聚糖对氨基苯甲酸(2-AA)荧光标记试剂盒的应用

背景^[1-3]

聚糖对氨基苯甲酸(2-AA)荧光标记试剂盒是一种旨在通过荧光探针对氨基苯甲酸和还原性糖分子的末端羧基碳的结合，进而化学还原而产生的标记糖分子，来识别和定量糖分子成分和丰度的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种寡聚糖的标记制备。产品即到即用，操作简捷，性能稳定，荧光清晰，高度敏感。

聚糖对氨基苯甲酸(2-AA)荧光标记图

聚糖（glycan）是一种缺乏可见光或紫外光吸收特性的生物大分子，因此使用相应的标记分子成为聚糖分子敏感定量检测分析所必需。运用还原性氨基反应化学（amination chemistry），将释放出的聚糖分子游离还原末端，标记上荧光探针，以达到纯化分离、识别和定量的目的。对氨基苯甲酸（2-aminobenzoic acid；2-AA）是一种荧光标记分子，分子量为137.1，具有紫外（315nm波长）吸收性和荧光特性（激发波长320nm，散发波长400nm）。

在标记糖分子中，为非特异性，超敏感（皮摩尔级），确保糖分子结构完整性和稳定性。标记效率可达85%。首先糖分子处于一种还原形态，染料的胺基团与糖分子的羧基碳之间反应，产生亲核性schiff碱配体结构。然后通过化学还原剂进行还原，而获得标记。

应用^[4][5]

用于席夫碱中间体法制备壳聚糖衍生物及其抗菌活性研究

采用席夫碱中间体法制备了两类共四种新型壳聚糖衍生物,一类为羟基取代壳聚糖衍生物,包括对氨基苯甲酸壳聚糖酯（ABCTSE）和O-羧甲基壳聚糖（OCMC）;一类为壳聚糖季铵盐,包括N-对苯甲氧基甲基壳聚糖季铵盐（NM-chitosan）和N-对苯羟基甲基壳聚糖季铵盐（NH-chitosan）。

壳聚糖酯化及羧甲基化产物既具备壳聚糖天然抗菌性,又包含对氨基苯甲酸及羧酸的特性,而壳聚糖季铵化衍生物包含了壳聚糖及季铵盐的抗菌性能。即两类产物兼具壳聚糖的天然生物性能及其取代单体杀菌效率高且易溶于水的优点。

对壳聚糖及其化学改性和食品防腐抗菌剂的发展趋势,研究了四种新型壳聚糖衍生物的合成路线,在保持一定投料比和反应时间条件下,通过单因素变化得到合成温度;

室温下,比较了壳聚糖及其衍生物在水和几种有机溶剂中的溶解性;并对产物作了FT-IR,1H NMR,元素分析和热重分析研究以表征其结构和性能,由元素分析结果根据新推导的取代度计算公式得到壳聚糖衍生物的取代度,同时由氯化碘定量法测得壳聚糖季铵盐的季铵化度,其中对壳聚糖酯还作了13C NMR分析;研究了不同浓度壳聚糖及其衍生物对金黄色葡萄球菌和黑曲霉的抑菌性能,得到抑菌率曲线,分别比较了两种羟基取代壳聚糖衍生物和两种壳聚糖季铵盐的抑菌性;

在保持样品浓度一定的条件下,得到壳聚糖及其衍生物对金黄色葡萄球菌和黑曲霉的生长抑制曲线,并对两类壳聚糖衍生物分别作了比较。

参考文献

[1]Synthesis and properties of photosensitive chitosan derivatives（1）[J].Guiping Ma,Bin Qian,Jianxin Yang,Chunqing Hu,Jun Nie.International Journal of Biological Macromolecules.2010(5)

[2]Synthesis and antimicrobial activity of the Schiff base from chitosan and citral[J].Xiaoxiao Jin,Jiangtao Wang,Jie Bai.Carbohydrate Research.2009(6)

[3]Synthesize and characterization of organic-soluble acylated chitosan[J].Guiping Ma,Dongzhi Yang,John F.Kennedy,Jun Nie.Carbohydrate Polymers.2008(3)

[4]Preparation and characterization of water-soluble N-alkylated chitosan[J].Guiping Ma,Dongzhi Yang,Yingshan Zhou,Ming Xiao,John F.Kennedy,Jun Nie.Carbohydrate Polymers.2008(1)

[5]王河东.席夫碱中间体法制备壳聚糖衍生物及其抗菌活性研究[D].中国海洋大学,2011.