苯达莫司汀的药理作用

背景及概述^[1][2]

苯达莫司汀(bendamustinehydrochloride)由Ozegowski及其同事于1963年在德国耶拿的微生物试验协会研制成功，是一种双功能基烷化剂，可以导致DNA单链和双链通过烷化作用交联，打乱DNA的功能和DNA的合成，使DNA和蛋白之间，以及蛋白和蛋白之间产生交联，从而发挥抗肿瘤作用。1971～1992年盐酸苯达莫司汀由Jenapharm公司以商品名Cytostasan生产。1993年后，由Ribosepharm公司以商品名Ribomustine在德国上市销售用于治疗乳腺癌、慢性淋巴细胞性白血病。2008年3月20日，由Cephalon公司开发的盐酸苯达莫司汀经美国FDA批准用于治疗慢性淋巴细胞白血病(CLL)，商品名为Treanda；同年10月31日该药又获准用于惰性B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)的治疗。盐酸苯达莫司汀作为新一代抗癌药物，对多种癌症具有明显疗效。临床研究表明，单独或联合用药治疗NHL、多发性骨髓瘤、CLL和乳腺癌等，能明显降低复发率与死亡率。注射用盐酸苯达莫司汀安全有效，用药方便，起效迅速，作用持久，而且价格低廉，具有很好的市场前景。

药理作用^[1]

苯达莫司汀的确切作用机制尚不十分清楚，但已知该药是携带1个嘌呤样苯并咪唑环的氮芥衍生物，兼具烷化剂和嘌呤类似物(抗代谢药)的双重作用机制，包括激活DNA损伤应激反应和细胞凋亡，抑制细胞有丝分裂检查点和诱导有丝分裂紊乱。最近有关研究提示苯达莫司汀的作用机制与其他烷化剂不同，因此对这些药物耐受的患者有效。体外药效学研究表明，苯达莫司汀对人乳腺癌、卵巢癌等细胞株具有显著的细胞毒活性，如抑制人乳腺癌细胞株MCF7生长的IC50为138μmol·L-1。苯达莫司汀与其他烷化剂包括环磷酰胺、美法仑和卡莫斯汀等仅有部分交叉耐受性。值得注意的是，苯达莫司汀对顺铂耐药卵巢癌细胞A2780-CP2(IC50为157μmol·L-1)和阿霉素耐药的乳腺癌细胞株MCF7AD具有明显的抗肿瘤活性(平均IC50为187μmol·L-1)。事实上，该药物对使用蒽环类预处理的乳腺癌细胞亦表现出良好的抗肿瘤活性。此外，当苯达莫司汀为半数抑制浓(IC50)时，其诱导的DNA双链断裂(脉冲场凝胶电泳计算)作用比美法仑、环磷酰胺和卡莫司汀更强，其致DNA双链断裂持续时间比卡莫斯汀或环磷酰胺更长久。另一项研究显示，苯达莫司汀在体外诱导B型慢性淋巴白血病细胞凋亡呈浓度依赖性并与氟达拉滨具有协同作用。

苯达莫司汀与氟达拉滨48h联合应用所产生的细胞凋亡率比预期值高出1.4倍。在体内药效学研究中，苯达莫司汀25，37.5和50mg·kg-1(均在接种d1，2各静脉注射给药1次)对人乳腺癌移植瘤MDA-MB231具有延缓肿瘤生长或抑制肿瘤生长的作用，对人肺癌移植瘤LX-1亦具有不同程度的抑制作用；选用SCID小鼠皮下接种SUDHL-1细胞(6.4×106/0.2mL)建立模型，考察苯达莫司汀在SUDHL-1异种移植瘤模型中的剂量反应。结果显示，苯达莫司汀治疗组(2，8，16mg·kg-1·d-1，腹腔内连续给药5d)小鼠肿瘤体积明显减小，并且呈剂量相关性；选用SCID小鼠皮下接种Daudi细胞(1.0×107/0.2mL)建立模型，考察苯达莫司汀和环磷酰胺在Daudi异种移植瘤模型中的疗效。结果显示，苯达莫司汀治疗组和环磷酰胺治疗组均能抑制小鼠肿瘤生长，并且苯达莫司汀和环磷酰胺联合治疗效果更佳。

药动学^[1]

单次静脉注射苯达莫司汀后，最高血药浓度(Cmax)一般出现在注射结束时。苯达莫司汀的稳态分布容积为19.8～25.2L。蛋白结合率约95%。体外研显示，苯达莫司汀主要通过CYP1A2代谢生成一种氧化产物(M3)和一种N-去甲基代谢物(M4)。它们的细胞毒性均明显低于母体化合物(M3，M4分别仅占母体化合物活性的10%和1%)。苯达莫司汀不会抑制或诱导一些重要的肝酶。本品主要通过粪便排泄(约90%)，较少通过尿液排泄。人体中苯达莫司汀的总清除率为31.7～49.6L·h-1，母体化合物的消除半衰期为32～40min。在给药后28d周期的d1和d2，在血浆中很少或基本未发现苯达莫司汀的蓄积。

应用^[1]

