N-乙酰-D-半乳糖胺的合成方法

简介

N-乙酰-D-半乳糖胺室温下为白色粉末状固体，其是D-半乳糖的一种N-乙酰化衍生物。N-乙酰-D-半乳糖胺在自然界广泛存在，是许多糖蛋白的重要组成部分。而且Ｎ-乙酰基-Ｄ-半乳糖胺和SBA特异性结合的凝集素均显著抑制大鼠的生长。Liener认为生大豆对大鼠造成的生长抑制作用中Ｎ-乙酰基-Ｄ-半乳糖胺占50％。并且其对大鼠生长的抑制程度随剂量增加而加重[1]。

N-乙酰-D-半乳糖胺的性状

合成方法

方法一：在室温下，将新制备的甲醇钠溶液（0.5N，6mL）加入到2-乙酰氨基-2-脱氧-1,3,4-6-四-O-乙酰基吡喃半乳糖苷（13.2g，33.9mmol）在无水甲醇（25mL）中的搅拌溶液中。当TLC分析显示反应完成时，30分钟后，加入Amberlite-H+以中和溶液混合物。过滤后，减压除去溶剂，得到纯白色固体状的N-乙酰-D-半乳糖胺（α：β=4:1）（7.46 g，33.7 mmol，99%）。产率99%。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ（α异头物）5.32（d，NHCOCH3，J=9.6 Hz），5.12，1.98（s，3H，NHCOCH3）[2]。

方法二：在0°C下，向半乳糖胺（8.19 g，21.0 mmol）的乙酸酐（30 mL）搅拌溶液中加入吡啶（130 mL）。搅拌12小时。在减压下通过与甲苯（3x20mL）共蒸发除去溶剂。将粗残余物从甲醇中重结晶，得到白色固体状标题化合物N-乙酰-D-半乳糖胺（13.3g，34.2mmol，90%）。产率（13.3 g，34.2 mmol，90%）。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ5.68（d，1H，H-1，J1，2=8.8 Hz），5.36-5.32（m，2H，H-4，NH），5.06（dd，1H，H-3，J3,4=3.2 Hz，J3，2=11.2 Hz），4.43（dt，1H，H-2，J2,1=J2，NH=9.2 Hz，J2,3=11.2 Hz 2.11、2.03、2.00、1.92（COCH3）、1.54（NHCOCH3）[3]。

方法三：将牛血清白蛋白（10mg）溶解在pH 7.5的磷酸盐缓冲液（2mL）中。 将酯衍生物溶解在DMF（100μL）中。 将溶液缓慢注入反应介质中。 将反应物在室温下放置一天。 用去离子水稀释混合物。 用5次去离子水（2l）透析混合物。 将溶液溶解，得到白色固体。 在voyager精英系统上执行MALDI质谱测定以获得标题化合物产品N-乙酰-D-半乳糖胺[4]。

参考文献

[1]张利鑫,刘强. 添加N-乙酰-D-半乳糖胺消除大豆凝集素抗营养活性的可行性研究 [J]. 生物技术通报, 2009, (07): 156-159+165.

[2]Dowlut, Meenakshi; et al. Investigation of Nonspecific Effects of Different Dyes in the Screening of Labeled Carbohydrates against Immobilized Proteins. Journal of Organic Chemistry (2005), 70(24), 9809-9813.

[3]Wu, Xiangyang; et al. A New Homobifunctional p-Nitro Phenyl Ester Coupling Reagent for the Preparation of Neoglycoproteins. Organic Letters (2004), 6(24), 4407-4410.

[4]Dasgupta, Falguni; et al. Chemoenzymatic preparation of dermatan sulfate oligosaccharides as arylsulfatase B and α-L-iduronidase substrates.  Glycoconjugate Journal (2001), 17(12), 829-834.