硫酸软骨素酶2抗体的应用

背景^[1-3]

硫酸软骨素酶2抗体是可以特异性结合硫酸软骨素酶2抗蛋白的一类多克隆抗体，主要用于检测硫酸软骨素酶2的免疫学实验。

软骨素酶广泛存在于人和动物软骨组织中。其药用制剂主要含有硫酸软骨素A和硫酸软骨素C两种异构体，不同品种、年龄等动物的软骨中硫酸软骨素的含量不同。

ABC酶可降解硫酸软骨素A、硫酸软骨素B（硫酸皮肤素）和硫酸软骨素C。此酶通过β消除机理作用于二糖重复单元之间的β1-4糖苷上并将其切断。降解反应的产物为寡糖，主要是不饱和二糖。测定不饱和二糖产物即可对硫酸软骨素定量。

硫酸软骨素酶2抗体结构图

硫酸软骨素(Chondroitin sulfate)大量存在于动物软骨中，商品是从动物组织中提取制备的酸性粘多糖。

硫酸软骨素是糖胺聚糖的一种，由D-葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖以β-1,4-糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的多糖，并在N-乙酰氨基半乳糖的C-4位或C-6位羟基上发生硫酸酯化。

主要分为硫酸软骨素钠盐和硫酸软骨素钙盐等，主要应用于关节炎、滴眼液等。作为治疗关节疾病的药品，常与葡萄糖胺配合使用，具有止痛，促进软骨再生的功效，对改善老年退行性关节炎、风湿性关节炎有一定的效果，可以改善关节问题。

应用^[4][5]

用于软骨素酶ABC促进自体神经移植后轴突再生研究

以大鼠为研究对象，建立自体坐骨神经移植模型，用软骨素酶ABC对移植的神经进行移植前预处理。通过电生理检查和组织学观察研究移植后神经再生的情况，并利用免疫组化技术观察软骨素酶ABC治疗对移植神经内雪旺细胞和基底膜层粘蛋白这两种主要的促再生因素的影响。

方法：1．软骨素酶ABC治疗对移植神经再生的影响30只大鼠随机分为3组，每组10只。A组为空白对照组，B组为赋形剂组，C组为实验组（软骨素酶治疗组）。盐酸氯胺酮注射液腹腔注射麻醉。两侧臀部斜行切口。劈开臀肌，分离股二头肌和半膜半腱肌，暴露并游离各组双侧坐骨神经。在距离梨状肌下缘约8mm处向远端切除右侧坐骨神经5mm，两断端回缩后形成约10mm的间隙以接纳移植神经；切除左侧坐骨神经10mm作为移植神经。

A组：切取左侧坐骨神经10mm直接移植于右侧缺损处。B组：切取左侧坐骨神经10mm，在100μl PBS（赋形剂）溶液中浸泡2h后移植于右侧缺损处。C组：切取左侧坐骨神经10mm，在100μl软骨素酶ABC溶液中（10U／ml）浸泡2h后移植于右侧缺损处。术后8周进行运动神经传导速度测定。电生理检查完毕后切取各组移植神经中段5mm的神经节段。每组各随机选取1个神经节段做透射电镜观察，其余神经节段制成横切片，做神经纤维Palmgren镀银染色，光学显微镜观察再生轴突的密度。

2．软骨素酶ABC治疗对移植神经层粘蛋白／基底膜的影响16只大鼠随机分为2组，每组8只。A组为对照组，B组为实验组。手术方法同上。A组：切取左侧坐骨神经10mm直接移植于右侧缺损处。B组：切取左侧坐骨神经10mm，在100μl软骨素酶ABC溶液中浸泡2h后移植于右侧缺损处。

术后5天取材。切取各组移植神经近段5mm的神经节段制成横切片，用多克隆抗层粘蛋白抗体标记层粘蛋白，观察层粘蛋白免疫反应阳性产物在移植神经内的分布概况。

3．软骨素酶ABC治疗对移植神经雪旺细胞的影响16只大鼠随机分为2组，每组8只。A组为对照组，B组为实验组。手术方法同上。A组：切取左侧坐骨神经10mm直接移植于右侧缺损处。B组：切取左侧坐骨神经10mm，在100μl软骨素酶ASC溶液中浸泡2h后移植于右侧缺损处。

术后14天取材。切取各组移植神经近段5mm的神经节段制成横切片，用多克隆抗S-100蛋白抗体标记雪旺细胞，观察移植神经内S-100免疫反应阳性细胞的密度。

参考文献

[1]Modulation of extracellular matrix components by metalloproteinases and their tissue inhibitors during degeneration and regeneration of rat sural nerve[J].M.A.V.Gantus,L.E.Nasciutti,C.M.Cruz,P.M.Persechini,A.M.B.Martinez.Brain Research.2006(1)

[2]Axon and Schwann Cell Partnership During Nerve Regrowth[J].Yuan Yuan Chen,David McDonald,Chu Cheng,Brooks Magnowski,Jeff Durand,Douglas W Zochodne.Journal of Neuropathology&Experimental Neurology.2005(7)

[3]Differential effects of endogenous brain-derived neurotrophic factor on the survival of axotomized sensory neurons in dorsal root ganglia:A possible role for the p75 neurotrophin receptor[J].X.-F.Zhou,W.-P.Li,F.H.-H.Zhou,J.-H.Zhong,J.-X.Mi,L.L.-Y.Wu,C.J.Xian.Neuroscience.2005(3)

[4]Vimentin-Dependent Spatial Translocation of an Activated MAP Kinase in Injured Nerve[J].Eran Perlson,Shlomit Hanz,Keren Ben-Yaakov,Yael Segal-Ruder,Rony Seger,Mike Fainzilber.Neuron.2005(5)

[5]殷中罡.软骨素酶ABC促进自体神经移植后轴突再生[D].天津医科大学,2007.