去亚甲基小檗碱的应用

背景及概述^[1]

盐酸小檗碱( Berberine hydrochloride) 是异喹啉类生物碱，存在于很多植物中，如黄连、黄柏等。现代药理学研究证明，盐酸小檗碱具有抗菌消炎、抗肠道细菌感染、降血糖、抗肿瘤等作用。随着盐酸小檗碱的广泛使用，其毒副作用也被国内外的许多学者报道。研究表明盐酸小檗碱诱发大鼠原代培养的小脑颗粒神经元和大脑皮质坏死，并增加其胆红素的神经毒性作用。研究表明；盐酸小檗碱对大鼠和小鼠具有一定的发育毒性。因此急需寻找更为安全有效的其他生物碱类药物，并加以利用。

去亚甲基小檗碱( Demethyleneberberine)是盐酸小檗碱的结构类似物，存在于天然药用植物芸香科植物黄柏中，亦由盐酸小檗碱经过肝脏的首过效应代谢而成。目前关于该药物的含量测定方法并未见报道。中国药典2015 版收载了HPLC 等度洗脱测定盐酸小檗碱有关物质的方法：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0. 01 mol /L 磷酸二氢铵溶液(用磷酸调节pH 值至2. 8) -乙腈( 75∶ 25) 为流动相；检测波长为345 nm。采用此色谱条件对盐酸去亚甲基小檗碱进行分析，峰形不好。该研究在此基础上进行改进，建立了HPLC 测定盐酸去亚甲基小檗碱含量的分析方法，该方法能够有效地排除杂质对主药峰的干扰，方法准确可靠，耐用性好，可快速、准确地测定原料药中盐酸去亚甲基小檗碱的含量。

应用 ^[2-4]

已有报道盐酸去亚甲基小檗碱在体外对多种革兰阳性及阴性菌均具有抑制作用。研究表明盐酸去亚甲基小檗碱在肝纤维化、急慢性酒精性肝病、溃疡性结肠炎、免疫性肝损伤和非酒精性脂肪肝病等疾病的预防和治疗上具有一定的疗效。

1）去亚甲基小檗碱(DMB)在细胞水平上能显著抑制促炎因子的基因表达，对ROS有很强的清除作用。溃疡性结肠炎属于一种非特异性炎症性疾病，因此，盐酸去亚甲基小檗碱(DMB)具有体外的抗炎和抗氧化活性为开展DMB治疗溃疡性结肠炎的药物研究奠定了重要的理论基础。

2）通过T-AOC法分析盐酸去亚甲基小檗碱(DMB)的体外抗氧化活性，实验结果显示，在200μM、400μM浓度下，盐酸去亚甲基小檗碱的抗氧化能力与阳性对照药维生素C(Vc)无显著差异，盐酸去亚甲基小檗碱随着浓度升高，其抗氧化活性逐渐加强。表明盐酸去亚甲基小檗碱在体外具有很强的抗氧化活性。另外采用ROS探针法，利用荧光探针DCFH-DA与ROS结合产生荧光的性质，通过细胞培养、荧光显微镜和流式细胞仪分析去亚甲基小檗碱对ROS的清除作用。研究结果表明盐酸去亚甲基小檗碱(DMB)在细胞水平上对ROS有很强的清除作用。过量ROS(Reactive Oxygen Species)对细胞具有损伤作用，酒精在肝脏内会诱发肝细胞内ROS的大量增加，ROS是诱发酒精性肝病的重要致病因子。因此盐酸去亚甲基小檗碱(DMB)具有体内、外的抗氧化活性，这为开展DMB治疗酒精性肝病研究奠定了重要的理论基础。此外，在盐酸小檗碱的众多衍生物中，盐酸去亚甲基小檗碱是最有效的拓扑异构酶Ⅰ抑制剂。研究表明盐酸去亚甲基小檗碱是一种线粒体靶向的阳离子抗氧化剂，能够抑制线粒体中的氧化应激和脂质病变，有效地治疗酒精性脂肪肝，且安全性高于盐酸小檗碱，因此盐酸去亚甲基小檗碱有可能成为临床上治疗酒精性肝病和其他疾病的安全有效的新型药物，具有重要的临床意义。

3）另外有专利报道去亚甲基小檗碱具有良好的降低血糖作用，研究将高血糖组动物分为四组，分为空白灌胃组(给予CMC-Na空白溶液)、小檗碱灌胃组(BBR，120mg／Kg·d)、去亚甲基小檗碱灌胃组(120mg／Kg·d)、去亚甲基小檗碱腹腔注射组(20mg／Kg·d)，每3天称重一次。分别于给药后6周取血，分离血清，测定血糖，并进行统计分析。结果显示小檗碱灌胃、去亚甲基小檗碱灌胃与腹腔注射均显著降低了小鼠体重和血糖参数，显示去亚甲基小檗碱具有良好降血糖作用，为临床治疗糖尿病及相关疾病提供另一个可选择药物。

主要参考资料

[1] 盐酸去亚甲基小檗碱含量测定的HPLC 分析方法建立及应用

[2] CN201810115491.2 盐酸去亚甲基小檗碱晶型及其制备方法

[3] CN201410260577.6 盐酸去亚甲基小檗碱在制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎药物中的应用

[4] CN201310465497.X盐酸去亚甲基小檗碱在制备预防和/或治疗急慢性酒精性肝病药物中的应用