2008年3月20日，由美国Cephalon公司研制开发的盐酸苯达莫司汀由美国FDA批准用于治疗慢性淋巴细胞性白血病(CLL)，商品名Treanda，同年10月31日该药又获准用于惰性B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)治疗。目前该品种的诸多新适应证，包括多发性骨髓瘤等正在全球多个国家进行二期或三期临床试验。

药物间相互作用^[1]

苯达莫斯汀通过CYP1A2代谢形成活性代谢产物：γ-羟苯达莫司汀(M3)和N-去甲基-苯达莫司汀(M4)。CYP1A2抑制剂如氟伏沙明，环丙沙星等可能增加苯达莫司汀血浓度，减少其活性代谢产物血浓度。CYP1A2诱导剂如奥美拉唑，吸烟则可降低苯达莫司汀血浓度并增加其活性代谢产物的血浓度。应谨慎联合用药，必要时可并用CYP1A2抑制剂以提高疗效。

安全性评价^[1]

对Ⅱ期和Ⅲ期临床试验数据的分析表明，苯达莫司汀引起的最常见非血液学不良反应是恶心、疲劳、呕吐、腹泻和发热；最常见的血液学不良反应是可逆性骨髓抑制。苯达莫司汀可能引起轻微或严重过敏反应，患者在给药过程中或给药后初期可能出现皮疹、面部肿胀、呼吸困难等过敏症状。苯达莫司汀可能对胎儿造成影响，因此，女性治疗过程中及治疗后3个月内，应采取避孕措施及停止哺乳。

制备^[3]

1）5-氨基-1-甲基-2-苯并咪唑丁酸乙酯(BD-b)的制备工艺

在10L反应釜中，加入5-硝基-1-甲基-2-苯并咪唑丁酸乙酯(BD-a，350.0g，1.20mol)，甲醇1(2.8L，8倍量)和10%Pd-C(17.5g，0.05倍量)。用真空油泵抽真空至真空表指针稳定，关真空阀，通入氢气，按此法置换三次，关闭真空阀，开氢气阀，控制反应釜内压力略呈正压，将反应釜内温度升至33~37℃，反应6h，TLC(氯仿∶甲醇=10：1展开二次)检测至原料反应完全。关闭氢气阀门，充入氮气置换一次后，放料过滤，甲醇2(1.0L)洗釜，滤饼用甲醇3次洗涤(3×150.0mL)，滤饼钯炭回收套用。滤液减压浓缩，溶剂甲醇回收套用，浓缩物48~52℃常压恒温干燥3h，制备得中间体1：5-氨基-1-甲基-2-苯并咪唑丁酸乙酯(BD-b，286.3g，摩尔收率95.8%)。

2）5-{[双(2-羟基乙基)氨基}-1-甲基-2-苯并咪唑丁酸乙酯(BD-c)的制备工艺

室温搅拌下，在20L反应釜中依次加入BDb(280.0g，1.13mol)，乙酸钠(64.8g，0.79mol)，水(980.0mL)，冰乙酸(980.0mL)，搅拌溶解，体系冷却至-5~0℃，滴加环氧乙烷(397.0mL，8.0mol)，滴加速度以控制体系反应温度-5~0℃为准，滴加完毕，保持-5~0℃反应1h，再升温至33~37℃反应4h，TLC检测至原料反应完全后，降至室温，用饱和碳酸钾溶液调节体系pH为7～7.5(实测pH7.3，共耗饱和碳酸钾溶液2743mL)，二氯甲烷萃取(3×1.5L)，有机层合并，饱和食盐水洗涤(1×2.5L)，无水硫酸镁(250.0g)干燥2h，过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤(多次洗涤共计0.5L)，滤液减压浓缩蒸除溶剂，得中间体2：5-{[双(2-羟基乙基)氨基}-1-甲基-2-苯并咪唑丁酸乙酯(棕褐色油状物，在釜内未及称量，按照100%计算下步投料量)。

3）4-[5-[双(2-氯乙基)氨基]-1-甲基苯并咪唑-2-基]丁酸盐酸盐(苯达莫司汀)的制备工艺

室温下，在上步反应的釜残(BD-c按100%计算，394.8g，1.13mol)中加入甲苯(1970mL)，搅拌下呈细流状加入三氯氧磷(368mL)，加毕，体系加热回流反应8h，减压浓缩至干得BD-Cl。釜残中加入浓盐酸(2610mL，理论氯代产物得量的6倍量)，加热回流反应6h，减压浓缩至干，釜残中加入水(1330mL，理论苯达莫司汀得量的3倍量)，室温下搅拌0.5h，过滤，滤饼用冷水洗涤(3x150.0mL)，再用冷丙酮洗涤(3×150.0mL)，得BD粗品湿品(325.2g)，用丙酮(2250mL)回流打浆处理0.5h。冷却至室温后过滤，滤饼用冷丙酮洗涤(225mL)后，68~72℃常压干燥3h，得目标物4-[5-[双(2-氯乙基)氨基]-1-甲基苯并咪唑-2-基]丁酸盐酸盐粗品BD粗品(286.4g，摩尔收率64.2%，此收率是取代、氯代/水解成盐2步反应合并收率)。

主要参考资料

[1] 苯达莫司汀的药理与临床研究

[2] 盐酸苯达莫司汀(bendamustinehydrochloride)

[3] 盐酸苯达莫司汀的合成工艺研究