人Β内啡肽(Β-EP)ELISA KIT的应用

背景^[1-3]

人Β内啡肽(Β-EP)ELISA KIT是固相夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。已知Β-EP浓度的标准品，未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Β-EP和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A，B和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Β-EP的浓度呈比例关系。

β-内啡肽是人体中内源性吗啡样物质的一种，与脑啡肽、强啡肽共同组成阿片肽家族。1976年由李卓浩等人从骆驼垂体中分离而发现的一种具有很强的吗啡样活性的物质。1977年从人体的垂体组织中发现。β-内啡肽为由31个氨基酸组成的多肽，相对分子质量为3400。不同种属动物的β-内啡肽化学组成基本相似。

近年来又发现它在体内的分布是广泛的，已在神经系统、内分泌器官、消化道以及胎盘和羊水中均有β-内啡肽及其前体蛋白存在。它具有很强的镇痛效应;能促进生长素、催乳素、生长抑素和胰高血糖素的释放等;应激时β-内啡肽释放增多;可能是某些精神病发病的原因之一;其含量增高可促进脑缺血性脑水肿的形成;有抑制呼吸运动的频率和幅度的作用，并有报道认为它可能是肾脏的一种营养激素;对动物摄食行为有促进作用;与体温调节有关，并可视为免疫反应的生理调节因子，在中枢神经与免疫系统间起着体液传递介质的作用。

应用^[4][5]

用于不同时间脉冲射频对CCI大鼠模型下丘脑β-内啡肽的影响研究

观察不同时间脉冲射频(pulsed Radiofrequency,PRF)作用于慢性坐骨神经压迫损伤(chronic constriction injury of the sciatic nerve.CCI)大鼠模型下丘脑β-内啡肽含量的影响。

方法:200-220gSD雄性大鼠72只,随机分成4组:假PRF治疗组(A0组,n=18),120 s PRF治疗组(A1组,n=18),480 s PRF治疗组(A2组,n=18),720 s PRF治疗组(A3组,n=18)。建模后7d:对PRF组坐骨神经结扎处近端进行PRF干预治疗,脉宽20ms,脉冲频率2Hz,电压55V,治疗持续时间分别为120s,480s,720s;对假PRF治疗组,在PRF治疗组坐骨神经相同位置处只放置射频电极针,但不给于通电治疗。制模前(T0)、制模后7(T1)、PRF后7(T2)、14(T3)和21d(T4)测定大鼠疼痛行为热痛阈(paw thermal withdrawal latency,PWTL)的变化。

PRF治疗后7、14、21d时,每组各时间点分别处死6只大鼠,取下下丘脑,用酶联免疫法测定不同时间点下丘脑中β-内啡肽的浓度,光镜下观察大鼠坐骨神经的组织学变化情况。

结果:与假治疗组比较,PRF组在治疗后第7、14和21d时,痛阈均明显升高(P<0.01);治疗后21时:A3组和A2组明显高于A1组(p<0.05),A3组高于A2组(p<0.05)。PRF治疗组在干预治疗后7、14d时,与假PRF治疗组比较大鼠下丘脑β-内啡肽含量明显升高(P<0.01)。治疗后第14d时:A3组和A2组明显高于A1组(p<0.05)。

参考文献

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[2]Epidermal growth factor receptor–inhibition(EGFR-I)in the treatment of neuropathic pain[J].Kersten C.,Cameron M.G.,Laird B.,Mj?land S..British Journal of Anaesthesia.2015(5)

[3]Novel 10-kHz High-frequency Therapy(HF10 Therapy)Is Superior to Traditional Low-frequency Spinal Cord Stimulation for the Treatment of Chronic Back and Leg Pain:The SENZA-RCT Randomized Controlled Trial[J].Leonardo Kapural,Cong Yu,Matthew W.Doust,Bradford E.Gliner,Ricardo Vallejo,B.Todd Sitzman,Kasra Amirdelfan,Donna M.Morgan,Lora L.Brown,Thomas L.Yearwood,Richard Bundschu,Allen W.Burton,Thomas Yang,Ramsin Benyamin,Abram H.Burgher.Anesthesiology.2015(4)

[4]188 Randomized Controlled Clinical Trial Evaluating the Safety and Effectiveness of 10 kHz High-Frequency and Traditional Low-Frequency Stimulation for the Treatment of Chronic Back and Leg Pain:18-Month Results[J].Leonardo Kapural,Cong Yu,Matthew W.Doust,Bradford E.Gliner,Ricardo Vallejo,B.Todd Sitzman,Kasra Amirdelfan,Donna M.Morgan,Lora L.Brown,Thomas L.Yearwood,Richard Bundschu,Allen Burton,Thomas Yang,Ramsin Benyamin,Abram H.Burgher.Neurosurgery.2015

[5]宋波.不同时间脉冲射频对CCI大鼠模型下丘脑β-内啡肽的影响[D].山西医科大学,2018.