蔓荆子黄素的应用

背景及概述^[1][2]

蔓荆子为马鞭草科牡荆属单叶蔓荆VitextrifoliaL.var.simplicifoliaCharm.或蔓荆VitextrifoliaL.的干燥成熟果实，主要产于山东、广西、云南、江西、浙江、福建、及广东等地。蔓荆子为常用中药，具有疏散风热、清利头目、止痛的功效。临床上用于治疗风热、感冒头痛、偏头痛等症。据报道，蔓荆子的主要活性成分是黄酮类化合物，其中蔓荆子黄素作为我国2010版药典规定的蔓荆子药材的质控指标。

现在研究表明，蔓荆子黄素具有抗缺氧、抗不良刺激、抗疲劳、双向调节机体、抑制血糖升高和影响学习记忆等多种作用。由此可见，目标成分的开发具有广泛的商业价值。结构式如下：

目前，蔓荆子中的蔓荆子黄素提取分离主要多采用柱色谱法，分离周期长，消耗溶剂多，操作复杂。高速逆流色谱(High-speedcountercurrentchromatography，HSCCC)作为一种新型分离纯化技术，操作方便，快捷，分离度较高，克服了由固相载体带来的样品结合、失活、污染等缺点，已被广泛应用于天然产物活性成分的分离制备和总草药的分析鉴定。有文献报道用高速逆流色谱分离纯化蔓荆子黄素，但有上样量少，分离时间长，纯化效果不好等缺点，不能实现规模化生产。。

检测方法^[1]

蔓荆子黄素的常用检测方法是高效液相色谱，但是在氧化石墨烯修饰的玻碳电极表面可得到一对氧化还原峰，其电催化反应是受吸附控制的电极反应。由于其催化效果明显，利用循环伏安法即可建立检测蔓荆子黄素含量的新方法，并用于实际样品蔓荆子中蔓荆子黄素的含量检测，结果令人满意。蔓荆子黄素的电化学检测新方法与其他分析方法相比，具有灵敏度高、检出限低、反应快速和操作简单等特点，为蔓荆子药物质量的控制和检测提供了新的平台。

应用^[3]

蔓荆子黄素具有疏散风热、清利头目的功效，主治风热感冒头痛、齿龈肿痛、目赤多泪、目暗不明、头晕目眩等。近年来有关蔓荆子的抗癌活性报道日益增多。蔓荆子黄素是蔓荆子的主要化学成分，王海燕等人报道了其具有抑制人癌细胞增殖的活性并进行了其抗癌机制的研究；SoMinLee等人报道了蔓荆子黄素保护血管的活性。

蔓荆子黄素不仅能通过诱导细胞凋亡发生抗肿瘤作用，还能通过周期抑制、抑制有丝分裂活动机制产生作用。本研究发现，在48h或者72h时间段，即使蔓荆子黄素的作用浓度为5μmol/L，其对细胞的抑制率仍然能达到53.8%和66.6%，对比同时间段，高浓度的蔓荆子黄素（10μmol/L）对细胞的凋亡率分别为16.8%和29.8%，这说明蔓荆子黄素对GH3细胞的增殖抑制作用，不仅是通过诱导细胞凋亡，也可能通过多种机制发挥复合作用。综上所述，线粒体途径诱导细胞凋亡是蔓荆子黄素抑制垂体瘤体外细胞生长的机制之一。

制备^[2]

取经干燥的蔓荆子原料粉碎，称2000g，每次加入10L80％乙醇溶液超声提取60分钟，提取3次，减压浓缩提取液得到浸膏45g。按1质量份浸膏加入100质量份50％乙醇水溶液溶解，石油醚萃取，共萃取3次，合并萃取液回收石油醚得萃取物40g，萃取物上目数为100-200的聚酰胺柱，以体积分数80％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥得粗提物，用于高速逆流分离。

在分液漏斗里配制正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水两相溶剂体系，按体积比1:2:1:2混合，振摇后静置分层，超声脱气30min。取上相注满高速逆流色谱仪作为固定相，转动主机，转速800rpm，同时以5ml/min泵入下相做流动相，水浴温度为20℃，建立动态平衡后，用流动相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器在254nm波长下在线监测，收集各目标成分，连续制备，相应合并回收试剂，浓缩后甲醇结晶，从1000mg粗提物中分离得到高纯度的蔓荆子黄素200mg。经HPLC检测，含量98.0％，经UV、IR、MS、HNMR、CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。

主要参考资料

[1] 王坤, 张桂菊, & 王宏. (2009). 不同地区炒蔓荆子中蔓荆子黄素的含量. 中药材, 32(9), 1372-1373.

[2] 彭霞, & 台海川. (2009). Hplc测定傣药蔓荆叶中蔓荆子黄素的含量. 中国民族医药杂志, 15(10), 56-57.

[3] 宋永春, 张曦, 雷光焰, & 党诚学. (2010). 蔓荆子黄素对p53突变型人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响. 中华医学杂志, 90(10), 703-707.