重组大鼠 CINC-2β/CXCL3

背景^[1][2][3]

重组大鼠 CINC-2β/CXCL3中的趋化因子（CXC基序）配体3（CXCL3）是属于CXC 趋化因子家族的小细胞因子，也称为GRO3致癌基因（GRO3），GRO蛋白γ（GROg）和巨噬细胞炎性蛋白-2-β（MIP2b）。CXCL3 通过与称为CXCR2的细胞表面趋化因子受体相互作用来控制单核细胞的迁移和粘附，并介导其对靶细胞的影响。最近研究已经显示CXCL3调节的形态发生过程中对小脑的内部层小脑颗粒神经元前体的自发迁移有关。

此外，如果Cxcl3在小脑颗粒神经元前体中的表达减少，则这会增加了成神经管细胞瘤（小脑肿瘤）的频率。事实上，Cxcl3的表达减少迫使小脑颗粒神经元前体保留在小脑表面，在Sonic hedgehog的刺激下它们高度增殖。值得注意的是，CXCL3治疗完全阻止了成神经管细胞瘤的Shh型小鼠模型中成神经管细胞瘤病变的生长。因此，CXCL3是成神经管细胞瘤治疗的靶标。

Cxcl3由BTG2 直接调节转录CXCL3的基因位于第4号染色体上的其他CXC趋化因子簇中。CINC-2β/CXCL3趋化因子是CXC亚家族的成员。编码的蛋白质是分泌的生长因子，通过G蛋白偶联受体CXC受体2发出信号。该蛋白质在炎症和中性粒细胞的化学引诱物中起作用。

临床应用^[4][5]

重组大鼠 CINC-2β/CXCL3可用于对小鼠移植性肝癌抗肿瘤的研究。方法建立小鼠CBRH-7919原位移植性肝癌模型,随机分为中药低、中、高剂量组和对照组,观察清热解毒方的抗肿瘤效应。采用趋化因子芯片筛选出不同剂量组间的差异基因(差异倍数至少为3),继而使用免疫组化及Western blotting方法对差异基因加以验证。

结果 (1)不同剂量清热解毒方均有不同程度的抗肿瘤作用(与对照组相比P<0.01),组间比较显示高剂量组抑瘤作用更为明显(P<0.01);(2)趋化因子芯片检测筛选出CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCR2及IL-1β为差异基因,其中中药干预组CXCL1、CXCL2、CXCL3及IL-1β基因表达下调,CXCR2基因上调,均以高剂量组最为明显(P<O.05);(3)免疫组化和Western blotting方法分别在蛋白水平上验证了以上差异基因。

结论清热解毒方具有显著下调小鼠移植性肝癌模型中趋化因子CXCL1,CXCL2,CXCL3及IL-1β表达,上调趋化因子受体CXCR2的作用,其抗肿瘤作用的机制可能与此有关。

用于研究鼠肝细胞癌(HCC)炎症中趋化因子的表达。方法:将CBRH-7919肝癌细胞注入裸鼠皮下。从两周开始，连续六周每周测量肿瘤生长情况。采用免疫组化方法检测成对肿瘤及邻近瘤周标本间质微环境及炎性细胞浸润情况，采用双染色免疫组化方法检测巨噬细胞表型，并结合细胞内酶表达。采用98个基因组成的趋化因子PCR芯片筛选差异基因表达，Western blotting验证。

此外，通过RNA干扰抑制已鉴定趋化因子的表达，评估其对肿瘤生长的影响。结果:炎性细胞浸润是相邻瘤周组织巨噬细胞、中性粒细胞和T细胞(尤其是helperand活化亚群)浸润增加的主要特征。邻近瘤周组织中的巨噬细胞表达诱导型一氧化氮合酶促炎表型。

在进展期肿瘤组织中发现51个基因，其中50个基因过表达(包括CXCL1、CXCL2和CXCL3)， 3个基因过表达(包括CXCR1、Ifg和Actb)。RNA干扰处于cbrh - 7919细胞减少裸小鼠肿瘤的生长和抑制表达CXCL2, CXCL3和interleukin-1βprotein。结论:cxcl1在肿瘤生长过程中起着重要作用，可能成为肝癌治疗的潜在分子靶点。

参考文献

1. Farioli-Vecchioli S,CinàI,Ceccarelli M,Micheli L,Leonardi L,Ciotti MT,De Bardi M,Di Rocco C,Pallini R,Cavallaro S,Tirone F(October 2012)."Tis21 knock-out enhances the frequency of medulloblastoma in patched1 heterozygous mice by inhibiting the cxcl3-dependent migration of cerebellar neurons".The Journal of Neuroscience.32(44):15547–15564.doi:10.1523/JNEUROSCI.0412-12.2012.PMID23115191.

2. ^Ceccarelli M,Micheli L&Tirone F(2016)."Suppression of Medulloblastoma Lesions by Forced Migration of Preneoplastic Precursor Cells with Intracerebellar Administration of the Chemokine Cxcl3".Frontiers inPharmacology .7:484 .doi:10.3389/fphar. 2016.00484.PMC5159413. PMID28018222.

3. ^O'Donovan N,Galvin M,Morgan JG(1999)."Physical mapping of the CXC chemokine locus on human chromosome 4".Cytogenet.Cell Genet.84(1–2):39–42.doi:10.1159/000015209.PMID10343098.

4. 清热解毒方对小鼠移植性肝癌抗肿瘤作用及趋化因子的影响[J].楚小鸽,韩慧,马璐璐,王磊,谢国群,陈洁,郭晓冬,韩克起,年华,朱全刚.上海中医药杂志.2017(01)

5. Inflammatory microenvironment and expression of chemokines in hepatocellular carcinoma[J].Ke-Qi Han,Xue-Qun He,Meng-Yu Ma,Xiao-Dong Guo,Xue-Min Zhang,Jie Chen,Hui Han,Wei-Wei Zhang,Quan-Gang Zhu,Hua Nian,Li-Jun Ma.World Journal of Gastroenterology.2015(16)