可霉素盐酸盐湿品。选用树脂A吸附林可霉素，用纯化水洗脱除去氯化钠。用甲醇220 ml解析，减压浓缩至林可霉素效价至(25～35)×104 u／ml。浓缩液用浓盐酸调至pH 2．5～3．5，加入活性炭0．3 g，于45～55℃搅拌保温30～50 min，过滤得到脱色液。向脱色液中加入正丁醇，于60～75℃蒸馏，待馏出晶体时降温至1 5～25℃结晶，结晶液过滤得到湿品。于60～70℃干燥，即得高纯度林可霉素盐酸盐。

参考文献

[1]CN2017114387600