蛋白免疫原性分析服务

背景^[1-5]

蛋白免疫原性分析服务可提供针对机体在使用生物药后产生的抗药抗体和中和抗体进行免疫原性实验的检测，旨在全力帮助客户加快推进药物研发项目的进展的技术性服务。提供的免疫原性检测主要通过分步方法来进行抗药抗体的评估和中和抗体的检测。其中，步主要集中于对结合在样品上的抗药抗体进行检测。在筛选出抗药抗体并确认其特异性结合后，对抗体浓度进行评估，从而完成对抗药抗体的定量。针对中和抗体活性的免疫原性检测是通过细胞水平实验或配体竞争性结合实验完成的。

免疫原性是指能够刺激机体免疫系统形成特异抗体或致敏淋巴细胞的性质。免疫原性的评价与生物药研发紧密相关。生物疗法涉及到的蛋白质、抗体，偶联多肽和寡聚核苷酸能够诱发机体产生有害的免疫反应，导致抗药抗体（Anti-Drug Antibody,ADAs）的产生，这类抗体会潜在威胁到病人的生命安全（引起过敏，自身免疫等不良反应）。其中，具有中和能力的抗药抗体被称作中和抗体（Neutralizing Antibody,NAbs）。中和抗体能够通过抑制生物药的生物活性进而减弱其药效。免疫原性检测分为对抗药抗体和中和抗体的检测评价两个部分。

服务类型^[6][7]

2.抗药抗体 （Anti-Drug Antibody, ADA）检测

免疫系统可能会通过产生抗药抗体而对这些生物分子做出反应。抗药抗体会对药物暴露、药物毒性作用、药物代谢动力学、药物效应动力学等造成影响。因此，在临床前研究和临床研究中，开发可靠的、能够有效评估抗药抗体反应的实验方法显得尤为重要。对抗药抗体的评估涉及多步骤的分析过程，其中包含广泛的实验形式以及方法学。

抗药抗体的完整性分析评估主要包括以下几个步骤：

1.抗药抗体的筛选实验：筛选实验能够确认样品中抗药抗体的存在。常见的方法包括直接或桥接酶联免疫吸附试验（ELISA），电化学发光（ECL）或放射免疫测定分析（RIA）。非特性背景（NSB）通常是通过检测未处理动物在不同时间点的多组血清样品来测定的，得到的这个NSB数据可以作为抗药抗体检测实验中的一个分界点。

2.抗药抗体验证实验：筛选出来的阳性样本必须通过验证实验进行分析进而排除任何的假阳性结果。

3.抗药抗体鉴定实验：经过确认的阳性样本将会被进一步确认其在结合亲和性、亚型及其他方面的特性。

2.中和抗体（Neutralizing Antibody, NAbs）检测

中和抗体：宿主对抗原或病毒感染的常规反应是产生抗体，它与病毒结合而使其失活（中和）。中和抗体针对治疗药蛋白或多肽能够显著降低其药效，因此中和抗体检测是免疫原性检测中是很关键的一个部分。

通常，美国食品药物管理局（FDA）认为生物实验能更加真实的反映出体内的环境状况。对于中和抗体的检测，生物实验应该与作用机理相关，否则通过实验来对中和抗体的临床效果进行评价将不能提供充分的信息。中和实验的开发和验证具有一定难度，并且在不同的样本间存在显著变化。

然而，细胞水平实验由于在认识患者对药物蛋白免疫反应的重要性上起着关键作用，所以仍然被推荐使用。细胞水平上的中和抗体检测实验涉及到细胞在受到药物或药物所抑制的配体刺激所引发的胞内信号通路，或者也可能与在细胞表面所发生的胞外结合事件相关。在我们常见的细胞水平实验中，最常用的数据读取方法包括细胞增殖，生物标记，报告基因表达，抗体依赖的细胞介导的细胞毒素（ADCC）等实验。

参考文献

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