160KDA内含子结合蛋白抗体的应用

背景^[1-3]

160KDA内含子结合蛋白抗体是一类可以特异性结合160KDA内含子结合蛋白的多克隆抗体，主要用于体外检测160KDA内含子结合蛋白的免疫学实验。

160KDA内含子结合蛋白属于核孔蛋白，该蛋白主要作为细胞核核孔复合物的单体存在。核孔蛋白家族包含了50～100种蛋白質，是真核細胞核孔复合物的主要构成部分。编码核孔复合物核孔蛋白160 kD的一种蛋白质成分的NUP 160基因突变与类固醇抵抗性肾病综合征有关。大约有50种不同的基因起着至关重要的作用，包括缝隔膜的编码成分、肌动蛋白细胞骨架蛋白和核孔蛋白，核孔复合体的构建基块在突变时可触发类固醇抵抗性肾病综合征。

160KDA内含子结合蛋白

生命现象遗传信息的流向都遵循分子生物学中的"中心法则",即从DNA到RNA再到蛋白质。由于绝大多数真核生物基因和某些原核生物基因是断裂基因,即在基因的DNA序列中插有一些无编码意义的片段,编码序列称为外显子,非编码序列称为内含子。由于基因中内含子的存在,基因在表达时,遗传信息在mRNA水平有一个剪接过程,即去掉内含子,将外显子连接起来,最终产生一个有功能的成熟mRNA分子。

蛋白质有自剪接现象，蛋白质自剪接是前体蛋白中间的某些区域被切除,剩余部分以肤键重新连接起来,这样便产生了1个蛋白质分子。以肤键连接起来形成有功能的成熟蛋白部分称为蛋白质外显子,被切除的部分称为蛋白质内含子。自个蛋白质内含子发现至令,蛋白质内含子的数目在不断增加,目前已在古细菌,真细菌和单细胞真核生物中发现了100多个蛋白质内含子.蛋白质内含子及其剪接机制已经引起了的高度重视。

应用^[4][5]

用于拟南芥核孔蛋白Nup160的功能初探研究

植物开花受环境条件的控制,其分子调控机制在转录、蛋白和表观遗传等层次有较广泛而深入的研究；核膜孔复合物（nuclear pore complexs）是真核细胞中细胞质与细胞核之间物质交换的重要通道,是基因功能调节的重要环节。但是,核膜孔蛋白对开花时间和生物钟的调控机制未见详细报道。本研究从拟南芥突变体库订购了核膜孔亚复合物Nup107-160的八个核孔蛋白（Nucleoporin,Nup）基因的突变体共22个,并从中筛选出17个纯合突变体。通过观察发现,其中核膜孔蛋白Nup160的3个突变体mp160-1/-2/-3均表现出一致的多种发育表型,最显著的表型为早花,而且是不依赖于环境条件（光周期和温度）的早花。但是,突变体在长日下的开花时间依然早于短日条件下的开花时间,暗示突变体仍然对光周期有反应。结果表明,在拟南芥中Nup160作为一个植物开花的负调控因子,主要在光周期途径和温敏途径中参与拟南芥开花时间的调节。

此外,通过测量叶片振动节律发现,野生型拟南芥的生物钟周期约为26小时,而nup160-1/-2/-3突变体的生物周期明显延长,约为32小时。结果表明Nup160可能与生物钟调控密切相关。为了深入研究Jup160基因对于开花时间和生物钟调节的分子机制以及核孔复合物Nup107-160中其它核孔蛋白之间的相互作用,本文相继构建了Nup160基因及其它核孔蛋白的多种入门载体和表达载体,用于后续功能研究。这些载体包括过表达载体、GFP标记载体和启动子活性分析载体。本文的研究结果为阐明Nup160基因对植物开花和生物钟的调控机制提供了可靠的依据,也为进一步研究核膜孔复合物Nup107-160中其他核孔蛋白的功能奠定了基础。

参考文献

[1]Nuclear Pore Scaffold Structure Analyzed by Super-Resolution Microscopy and Particle Averaging[J].Anna Szymborska,Alex de Marco,Nathalie Daigle,Volker C.Cordes,John A.G.Briggs,Jan Ellenberg.Science.2013(6146)

[2]Nuclear pore complexes in the maintenance of genome integrity[J].Lucas Bukata,Stephanie L Parker,Maximiliano A D’Angelo.Current Opinion in Cell Biology.2013(3)

[3]Functional Architecture of the Nuclear Pore Complex[J].Einat Grossman,Ohad Medalia,Monika Zwerger.Annual Review of Biophysics.2012

[4]Environmental Memory from a Circadian Oscillator:The Arabidopsis thaliana Clock Differentially Integrates Perception of Photic vs.Thermal Entrainment[J].Boikoglou,Eleni,Ma,Zisong,von Korff,Maria,Davis,Amanda M,Nagy,Ferenc,Davis,Seth J.Genetics.2011(2)

[5]刘文瑄.拟南芥核孔蛋白Nup160的功能初探[D].北京林业大学,2015.