小鼠大隐静脉平滑肌细胞的应用

背景^[1-3]

小鼠大隐静脉平滑肌细胞分离自大隐静脉；大隐静脉起于足背静脉弓内侧端，经内踝前方，沿小腿内侧缘伴隐神经上行，经股骨内侧髀后方，进入大腿内侧部，与股内侧皮神经伴行，逐渐向前上，在耻骨结节外下方穿隐静脉裂孔，汇入股静脉，其汇入点称为隐股点。有5条属支:旋骼浅静脉、腹壁浅静脉、阴部外静脉、股内侧浅静脉和股外侧浅静脉，它们汇入大隐静脉的形式多样，相互间吻合丰富。大隐静脉曲张行高位结扎时，须分别结扎、切断各属支，以防复发。

小鼠大隐静脉平滑肌细胞

大隐静脉平滑肌细胞主要功能：

①血管平滑肌细胞的生长潜力是原发血管病发的重要异常因素；

②参与血管壁的炎症反应，并与血管疾病的进展和稳定有关。

因此，研究大隐静脉平滑肌细胞的代谢和信号通路是研究大隐静脉扩张等疾病的良好实验材料。大隐静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

应用^[4][5]

用于血管平滑肌细胞和内皮细胞在小鼠血管损伤模型中的分子机制研究

内皮细胞作为构成的血管内膜的主要细胞,对于血管损伤后它们的形态学、体外培养和扩增,以及与平滑肌细胞之间相互关系的研究具有重要的意义。运用转基因小鼠颈静脉-股动脉移植模型模拟临床的冠脉大隐静脉搭桥术后血管

损伤,通过谱系追踪血管损伤后血管重构,血管内皮细胞的增生和分化病理机制。方法:运用可诱导的内皮细胞特异性标记的转基因小鼠Tie2Cre与带有报告基因YFP（黄色荧光蛋白）的小鼠杂交,繁殖出可在诱导剂Tamoxifen注射后,YFP在平滑肌细胞特异表达的转基因小鼠Tie2CreYFP。并模拟临床静脉移植术,建立小鼠颈静脉-股动脉内膜损伤模型,设立术后0天（未损伤）、术后3天、术后7天、术后14天和35天5个时间点。

于各时间点取组织进行免疫化学染色和计数观察。结果:活体的静脉移植实验中,标记YFP的内皮细胞系细胞逐渐获得平滑肌细胞的特征,而失去内皮细胞的特征。在离体实验中,EOMA细胞（小鼠内皮细胞瘤）在转化生长因子（TGF-β1）诱导4天后同样显示出平滑肌细胞的特性而失去原有的内皮细胞特征。

结论:在血管移植后移植血管发生了血管重构,增厚的新生内膜中的内皮细胞转化为平滑肌样细胞,TGF-β1在内皮间质化（EMT）中起到了主导作用。

参考文献

[1]PCI or CABG in coronary artery disease?[J].David P Taggart.The Lancet.2009(9670)

[2]The p21 and PCNA partnership:A new twist for an old plot[J].Carol Prives,Vanesa Gottifredi.Cell Cycle.2008(24)

[3]Post-translational regulation of the tumor suppressor p27 KIP1[J].J.Vervoorts,B.Lüscher.Cellular and Molecular Life Sciences.2008(20)

[4]Arterial versus venous endothelial cells[J].Nathaniel G.Paz,Patricia A.D’Amore.Cell and Tissue Research.2009(1)

[5]方芳.血管平滑肌细胞和内皮细胞在小鼠血管损伤模型中的分子机制研究[D].中南大学,2009.