重组小鼠TARC/CCL17

背景^[1][2][3][4]

重组小鼠TARC/CCL17中趋化因子（CC基序）配体17（CCL17）（也称为TARC）是属于CC趋化因子家族的小细胞因子，也称为胸腺和活化调节趋化因子（TARC）。CCL17在胸腺中组成型表达，但仅在植物血凝素刺激的外周血单核细胞中瞬时表达。这种趋化因子特异性结合并诱导T细胞趋化，并通过与趋化因子受体CCR4相互作用引发其作用。CCL17的基因位于16号染色体上在人类中，以及其他称为CCL22和CX3CL1的趋化因子。

CCL17的基因位是聚集在染色体16的q臂上的几个Cys-Cys（CC）细胞因子基因之一。细胞因子是参与免疫调节和炎症过程的分泌蛋白家族。CC细胞因子是以两个相邻半胱氨酸为特征的蛋白质。由该基因编码的细胞因子显示T淋巴细胞的趋化活性，但不显示单核细胞或粒细胞的趋化活性。该基因的产物与趋化因子受体CCR4和CCR8结合。该趋化因子在胸腺中的T细胞发育以及成熟T细胞的运输和活化中起重要作用。

临床应用^[5]

研究血清CCL17水平及CCL17基因单核苷酸多态性与冠心病的相关性CC趋化因子配体17(CCchemokine ligand 17,CCL17)属于CC趋化因子亚家族,AS斑块内的CCL17可以募集炎性细胞,同时抑制具有抗炎作用的调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)的功能,使促炎抗炎反应失衡,斑块扩大且变得不稳定,可能具有促进CAD的作用。

但是人群中CCL17与CAD的关系尚不明确,本研究拟探索人血清CCL17水平及CCL17单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与CAD发病的关系,并对关联分析阳性的SNP位点进行功能分析,以期为今后筛查CAD高危人群及发现新的治疗靶点提供线索。

1.共813例CAD及158例非CAD个体入选本研究,CAD患者血清CCL17水平显著高于非CAD患者,且血清CCL17水平随病情由轻到重具有线性升高的趋势,与代表冠状动脉狭窄程度的Gensini评分(Gensiniscore,GSS)呈正相关关系。

2.选取了CCL17基因的5个标签SNP:rs223895、rs4784805、rs9302690、rs223899及rs223828。

3.共检测了794例CAD及153例非CAD个体标签SNP的基因型,发现rs223899位点的次要等位基因T以及rs223828位点的次要等位基因T是CAD的危险因素,其中rs223828位点的T等位基因与外周血CCL17水平升高相关。

4.TRANSFAC和Jaspar软件分析提示rs223828位点是AP-1的潜在结合位点,其中T等位基因更易与AP-1结合,从而促进CCL17基因的转录表达。

5.双荧光素酶报告基因实验表明包含T等位基因的重组质粒表达的荧光素酶显著高于包含C等位基因的重组质粒,T等位基因可能具有增强转录的特性。

6.EMSA实验表明包含T等位基因的生物素探针与核蛋白中的某一成分的结合能力高于包含C等位基因的探针,Super-shift实验与ChIP实验实验分别在体外和体内水平证明rs223828位点多态性影响了转录因子AP-1的结合。

结论本研究首次发现人血清CCL17水平与CAD发病及严重程度相关,该基因的SNP位点rs223828可能通过影响转录因子AP-1的结合进而影响CCL17的表达,从而影响CAD的易感性。

参考文献

1. Imai T,Yoshida T,Baba M,Nishimura M,Kakizaki M,Yoshie O(1996)."Molecular cloning of a novel T cell-directed CC chemokine expressed in thymus by signal sequence trap using Epstein-Barr virus vector".J.Biol.Chem.271(35):21514–21.doi:10.1074/jbc.271.35.21514.PMID8702936.

2. Imai T,Baba M,Nishimura M,Kakizaki M,Takagi S,Yoshie O(1997)."The T cell-directed CC chemokine TARC is a highly specific biological ligand for CC chemokine receptor 4".J.Biol.Chem.272(23):15036–42.doi:10.1074/jbc.272.23.15036.PMID9169480.

3. Nomiyama H,Imai T,Kusuda J,Miura R,Callen DF,Yoshie O(1997)."Assignment of the human CC chemokine gene TARC(SCYA17)to chromosome 16q13".Genomics.40(1):211–3.doi:10.1006/geno.1996.4552.PMID9070951.

4. Nomiyama H,Imai T,Kusuda J,Miura R,Callen DF,Yoshie O(1998)."Human chemokines fractalkine(SCYD1),MDC(SCYA22)and TARC(SCYA17)are clustered on chromosome 16q13".Cytogenet.Cell Genet.81(1):10–1.doi:10.1159/000015000.PMID9691168.

5.  血清CCL17水平及CCL17基因单核苷酸多态性与冠心病的相关性研究[D].杨杏林.北京协和医学院.2017