小鼠内脏脂肪细胞试剂盒的应用

背景^[1-4]

小鼠内脏脂肪细胞试剂盒适合于培养小鼠的内脏脂肪细胞。本试剂盒包含：（1）OptiTDSTM小鼠内脏脂肪细胞组织解离液（2）小鼠内脏脂肪细胞组织处理缓冲液（3）FibrOutTM小鼠内脏脂肪细胞成纤维抑制剂（4）小鼠内脏脂肪组织洗液（5）小鼠内脏脂肪细胞生长因子及血清（6）小鼠内脏脂肪细胞基础培养基（7）小鼠内脏脂肪组织预备液。

脂肪细胞在体内的主要生理功能是：以甘油三酯的形式存储在体内，并在机体需要时供给能量。脂肪细胞的合成代谢主要包括吸收和合成两个过程，甘油三酯可被肠黏膜细胞分解为甘油和脂肪酸，通过门静脉进入血液循环，而长链脂肪酸可在肠黏膜细胞重新合成甘油三酯后与载脂蛋白结合成乳糜微粒，通过淋巴管进入血液循环。

内脏是指在体腔内，借管道直接或间接与外界相通的器官的总称。主要包括人体胸腹部内脏器官的分布：肝脏、胆囊、胃、肾、小肠、脾、直肠、十二指肠、胰、输尿管、卵巢、膀胱、子宫。其中，小鼠内脏脂肪细胞主要存在于结缔组织中，能够合成和贮存脂肪。成熟的脂肪细胞呈圆形，胞浆内富含脂滴。脂肪细胞在脂类代谢，能量平衡以及抵抗炎症等方面起重要作用，与肥胖，高血脂、糖尿病、乳癌等多种生理疾病密切相关。

利用试剂盒中提供的内脏组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的内脏组织能使得内脏组织中脂肪细胞的一些功能特性发生改变，从而将脂肪细胞分离开来。还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以程度地降低所培养的脂肪原代细胞中成纤维细胞的含量。

应用^[5][6]

小鼠内脏脂肪细胞试剂盒可用于冷刺激诱导的内脏脂肪棕色变对小鼠代谢的影响及机制研究：

机体内的脂肪组织可以分为白色脂肪(WAT)和棕色脂肪(BAT)。白色脂肪以储存能量为主,也可分泌多种脂肪因子参与调控机体代谢；棕色脂肪的主要功能是产热以维持体温,其线粒体内膜富含解偶联蛋白UCP1,可以将氧化呼吸产生的能量以热的形式散发出去。白色脂肪主要分布在腹腔内脏周围和皮下,细胞呈现为单房脂滴,胞浆成分较少；棕色脂肪主要分布在啮齿类动物和人类新生儿的肩胛间,细胞内有多个多房脂滴和丰富的线粒体,与产热功能相适应。

在冷刺激和PPARγ激动剂等诱导下,白色脂肪中会出现形态类似棕色脂肪并且表达UCP1的一类细胞,称为米色脂肪细胞或诱导的棕色脂肪细胞,这一过程称为白色脂肪棕色变。米色脂肪细胞因其高表达UCP1而区别于白色脂肪细胞,但又不同于棕色脂肪细胞,其UCP1的基础水平较低,在受到外界因素的诱导才会高表达。充分激活的米色脂肪细胞UCP1的表达量与棕色脂肪细胞相当,也可通过UCP1解偶联产热,两者统称为产热脂肪细胞。

冷刺激可以激活交感神经末梢释放儿茶酚胺,激活脂肪细胞的β3肾上腺素能受体,通过Gs-cAMP-PKA途径激活脂滴蛋白Perilipin、激素敏感性酯酶和脂肪甘油三酯酯酶,加速脂降解,产生游离脂肪酸。棕色和米色脂肪细胞可摄取目身降解和循环中大量的游离脂肪酸进入线粒体氧化激活UCP1产热。除此以外,活化的WAT还可以摄取循环中的葡萄糖。

既往研究发现不同部位脂肪对棕色变的敏感性不同,包括冷刺激在内许多诱导棕色变的因素较易激活小鼠皮下腹股沟处脂肪(subcWAT),而对附睾内脏脂肪(eWAT)作用不明显,因此eWAT也被称为真正的白色脂肪。但以往冷刺激的研究集中在4℃,更冷环境下eWAT的改变未见报道,内脏脂肪是否能由低温诱导棕色化还不明确。

参考文献

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[4]EBF2 promotes the recruitment of beige adipocytes in white adipose tissue[J].Rachel R.Stine,Suzanne N.Shapira,Hee-Woong Lim,Jeff Ishibashi,Matthew Harms,Kyoung-Jae Won,Patrick Seale.Molecular Metabolism.2015

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[6]杨晓艳.冷刺激诱导的内脏脂肪棕色变对小鼠代谢的影响及机制研究[D].山东大学,2016.