大鼠血管内皮细胞分离液试剂盒的应用

大鼠血管内皮细胞分离液试剂盒的简介^[1]

大鼠血管内皮细胞分离液试剂盒适用于从动物组织中分离血管内皮细胞，无菌条件下所分离的血管内皮细胞可用于细胞培养等。本品仅供科研使用。

大鼠血管内皮细胞分离培养操作流程^[1]

1、劲椎脱臼处死大鼠，75%酒精中浸泡1分钟，打开胸腔,分离主动脉,放在无菌的D-Hanks液培养皿中。

2、用眼科剪和镊子出去血管外周的脂肪和纤维组织，用含抗生素的D-hanks冲洗血管内外凝血数次，再放入另一无菌培养皿中。

3、用眼科剪纵向剪开血管，用手术刀将其切成1立方毫米大小的动脉植块，然后种植到培养皿中(培养皿用1%明胶37℃下过夜，使用前2h移入二氧化碳培养箱中，用时可以先经含10%小牛血清的培养液冲洗)。将动脉植块的内膜面与皿底接触，种植密度约1块/立方厘米。

4、培养皿中静置2h (干贴壁)，然后加入0.5ml含25%胎牛血清的培养液，略微盖过动脉植块内膜面。24h后，更换培养液，加入2-3ml培养液。

5、72h左右，当观察到内皮细胞充分长出，而成纤维细胞刚要长出的时候，将动脉植块除去，刮出成纤维细胞，换培养液1次，以后每两天换液1次，每次换1/2一1/3的液量。 继续培养8-10d，细胞融合成单层即可传代。

大鼠血管内皮细胞分离液试剂盒的应用^[1]

血管内皮细胞是铺陈于血管内壁的一层多功能细胞，在血管通透性屏障、免疫防御及炎性反应中起着极其重要的作用叫。大量研究显示，血管内皮是许多心血管疾病或危险因子作用的重要靶器官，具有相当活跃的内分泌和代谢功能。血管内皮细胞具有多重的生物学特性，而大鼠是主要的实验动物，因此建立大鼠血管内皮细胞的体外培养方法对于研究内皮细胞特性、对作用于血管的药物及抗肿瘤药物的研究具有重要意义。

主要参考文献

[1]高瑞金，刘学，崔卫波，谭海明，张碧成，陆倩倩，张雨梅；大鼠血管内皮细胞的分离、鉴定及传代培养。扬州大学兽医学院