20号染色体开放阅读框100抗体的应用

背景^[1-3]

20号染色体开放阅读框100抗体是一类可以特异性结合20号染色体开放阅读框100的多克隆抗体，主要用于体外检测20号染色体开放阅读框100的免疫学实验。

开放阅读框（open reading frame，ORF）是结构基因的正常核苷酸序列，从起始密码子到终止密码子的阅读框可编码完整的多肽链，其间不存在使翻译中断的终止密码子。

20号染色体开放阅读框100抗体免疫组化

在mRNA序列中，每三个连续碱基（即三联“密码子”）编码相应的氨基酸。其中有一个起始密码子AUG和三个终止密码子UAA、UAG、UGA。核糖体从起始密码子开始翻译，沿着mRNA序列合成多肽链并不断延伸，遇到终止密码子时，多肽链的延伸反应终止。由于读写位置不同，ORF在下图链上具有六种可能性。

正常情况下，人体的每个细胞内有46条染色体，可分为23对。20号染色体有两份拷贝，父源母源各一份，组成一对。20号染色体上有6300万DNA基本构建单位（碱基对），占细胞中DNA总含量的约2%。对每条染色体上的基因加以认定，是遗传学研究的前沿领域。研究人员使用不同的方法测算每条染色体上的基因数量，染色体不同，包含的基因数量也不同。20号染色体上很可能包含500到600个基因，它们为蛋白质的合成提供遗传指令编码。这些蛋白质在人体内发挥着多种重要的功能。

应用^[4][5]

用于食管鳞癌3、8、10、20和Y染色体的非整倍性检测及其与临床病理参数相关性分析研究

应用荧光原位杂交（FISH）技术检测食管鳞状上皮癌中3、8、10、20号和Y染色体数目畸变情况,并计算3、8、10、20和3、8、20、Y两探针组合检测食管癌标本的阳性率,探讨两探针组合在临床上辅助诊断食管鳞癌的可行性进行相关性分析。

方法:①应用荧光原位杂交（FISH）技术检测20例食管鳞癌癌旁组织中3、8、10、20号和Y染色体数目畸变（增益或缺失）情况,并根据每条染色体的20组数据的第75百分位数值制定食管鳞状上皮癌中3、8、10、20号和Y染色体的畸变的判定标准。

②应用FISH技术检测219例食管鳞癌组织,并依据实验制定的标准计算每条染色体的数目畸变率,计算3、8、10、20和3、8、20、Y两探针组合检测食管癌标本的阳性率。

③将各染色体畸变情况与临床病理参数（性别、年龄、淋巴结转移情况、病理分期和分级）相关性进行分析。④探讨两探针组合在临床上辅助诊断食管鳞癌的可行性。

结果:①3、8、10、20号和Y染色体在食管癌癌旁组织中存在数目畸变,并根据五条染色体各自畸变率的第75百分位数确定食管癌组织中染色体增益和缺失判定标准,即判定3、8、10、20号和Y染色体增益或缺失的标准值为15%,确定常染色体多体率的值为10%。

②食管癌组织中均存在较高的数目畸变率,主要表现为染色体增益,包括三体、四体、多体。3、8、10和20号染色体增益率分别为84.5%（175/207）、77.5%（162/209）、63.4%（130/205）、83.2%（173/208）;多体率分别为24.6%（51/207）、34.9%（73/209）、23.4%（48/205）、31.7%（66/208）,而染色体缺失少见。在所检测的63例男性食管癌标本中有61.2%的患者表现出Y染色体缺失。

③3、8、10和20号染色体探针联合检测食管癌的阳性率为74.5%。3、8、20和Y染色体探针联合检测男性食管癌的阳性率为85.0%。

④与临床病理参数相关性分析结果表明:20号染色体增益及3、8号染色体多体与年龄相关（P=0.039,P=0.041,P=0.007）。8号染色体多体与肿瘤分期、细胞学分级相关（P=0.032,P=0.030）,3号染色体增益与细胞学分级相关（P=0.019）。

结论:①通过对食管癌旁组织FISH结果分析,可以得出FISH技术可以早于形态学等技术检测出染色体水平的变化。

②食管鳞癌组织中3,8,10,20和Y染色体数目均有较高的数目畸变率。

③两组探针在检测食管鳞癌阳性率为分别为74.5%和85.0%（男性）,因此应用3,8,10,20探针组合和3、8、20、Y探针组合（男性）作为辅助诊断食管癌的分子标志具有一定可行性。

参考文献

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[5]康维.食管鳞癌3、8、10、20和Y染色体的非整倍性检测及其与临床病理参数相关性分析[D].安徽医科大学,2009.