对人肾系膜细胞的相关研究

背景及概述^[1-2]

人肾系膜细胞(HRMC)提取于人肾脏组织，提取纯化之后立即冻存。人肾系膜细胞属于血管周细胞，位于肾小球毛细血管袢之间。系膜细胞有多种生理功能包括分泌系膜基质，胞吞和加工血浆大分子，通过系膜细胞收缩和分泌血管活性激素控制肾小球血流动力学。人肾系膜细胞增生和基质的过多产生是多种肾小球肾炎的主要病理表现，如IgA肾病，狼疮性肾炎，糖尿病肾病以及在肾小球硬化过程中细胞外基质增加。在培养中细胞增殖和基质合成/降解是通过细胞因子和生长因子调控的，因此细胞培养是研究系膜扩张、瘢痕形成和肾小球硬化的理想方法。人肾系膜细胞(HRMC)提取于人肾脏组织，提取纯化之后立即冻存。每管含有细胞数>5&times；105cells/ml，此细胞通过Fibronectin，Thy-1和smoothmuscleactin免疫荧光染色验证，经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。细胞可以达到15倍增。

相关研究^[1-4]

有研究探讨高糖条件下系膜细胞氧化失衡与血小板源性生长因子B(PDGFB)表达之间的关系，通过抗氧化剂茶多酚证实氧化应激在早期糖尿病中的作用。方法使将培养的人肾系膜细胞分为正常对照组、高糖组、茶多酚对照组和茶多酚干预组，分别在0、12、24、36、48h采用分光光度法检测上清液还原型谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性，以及免疫细胞化学法和RTPCR法检测0、12、36h的PDGFBmRNA和蛋白的表达情况。结果显示①高糖条件下GSHPX活性下降，抗氧化能力下降，氧化失平衡；茶多酚可增加抗氧化酶GSHPX的活性。②高糖组人肾系膜细胞PDGFBmRNA和蛋白的表达比正常对照组均增加(P<0.05)；茶多酚干预组比高糖组有明显下降(P<0.05)。结论高糖能促进人肾系膜细胞活性氧和PDGFB的表达增加，茶多酚可抑制该作用。

此外，还有研究探讨L-精氨酸(L-arg)对人肾系膜细胞胞外基质产生的影响及其作用机制。方法：运用放射免疫分析技术及羟-脯氨酸比色法分别检测L-arg作用后系膜细胞上清液中Ⅲ型前胶原与总胶原含量；运用RT-PCR技术检测L-arg对人肾系膜细胞Ⅳ型胶原基因表达的影响。结果L-arg抑制Ⅲ型前胶原产生，抑制总胶原分泌，并抑制Ⅳ型胶原基因表达。因此L-arg抑制人肾系膜细胞胞外基质产生，并可能与抑制胶原成分的基因转录有关。

有实验探讨潜阳育阴颗粒对人肾系膜细胞增殖的影响进而寻求其治疗高血压肾损害的机制。方法是采用血管紧张素II诱导人肾系膜细胞增殖造模，MTT法研究潜阳育阴颗粒不同浓度对细胞增殖的影响，并计算抑制率。结果潜阳育阴颗粒在一定浓度下均能抑制细胞增殖。结论潜阳育阴颗粒对人肾系膜细胞增殖有明显的抑制作用，为其在治疗高血压肾损害中的作用提供了理论依据。

另外，还有研究探讨阿托伐他汀对糖尿病肾病的保护作用及其机制。方法时对高糖培养人肾系膜细胞进行阿托伐他汀干预试验，观察人肾系膜细胞增殖、肾上腺髓质素(AM)、转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA表达的影响，及细胞培养液中AM、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、TGFβ1、层粘连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原含量的变化。结果阿托伐他汀对高糖培养下人肾系膜细胞的过度增殖，TGFβ1、AngⅡ、AM、LN和Ⅳ型胶原合成、分泌增多的变化具有明显的抑制作用(P<001)。结论是阿托伐他汀可抑制高糖刺激的肾系膜细胞增殖，通过抑制AngⅡ、TGFβ1的表达、分泌，降低基质蛋白生成和沉积，发挥其肾脏保护作用。在AngⅡ、TGFβ1的表达和分泌下降后，AM的表达和分泌也随之下降。

主要参考资料

[1] 高糖对人肾系膜细胞GSH-PX和PDGF-B表达影响及茶多酚干预作用

[2]  L-精氨酸对人肾系膜细胞胞外基质产生的影响

[3] 潜阳育阴颗粒对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾系膜细胞增殖的影响

[4] 阿托伐他汀对高糖培养人肾系膜细胞的作用