ANTI-CTLA4抗体的应用

背景^[1-3]

ANTI-CTLA4抗体是一类可以特异性结合ANTI-CTLA4的克隆抗体，主要用于检测ANTI-CTLA4的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中ANTI-CTLA4水平。用纯化的ANTI-CTLA4抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入ANTI-CTLA4，再与HRP标记的ANTI-CTLA4抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的ANTI-CTLA4呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中ANTI-CTLA4浓度。

细胞毒性T淋巴细胞抗原4（cytotoxic T-lymphocyte antigen 4,CTLA-4）又名CD152，是由CTLA-4基因编码的一种跨膜蛋白，表达于活化的CD4和CD8 T细胞。CTLA-4和CD28均为免疫球蛋白超家族成员，具有高度同源性，二者与相同的配体B7-2（CD86）和B7-1（CD80）结合。

与CD28功能相反，CTLA-4与其配体B7分子结合后后产生抑制性信号，抑制T细胞激活，是免疫系统一个至关重要的“刹车”。CTLA-4是使肿瘤细胞免受T细胞攻击的一个重要机制。因此阻断CTLA-4的免疫效应可刺激免疫细胞活化，大量增殖，从而诱导或增强抗肿瘤免疫反应。

目前两种靶向CTLA-4的抗体Ipilimumab和Tremelimumab在黑色素瘤、肾癌、前列腺癌、肺癌等的临床研究已广发开展。Ipilimumab是全人源化单抗在肺癌治疗中的Ⅱ/Ⅲ期临床试验也迅速开展。Tremelimumab也是一种人源化CTLA-4单抗，是一种IgG2抗体，目前在多种肿瘤中的临床试验正在进行中。

应用^[4][5]

用于基于FIt3L基因和Anti-CTLA4抗体的抗肿瘤免疫联合治疗的实验研究

T细胞介导的抗肿瘤细胞免疫在机体排斥肿瘤方面起着关键作用，是抗肿瘤免疫治疗最重要的靶点。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4，CTLA-4），是共刺激分子B7的受体，主要表达于激活的T细胞表面，与B7结合后能抑制小鼠和人的T细胞的激活，在T细胞活化中起负调节作用。

用抗CTLA4抗体阻断CTLA-4与B7的结合，在体内外均能促进T细胞的增殖和活化能力，从而增强T细胞的免疫反应，并能够产生良好的抗肿瘤效果。另一个重要的提升T细胞抗肿瘤免疫反应的策略是以分泌细胞因子的肿瘤细胞作为肿瘤疫苗，通过对T细胞和APC产生旁分泌效应，达到抗肿瘤的目的。FL（fms-like tyrosine kinase receptor-3 ligand，fms样酪氨酸激酶受体3配体，Flt3Ligand，FL）是一种新近发现的细胞因子。

在体内外均能够诱导树突状细胞（DC）和许多造血早期干细胞的增殖和活化，是目前发现的最为重要的DC生长因子之一。而DC是体内一种重要的专职抗原提呈细胞（APC），在肿瘤抗原激发特异性免疫的过程中具有重要作用，并且荷瘤宿主DC功能一般都低下。FL可以通过促进体内抗肿瘤免疫效应细胞（DC、NK细胞、CTL等）的增殖、分化和成熟，产生显著的抗肿瘤效应。

然而，对一些低免疫原性、高恶性的肿瘤，单一的免疫治疗策略并不能达到理想的抗肿瘤效果。而且，目前关于anti-CTLA4抗体的抗肿瘤机制还未彻底明了，存在着一些不同的认识。

为此研究了anti-CTLA4抗体与FL瘤苗和B7瘤苗间可能存在的协同效应，进一步探讨了anti-CTLA4抗体的抗肿瘤作用机制，以期为肝癌及其他低免疫原性肿瘤的临床免疫和基因治疗提供新的思路和实验依据。

参考文献

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[5]卢洋.基于FIt3L基因和Anti-CTLA4抗体的抗肿瘤免疫联合治疗的实验研究[D].第二军医大学,2001.