大鼠血管内皮细胞分离液试剂盒

血管内皮细胞是铺陈于血管内壁的一层多功能细胞，在血管通透性屏障、免疫防御及炎性反应中起着极其重要的作用叫。大量研究显示，血管内皮是许多心血管疾病或危险因子作用的重要靶器官，具有相当活跃的内分泌和代谢功能。血管内皮细胞具有多重的生物学特性，而大鼠是主要的实验动物，因此建立大鼠血管内皮细胞的体外培养方法对于研究内皮细胞特性、对作用于血管的药物及抗肿瘤药物的研究具有重要意义。

1、劲椎脱臼处死大鼠，75%酒精中浸泡1分钟，打开胸腔,分离主动脉,放在无菌的D-Hanks液培养皿中。
2、用眼科剪和镊子出去血管外周的脂肪和纤维组织，用含抗生素的D-hanks冲洗血管内外凝血数次，再放入另一无菌培养皿中。
3、用眼科剪纵向剪开血管，用手术刀将其切成1立方毫米大小的动脉植块，然后种植到培养皿中(培养皿用1%明胶37℃下过夜，使用前2h移入二氧化碳培养箱中，用时可以先经含10%小牛血清的培养液冲洗)。将动脉植块的内膜面与皿底接触，种植密度约1块/立方厘米。
4、培养皿中静置2h (干贴壁)，然后加入0.5ml含25%胎牛血清的培养液，略微盖过动脉植块内膜面。24h后，更换培养液，加入2-3ml培养液。
5、72h左右，当观察到内皮细胞充分长出，而成纤维细胞刚要长出的时候，将动脉植块除去，刮出成纤维细胞，换培养液1次，以后每两天换液1次，每次换1/2一1/3的液量。 继续培养8-10d，细胞融合成单层即可传代。