氨基磺酸 [(1S,2S,4R)-4-[4-[[(1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基]氨基]-7H-吡咯并[2,3-D]嘧啶-7-基]-2-羟基环戊基]甲基酯

Pevonedistat (MLN4924)是Nedd8激活酶(NAE)的小分子抑制剂，IC50为4 nM。

Target	Value
NAE (Cell-free assay)	4 nM

MLN4924在结构上与59-磷酸腺苷（AMP）相关，是NAE反应的紧密结合产物。MLN4924 (3 μM) 作用于HCT-116细胞裂解液，选择性抑制NAE。MLN4924 (3 μM) 作用于HCT-116细胞，抑制<9％的整体蛋白质周转。MLN4924作用于 HCT-116细胞，降低Ubc12-NEDD8硫酯和NEDD8-Cullin的结合物，这种作用存在剂量依赖性， IC50<0.1 μM，使CRL底物CDT1, p27 和 NRF2, 而不是非-CRL底物大量增加。MLN4924(3 μM)处理HCT-116细胞，在早期8小时，导致细胞在S期累积，在24小时的时候使含4N DNA含量的细胞具有显著比例。 MLN4924 (3 μM) 作用于ABC DLBCL细胞，导致pIkappaBalpha的快速累积, 降低核p65含量, 降低核转录因子-kappaB (NF-kappaB) 转录活性, 和G(1) 期停滞, 最终导致诱导细胞凋亡,这些与有效抑制NF-kappaB 通路相一致。 MLN4924 (1 μM) 通过稳定DNA复制因子Cdt 1，而触发DNA的复制，且抑制细胞增殖，Cdt 1是cullins 1 和 4的一种底物。MLN4924 (1 μM) 足够提升Cdt1长达4-5小时，足够诱导DNA复制，并激活细胞凋亡和衰老途径。MLN4924处理，诱导衰老表型的特性，如放大和扁平的细胞形态，证明与衰老相关的β-Gal染色阳性。MLN4924诱导的衰老与细胞对DNA损伤的反应相关，DNA损伤由DNA沉默蛋白CDT1和ORC1的积累导致，是CRL/SCF E3s失活的结果。MLN4924诱导的衰老是不可逆的，伴随着p21的持续积累，和持续激活的DNA损伤反应。

MLN4924 (60 mg/kg)处理携带HCT-116肿瘤的小鼠，在早期30分钟，就降低NEDD8-cullin水平，这种作用存在剂量和时间依赖性，且处理1-2小时后维持最大作用效果。MLN4924 (60 mg/kg) 作用于携带HCT-116肿瘤的小鼠，提高NRF2 和 CDT1的 稳态水平，这种作用存在剂量和时间依赖性。MLN4924(60 mg/kg) MLN4924 (60 mg/kg) 作用于携带HCT-116肿瘤的小鼠，导致DNA损伤，提高磷酸化的CHK1水平。MLN4924 按BID schedule at 按30 mg/kg 和 60 mg/kg 剂量处理携带HCT-116肿瘤的小鼠，每天处理2次，抑制肿瘤生长，T/C值分别为0.36 和 0.15。MLN4924 (60 mg/kg)处理携带人类移植瘤ABC-和GCB-DLBCL的小鼠，抑制NAE 通路生物标志物，且完全抑制肿瘤生长。MLN4924 (60 mg/kg)处理携带人类移植瘤ABC-DLBCL的小鼠，抑制NF-kappaB通路，且伴随着肿瘤衰退。