甘草抗氧物的有效成分及抗氧化机理

背景及概述^[1-2]

甘草为多年生草本植物，属豆科，是药食两用资源。甘草中的生理活性成分主要有三萜类化合物、黄酮类化合物及甘草多糖类化合物。其中，甘草抗氧物的活性主要来自黄酮类物质。1999年，梁瑞云等人对甘草乙醚提取物进行了二次薄层层析分离，找出最有效的抗氧化组分，并对该组分进行了协同抗氧化研究，指出用甘草作抗氧化剂，实际上是利用了甘草中黄酮类化合物成分。2000年研究了甘草毛根中的黄酮类物质的组成，同年对8种国产的甘草根茎中总皂苷和总黄酮类化合物提取分离方法进行了研究。结果表明，乌拉尔甘草的总黄酮的含量最高，胀果甘草、黄甘草、光甘草、欧甘草次之，粗毛甘草、圆果甘草、云南甘草较次之。此外，我国内蒙古卫生防疫站早住1990年就对甘草抗氧物进行了毒理学试验，为甘草抗氧物的实际应用提供了安全性方面的依据。现在，甘草抗氧物已作为商品化的天然抗氧化剂而被应用在食用油脂及含油食品上。

主要有效成分^[2]

甘草抗氧物是多种黄酮类和类黄酮类物质的混合物，主要有甘草黄酮、3-(2'，4'-二羟基苯基)-4-甲氧基-5(3-甲基丁基)-6-羟基香豆酮、甘草异黄酮A、甘草异黄酮B等。体外试验表明，甘草黄酮(FG)2.8～25μg/mL可明显抑制小鼠肝匀浆在温孵过程中丙二醛的升高；FG0.265～26.5μg/mL或FG2.58～25.8μg/mL分别对碱性二甲基亚矾或黄嘌吟/黄嘌吟氧化酶系统生成的O2有明显抑制作用：FG144μg/mL或FG258μg/mL分别对PMA刺激多形核白细胞释放O2的及OH·有明显的清除作用，这说明FG有抗脂质过氧化作用，同时，甘草异黄酮也有较强的清除自由基作用。

抗氧化机理^[2]

油脂的自动氧化是化合物和空气中的氧在室温下未经任何直接光照，未加任何催化剂等条件下的反应。整个反应过程是一个自由基连锁反应，而且是完全自发的反应。脂肪酸一旦由激发态氧引发氧化反应而形成新的脂肪自由基(ROO·)和氢过氧化脂肪酸(ROOH)后，脂肪的氧化作用就会自动继续下去。此外，由于ROOH中的-O-O-键的结合很弱，很容易引起自由基的连续生成反应，促进自动氧化过程的连续进行。而甘草抗氧化剂具有较强的清除自由基的作用，尤其是对氧自由基的作用效果更强，因而可抑制油脂过氧化终产物丙二醛的生成，从而抑制了油脂酸败。同时，甘草抗氧物还可抑制油脂的光氧化作用。

鉴别^[3]

1）取本品0.5g，溶于100mL乙醇中。

2）取试液1mL，加1%三氯化铁试液2～3滴，应产生绿蓝色或紫色沉淀。

3）取试液2～3mL，加等量碳酸钠试液，置水浴中煮沸3min，冷却后加新配制的重氮化试液1～3滴，应显浑浊深红色。

4）取本品1g，每次用二氯甲烷20mL回流10min，过滤，挥去二氯甲烷，浓缩物用50%乙醇20mL溶解过滤，收集滤液，吸取上述滤液1mL于试管中，滴加三氯化铁试液1～2滴，溶液应显褐色。

定量^[3]

甘草抗氧物中抗氧化成分易被二氯甲烷提取出来，在回流提取后，称量测定。测定方法如下：称取研细的甘草抗氧物样品1g(精确至0.0001g)，放入50mL圆底烧瓶中，每次加二氯甲烷20mL，回流15min，提取液于30～35℃条件下，滤入已恒重的烧杯中，共回流5次。然后用二氯甲烷30mL洗涤滤纸数次，洗涤液并入烧杯中，置水浴上蒸干，105℃干燥至恒重，称重。甘草抗氧物的质量分数(w)按式(2-19)计算：

式中m₁——提纯后甘草抗氧物质量，g

m——样品质量，g

主要参考资料

[1] 甘草抗氧化物对面粉品质的影响研究

[2] 甘草抗氧物的研究进展

[3] 来源：食品添加剂分析检验手册