吴茱萸碱的提取纯化工艺研究进展

概述

吴茱萸始载于《神农本草经》，味苦，性温热，有小毒。 具有散寒止痛，疏肝下气，助阳止泻的功效。主要含多种生物碱、挥发油、味苦素等化学成分。吴茱萸碱是色胺吲哚类生物碱，是吴茱萸主要的生物碱类化学物，其分子式为C19H17N3O，分子品质为 303. 36，英文名为 evodiamine，简称 EVO。

图1-1吴茱萸碱性状图

现代药理研究表明，吴茱萸碱(EVO)对多种肿瘤细胞具有较强的杀伤和诱导凋亡作用，且起效浓度低。研究发现吴茱萸碱在 10-50 µmol·L-1可不同程度地杀死各种肿瘤细胞，但对人正常细胞并无杀伤作用，与其他化疗药物相比具有明显的优势，临床应用前景广阔。吴茱萸碱属于色胺吲哚类生物碱，是中药材吴茱萸的主要生物碱。吴茱萸主要含有吲哚生物碱类、喹啉酮生物碱类、黄酮类、内酯类、内酯醇类、苦味酸类、挥发油类等成分。

理化性质

吴茱萸碱（Evodiamine）为一种色胺吲哚类生物碱，吴茱萸碱为白色片状结晶，熔点 278℃，溶于丙酮，微溶乙醚、氯仿、乙醇，几乎不溶于水、石油醚、苯。吴茱萸碱含有带孤对电子的氮原子，可以给予或接受质子，呈碱性，并且极性小，可以与酸反应形成能溶于极性溶液的盐。

提取纯化工艺研究进展

总结近几年相关文献可知，吴茱萸碱的提取方法主要有回流提取法、超声震荡法、盐酸浸提法、索氏提取法、酸水煎法等。李书华[1]利用硅胶柱层析对吴茱萸总碱粗提物进行了纯化，氯仿溶解总碱上样后，石油醚：丙酮(v:v)梯度洗脱，在石油醚：丙酮为 5:1 的洗脱液浓缩后有大量晶体析出，过滤得到晶体，经结构鉴定后确定该晶体为吴茱萸碱。由于吴茱萸碱在吴茱萸中含量很低，难以进一步深入研究，因此有学者考察了吴茱萸碱的化学合成方法。熊瑜[2]利用 N-甲基邻氨基苯甲酸和 SOCl2反应生成亚磺酰胺酸酐，再与β-唑啉类化合物进行 Diels-Alder 反应，DMSO 重结晶后得到吴茱萸碱白色固体 22.63 g，产率 74.6%。许海玉等[3]采用氧化铝柱纯化了纯化吴茱萸提取液中总生物碱和柠檬苦素，总质量分数能达到 56. 1% ，但并未单独考察对吴茱萸碱的纯化工艺。邱时祎[4]采用制备液相分离纯化了吴茱萸碱，纯度较高，但该方法成本非常高。李姝影[5]采用价廉且使用广泛的大孔树脂［7-8］分离纯化吴茱萸碱，通过静态吸附-洗脱试验筛选吴茱萸碱的纯化树脂型号为D-101 型大孔树脂，利用单因素试验优选纯化工艺条件，即上样液质量浓度 3 g·L－1，上样量 4 BV，上样流速 1 BV·h－1，加水 5 BV去除水溶性杂质，加 80% 乙醇 5 BV 以 2 BV·h－1洗脱。吴茱萸碱洗脱率达92. 81%，吴茱萸碱的纯度由提取物的1. 29% 提高至26. 77%。为吴茱萸碱的新药研制提供参考。

抗肿瘤作用研究进展

现代药理研究表明，除了具有抗动脉粥样硬化，吴茱萸碱可以增强心脏功能、调节激素、抗炎镇痛、减肥，但也有明显的抗肿瘤作用，是中药吴茱萸的天然活性物质。众学者对其抑瘤活性、抗瘤机制进行了深入研究，发现吴茱萸碱(EVO)对多种肿瘤细胞具有较强的杀伤和诱导凋亡作用，且起效浓度低。张莹[6]研究发现吴茱萸碱在 10-50 µmol·L-1可不同程度地杀死各种肿瘤细胞，但对人正常细胞并无杀伤作用，与其他化疗药物相比具有明显的优势，临床应用前景广阔。

参考文献

[1]李书华.吴茱萸碱的分离纯化与晶体结构研究[J].乐山师范学院学报,2013,28 (5):29-31.

[2]熊瑜.吴茱萸碱及嘧啶并四环二氮卓的化学合成[D].长春工业大学,2012.

[3]许海玉，刘莹，张铁军.氧化铝柱纯化吴茱萸提取液中总生物碱和柠檬苦素的研究［J］.中草药，2010，41( 5) : 741-744．

[4]邱时祎.吴茱萸中生物碱的分离纯化和质谱表征[D].上海: 华东理工大学，2012

[5]李姝影.吴茱萸碱的大孔树脂分离纯化工艺优选

[6]张莹.吴茱萸碱抗肿瘤机制研究[D].沈阳药科大学,2003