LKB1抗体

简介^[1][2]

LKB1基因，又名STK II(serinePthreonine proteinkinase 11)基因，是由Hemminki等在1998年从Peutz Jeghers syndrome(PJS)患者的血细胞中克隆出来的一种基因，PJS是一种常染色体显性遗传疾病，患者不但肠道、胃、胰腺发生恶性肿瘤的可能性增加，而且在乳腺、子宫颈、肺、卵巢、睾丸发生恶性变危险度也增加，初步估计93％的PJS患者平均在43岁时发生恶性 肿瘤。

Lkb1基因定位于人19p13.3带，cDNA全长2158bp，编码区1302bp，有9个外显子，是由433个氨基酸组成的分子量为50KD的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，其N端含有一个核定位信号区和胞浆定位区LKB1的某些磷酸化位点是其发挥抑制细胞生长功能所必须的。现已知LKB1的磷酸化位点有8个：Ser31，Ser325，Thr366和Ser431可被其上游的激酶磷酸化，而Thr185，Thr189，Thr336和Thr402是自磷酸化的位点。

在细胞核中，当一种无激酶活性的伪激酶STRAD与LKB1的激酶催化结构域相结合时，可Ｗ激活并稳定LKB1，被活化的LKB1即可转移至细胞质。在细胞质中，Mo25是一种高度保守的细胞骨架蛋白，与LKB1-STRAD复合体结合进一步増强LKB1的激酶活性，从而使LKB1参与多种细胞活动。细胞质中的LKB1-STRAD-Mo25形成异源H聚体复合物，对稳定LKB1的激酶活性起重要的作用。

LKB1蛋白在早期胚胎组织中表达量较高，随着个体的发育，LKB1蛋整体表达水平下降，集中于上皮、睾丸生精小管、肝脏和胃肠等组织，到成年后，LKB1蛋白主要分布在上皮组织、卵巢滤泡、卵巢黄体、睾丸生精小管、骨骼肌肌细胞W及神经胶质细施等。胎儿的LKB1蛋白表达水平高于成人的相应组织，恶性肿瘤组织中的表达高于相应的正常组织和良性病变组织。

研究表明LKB1基因的突变失活不仅存在于PJS相关性肿瘤中而且在PJS非相关性肿瘤如直肠癌、胃癌、睾丸肿瘤、乳腺癌、胰腺肿瘤、卵巢肿瘤、宫颈癌、黑色素瘤、肺癌中也普遍存在，提示LKB1在这些肿瘤的发生中可能扮演了肿瘤抑制基因的作用。

LKB1抗体(LKB1 antibody)为用人工合成的小鼠LKB1羧基端的一段多肽(aa422-436)进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。LKB1抗体识别的是总LKB1(total LKB1)，可以检测内源性的LKB1。有研究制备了LKB1抗体中的一种，LKB1的Thr336磷酸化抗体，抗原为329-343 位点的15个氨基酸：KDRWRSMTpVVPYLED，用此抗原免疫家兔获得抗血清，先用连有该磷酸化肽段的CH-Sepharose吸附纯化，然后再通过连有非磷酸化肽段 CH-Sepharose进一步纯化。

在不含LKB1的G361细胞中过表达GST-LKB1能够抑 制细胞生长，而LKB1的突变体(T336A)则阻止了LKB1的抑制效果，而其他自我磷酸化位点的突变确没有此效果，说明Thr336位点在LKB1抑制细胞生长中发挥着重要的作用。

主要参考资料

[1] CN200810020487.4 LKB1基因Thr336磷酸化多克隆抗体制备方法及在肿瘤发生中检测的应用

[2] Lkb1基因在小鼠内耳和小脑发育中的功能研究